双孔钾通道研究进展

钾通道是选择性允许K+跨膜通过的离子通道,而双孔钾通道是钾通道蛋白超家族的一个重要分支,其产生的电流为背景钾电流。因其具有十分重要且广泛的生理及病理学作用,近年来研究者们对双孔钾通道的研究进展较快。因双孔钾通道存在的亚型较多、功能复杂,现有研究较多,而现有综述性文献对其介绍不够清晰,本文即从分布与分类、生理病理及功能特性方面对其进行综述,以期为研究双孔钾通道的学者提供参考。

印防己毒素在不同类型突触分泌中的作用

为探讨印防己毒素(PTX)阻断抑制性自发和诱发的神经递质释放浓度是否存在差异,以及这些差异是否具有脑区特异性,采用鼠脑皮层神经细胞和海马神经细胞作为实验材料,在外液中加入不同浓度的PTX,分别记录了m IPSC的频率和e IPSC的幅值.结果发现:PTX作用于自发性神经递质释放的半抑制浓度(IC50)显著小于诱发性神经递质释放的,说明自发神经递质释放对于PTX的作用更为敏感.但是皮层细胞和海马细胞之间各项参数的差异较小,说明PTX在各脑区中的作用浓度相似.因此,PTX阻断抑制性神经递质自发释放和诱发释放可能有不同的机制,但并不具有脑区特异性.

一种新型的构建CRISPR/Cas9 KnockOut载体的方法

利用CRISPR/Cas9系统这一基于细菌核酸酶Cas9的新型基因编辑工具,可以在原核细胞和真核细胞中实现基因敲除的功能.首先使用CRISPR设计工具设计靶点,退火来制备sgRNA双链,用Bsm BⅠ酶切割gRNA质粒,构建Lenti CRISPRv2的重组质粒.通过U6启动子上的LKO1.5引物对每个菌落序列进行了测序验证,结果表明利用此新方法可以成功构建CRISPR/Cas9系统的Knock Out载体.

一种新型单个神经细胞的RT-PCR技术研究

提出一种新型可重复实现单细胞的RT-PCR的实验技术,扩增目的基因.应用玻璃微电极提取单个神经细胞,裂解获得mRNA,利用RT-PCR技术检测单个神经细胞的离子通道等基因的表达.应用此技术可以灵敏地检测特定电生理现象的分子生物学基础.此法可以比较大鼠背根神经节中大细胞内HCN1的mRNA表达量.实验结果表明:扩增产物的量足够用于后续实验,而且3个重复的均一性也很好,充分表明了该研究提出的实验技术的可行性.

企业成本管理变革与创新的思考

成本管理的创新与变革是企业从战略角度运用专门方法提供企业内部及外部的各类成本分析资料 ,并将成本信息贯穿于企业供销的循环中 ,帮助管理者形成和评价企业战略 ,使企业有效地适应外部持续变化的环境。通过对企业成本结构、成本行为的全面了解、控制与改善 ,寻求企业长久竞争优势。

铜离子对N2a细胞生长分化的影响

在小鼠的神经母瘤细胞(N2a细胞)中观察了铜离子对细胞生长分化的影响。在N2a细胞生长发育的过程中,于培养基中加入不同浓度的铜离子,对细胞进行了成像。采集不同生长时期的细胞分化率、分支数和分支长三个指标进行了测算、分析。结果表明:在N2a细胞加入梯度浓度的铜离子后,除在加入24h对细胞的分支长略有抑制作用外,铜离子对神经细胞的生长和分化并无显著影响。

一种新型的利用DSS交联剂避免重链轻链干扰的免疫沉淀技术

抗体是含有4条多肽链的对称结构,其中两条较长的相对分子量较大的为重链,大小为55KDa,另外两条较短的相对分子量较小的为轻链,大小25KDa。在免疫沉淀技术中如果目的条带大小和重链轻链的大小一样或接近将影响实验结果的判断。本文章通过DSS使抗体和蛋白A/G磁珠紧密交联,即使高温或还原剂作用下也不会破坏交联的结构,而高温或还原剂可以使抗体和抗原分开,从而达到SDS-PAGE检测到的条带都是蛋白条带而没有重链轻链条带的干扰的目的。

双语教学在生物医学信息检索课程中的应用

本文探讨了双语教学在生物医学信息检索课程中的应用,小结了医学信息检索课程双语教学的方法和技巧,并基于教学实践,对潜在的问题提出了相应的解决方案。

一种利用荧光酶标仪快速确立药动学参数的方法

探索了一种快速确立COX 52-69药代动力学参数的方法,为临床前研究提供理论基础。将大鼠断粮12h后,取空白血清加入荧光标记肽COX 52-69,利用荧光酶标仪检测光度值作为阳性对照。另取实验组大鼠6只,断粮12 h后,腹腔注射荧光标记肽COX 52-69并作为零时刻,分别在15 min、30 min、45 min、60 min、75 min、90 min、105 min尾静脉取血,静置2h后离心得血清,利用荧光酶标仪对血清进行了检测,再根据阳性对照组求得大鼠血清的血药浓度,利用DAS2.0绘制了血药浓度曲线。实验结果表明:该方法可以快速确立COX 52-69的药代动力学参数,同时具有低成本的优点。

基于ACNN-BLSTM的环状RNA识别

环状RNA(circRNA)是一类新的内源性非编码RNA,广泛存在于真核转录组中,它的环状结构是在剪接过程中通过5'端和3'端共价键反向连接形成.在过去的20多年里,环状RNA可以作为miRNA海绵发挥作用并且在基因调控中,环状RNA与癌症也有密切关系.所以,检测环状RNA对于理解它们的生物作用和生物起源是非常重要的.目前检测环状RNA的一般方法是依赖高通量测序(RNA-Seq),通过在数据中检测RNA的反向剪接位点.然而,由于数据本身和识别的准确度不高,导致其结果假阳性和假阴性偏高.因此,找到一种更准确、更快速的方法识别环状RNA是非常有必要的.为此,提出了基于深度学习的环状RNA识别方法,使用非对称卷积神经网络(ACNN)加双向长短时记忆网络(Bi-LSTM)的架构,利用环状RNA自身的序列特征在长非编码(lncRNA)中进行识别.实验结果表明:所提出的ACNN-BLSTM模型,在各方面性能指标和识别准确率上,都为5种模型中最优,并且识别准确率也达到了90%以上,对比另外四种常见的单一神经网络模型,该方法具有一定的优势.

利用CRISPR/Cas9技术构建大鼠CCKAR敲除载体

CCKAR在许多疾病的发病机理中具有重要作用。为研究其分子机制,选择利用CRISPR/Cas9基因编辑体系,构建KO载体。根据CCKAR基因序列设计敲除靶点,通过质粒单酶切、Oligo退火、连接,成功构建了CCKAR的敲除载体。该质粒的成功构建可为将来CCKAR基因的功能研究提供重要的基础。

动物癫痫模型的分类比较

癫痫是由脑部神经元阵发性异常放电所致的神经系统疾病,也是引起精神异常和死亡的常见疾病之一。癫痫的发生涉及神经网络、神经递质以及离子通道等变化,其机制依然不甚明了。对癫痫疾病的研究依赖于癫痫动物模型的建立,本论文从离体模型和整体模型两大类型概述遗传性癫痫模型、急性癫痫模型和点燃模型的特点、建立方法和适用范围;同时比较了不同模型的特点和局限性。本文旨在对癫痫的动物模型做一个简单明了的总结以期为其他研究者的工作提供参考。

癫痫动物模型的研究进展

癫痫是一种以脑神经元异常放电引起的反复痫性发作,表现为脑功能紊乱、肢体抽搐、行为障碍或感觉障碍,是神经系统常见疾病之一。对癫痫的研究目前主要是依赖于动物模型,根据诱发方式的不同,常见的整体癫痫动物模型可以分为三类:遗传失神动物模型,慢性动物模型和急性动物模型。本论文从该三大类动物模型建模方法、脑电特点、行为学评估和适用人类癫痫类型等方面进行了类比,旨在对癫痫的整体动物模型进行一目了然的概述,以期为相关研究领域的工作者选择合适的癫痫动物模型提供一定参考。

Crtac1在芬太尼诱导下痛觉过敏机制研究

指出了阿片类药物诱导的痛觉过敏(Opioid-induced hyperalgesia,OIH)是临床上的一个棘手问题,由于其发生机制尚不明确,故目前还没有一种良好的治疗方法。背根神经节(Dorsal root ganglia,DRG)是感觉传递的初级神经元所在部位,是机体疼痛信号处理乃至编码和传递的重要部位。已有研究认为阿片诱导的痛觉过敏也涉及DRG,但DRG参与阿片诱导的痛觉过敏的具体机制不详。为此,在动物模型的基础上筛选出了可能参与痛觉过敏发生的基因Crtac1,对其参与大鼠痛觉过敏的机制分别开展了初步的研究。首先,在大鼠颈部皮下反复注射枸橼酸芬太尼构建OIH模型,通过甲基化测序发现Crtac1在OIH组的DRG中与对照组的有显著差异。其次,通过半定量PCR发现Crtac1基因表达量在OIH大鼠的DRG中明显上调,这说明Crtac1可能在DRG水平上参与着痛觉过敏的发生。针对在DRG上参与OIH的调控作用进行的研究,有助于研究OIH的发生机制和信号通路,提供新的潜在治疗OIH的药物靶点。

神经性疼痛的表观遗传学机制

表观遗传机制包括但不限于DNA的甲基化、组蛋白的修饰与非编码RNA的分子调控。本文写作的主要目的是综述文献以表明表观遗传的调控机制在神经病理性疼痛的发生与发展的过程中起着越来越重要的作用。

疼痛与神经振荡的关系

疼痛是一种与外周神经和中枢神经系统的生理过程有关的复杂现象。产生于感官,在认知情感和动机过程之间动态的相互作用。近年来的研究表明神经振荡与疼痛有关,这有望进一步了解中枢神经系统神经元放电如何参与疼痛感知,同时为疼痛疾病的诊断和治疗提供新的线索。本文综述了人类和动物模型中有关疼痛的神经放电节律的研究进展,并讨论了神经振荡在疼痛诊断和治疗中的应用。

基于Python的Crispr/Cas9 Oligos批量生成器

CRISPR/Cas9基因编辑技术可以对细胞特定的基因片段进行定点编辑,sgRNA作为CRISPR基因编辑技术的重要环节,cas9酶在其介导下可以对靶基因组进行相应切割,sgRNA有特定的规则来管理oligos的生成。基于此,创建了一个基于Python的Crispr/Cas9 oligos生成器的本地应用程序工具,允许用户批量地在输入sgRNA序列中设计正向和反向oligos。该软件是专门设计用于Crispr系统的基于sgRNA生成两条oligos的工具,相比较手动编写,提高了工作效率与精度。

基于CRISPR/Cas9系统构建大鼠Kcnk2敲除载体的研究

指出了Kcnk2在多种疾病的发生机制中有着重要的地位,为了研究Kcnk2在相关疾病中的作用,利用所属CRISPR/Cas9系统的pL-CRISPR.EFS.GFP质粒,使用CRISPR设计工具设计敲除靶点,通过质粒酶切、引物退火、连接重组质粒,成功构建了Kcnk2的敲除载体,并通过DNA测序确定了插入序列。

新秀丽隐杆线虫的节律性排便的研究进展

指出了秀丽隐杆线虫是一种有节律性运动的生物,其中排便行为就是一种简单的节律性行为。这种简单性活动过程的执行需要基因和细胞的精确表达和调控。对秀丽隐杆线虫排便的活动过程的执行、周期的产生和调制,以及环境因素的影响进行了简单的综合性阐述。主要是从基因突变体上去分析了它们之间的作用及影响。