体外诊断试剂相关参考物质的使用现状分析

患者的有效诊断、临床研究和公共卫生研究都需要一个独立于时间、地点和测量程序的具有可比性的实验室结果。测量结果的可比性依赖于溯源体系的建立,其中合理使用参考物质是一种重要的途径。该文重点介绍了体外诊断试剂中参考物质的一些特点以及研发使用中遇到的问题,并针对常见问题进行深入的剖析和讨论,为未来实现检验结果的广泛互认,减少患者医疗消费和医保负担提供帮助。

实时荧光PCR法与流式细胞术两种方法检测HLA-B27的比较

目的比较实时荧光PCR和流式细胞术两种方法检测人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)。研究两种HLA-B27检测方法的差别和临床诊断的价值。方法分别采用实时荧光PCR法和流式细胞术两种方法检测138例病人血中HLA-B27,分析和比较两种方法的检测结果。结果两种检测方法检测结果的差异不具有统计学意义(P>0.05),两种方法的符合率为97.8%(135/138)。结论实时荧光PCR法与流式细胞术两种方法检测人类白细胞抗原-B27均准确和可靠,并且实时荧光PCR法能够判断流式细胞术所不能识别的双阳性结果。

骨科伤口标本分离革兰阴性杆菌及其耐药性

目的了解骨科伤口标本分离革兰阴性（G^-）杆菌的分布及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集2011年1月—2013年12月某综合性医院骨科各病区分离的682株G-杆菌,进行药敏结果分析。结果骨科伤口标本的G^-杆菌主要是铜绿假单胞菌（16.72%）、大肠埃希菌（15.40%）和阴沟肠杆菌（12.76%）。产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为54.29%（57/105）和31.43%（22/70）,两种细菌均主要分布在创伤骨科,分别占49.12%和45.45%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌对美罗培南和亚胺培南的敏感率均为100%。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸的敏感率均〉80%。除对哌拉西林的敏感率为64.37%外,阴沟肠杆菌对大部分抗菌药物敏感率介于71.26%～100.00%。铜绿假单胞菌除对头孢吡肟和氨曲南的敏感率为78.95%和65.79%外,对其他抗菌药物的敏感率均〉85%。结论 G^-杆菌是骨科伤口感染的重要病原菌,了解其菌种分布及耐药性,有利于合理使用抗菌药物,提高临床治疗效果。

支持HCV 1b亚基因组复制的细胞模型的建立

目的建立一个稳定支持中国人群HCV1b亚基因组高效复制的体外细胞模型。方法构建中国人群HCV1b亚型亚基因组复制子质粒,通过体外转录的方法获得亚基因组复制子RNA,采用电穿孔技术把RNA转染到Huh-7.5.1细胞中,经过G418筛选含有HCV1b亚基因组的细胞集落。RT-PCR检测细胞集落中的HCV亚基因组以及Western blot检测细胞集落中的HCV蛋白的表达。用干扰素(IFN)处理含有HCV亚基因组的细胞,观察细胞中HCV RNA的变化。结果G418药物筛选得到了支持HCV1b亚基因组复制的细胞集落。RT-PCR检测有HCVR NANS4B的表达,Western blot检测有HCV的非结构蛋白NS5B的表达。IFN处理含有HCV复制子的细胞,HCV RNA水平明显降低。结论成功建立了支持中国人群HCV1b亚基因组高效复制的体外细胞模型,为进一步研究HCV致病机制、治疗药物筛选及疫苗方面的研究打下了基础。

阴道微生物对经阴道盆腔手术的影响

目的 探讨阴道微生物对经阴道盆腔手术的影响.方法 选取2013年12月至2014年12月于北京积水潭医院行经阴道盆腔手术的患者45例,住院后立即行阴道分泌物培养.术前3d用0.5％碘伏消毒液进行阴道擦洗,术前30 min常规预防性应用抗菌药物.手术经阴道前或后穹窿入腹腔,行子宫、卵巢和输卵管手术,术后关闭阴道切口.将培养出条件致病菌的患者分入观察组（15例）,未培养出条件致病菌或单纯培养出乳酸杆菌的患者分入对照组（30例）.比较2组患者一般资料和围术期手术指标.结果 阴道分泌物培养阳性率为68.9％（31/45）,其中培养出乳酸杆菌患者16例（35.6％）,培养出其他条件致病菌患者15例（33.3％）.条件致病菌（除外乳酸杆菌）合计18株.药物敏感试验结果显示,针对条件致病菌预防性应用抗菌药物敏感率为55.6％ （10/18）,耐药率为38.9％ （7/18）,1例患者术前未用抗真菌药物.2组患者一般资料和手术类型之间比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）.对照组肛门排气时间短于观察组[1.0（1.0,2.0）d比2.0（1.0,2.0）d],差异有统计学意义（P＜0.05）,2组其余围术期指标比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 经阴道盆腔手术前,只需要阴道分泌物涂片阴性和常规阴道擦洗就可以安全手术.阴道微生物对经阴道盆腔手术无明显影响.

固体浸没透镜在荧光显微镜中的应用研究

把固体浸没透镜(solid immersion lens,SIL)应用到荧光显微镜中观察生物样本,考虑盖玻片的影响,分析SIL在荧光显微镜中应用提高荧光采集效率和分辨率的原理。并用实验证明SIL对荧光采集效率和分辨率的提高作用,提出把SIL与盖玻片集成加工。

浅谈新型冠状病毒核酸检测试剂性能分析

导致新型冠状病毒肺炎简称新冠肺炎的病原体是新型冠状病毒(2019-nCoV)。快速、准确的检测出新型冠状病毒对于控制新冠肺炎疫情至关重要。本文简单讨论了已上市新冠病毒核酸检测试剂在性能分析验证方面的要求,同时分析了此类产品上市后遇到的一些问题,对于后续生产厂家研发试剂提供参考。

浅谈诺如病毒核酸检测试剂评价

诺如病毒导致的儿童和成年人急性胃肠炎经常出现聚集发病,已经成为比较严重的公共卫生事件。近几年诺如病毒核酸检测试剂申报企业数量也在逐年上升,为提高此类产品的质量和方便监管人员的审评尺度,文章介绍了诺如病毒核酸检测试剂的性能要求和研发过程中可能需要关注的问题。

浅谈参考区间的建立和验证

随着体外诊断(In Vitro Diagnostic,IVD)检测技术的快速发展,检测分析物种类越来越多,能够给临床提供更多的辅助诊断信息,体外诊断试剂已经成为医疗机构非常重要的一部分。定量类体外诊断试剂需要满足溯源标准化,分析性能可靠,参考区间合理等条件,才能达到临床要求。文章简要介绍参考区间建立与验证的原则、方法以及已上市产品存在的问题,为以后同类产品注册提供帮助。

新型冠状病毒检测试剂研发与申报技术规范的开发与应用

2020年初,新冠疫情突然爆发,面对临床急需质量可靠的体外诊断试剂的情况,此课题应急开展科研攻关,组织制定了针对新型冠状病毒核酸、抗原、抗体三种检测试剂的研发与申报指导性技术规范,以审评要点的形式对外公开.审评要点内容覆盖了产品从研发主要原材料选择,到反应体系研究、产品设计、实验室验证、临床确认等上市前全流程的技术规范要求.针对这一新发病原体,在全球对其认知有限的情况下,解决了如何设计开发高质量的体外诊断试剂并进行合理充分的验证确认.为我国后续新冠相关诊断产品的上市提供了直接的、有力的指导,确保了抗疫所需诊断产品的高性能、高质量.