齐墩果酸通过抑制自噬调节变应性鼻炎中的Treg/Th17细胞失衡

目的:探讨齐墩果酸对变应性鼻炎(AR)的作用及潜在作用机制。方法:密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMCs)。实时定量PCR检测鼻黏膜中Foxp3、IL-17A、Beclin1、RORγt mRNA表达;流式细胞术检测PBMCs中Treg和Th17细胞比例;Western blot检测鼻黏膜中RORγt、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1、P62蛋白表达。将小鼠随机分为对照组、卵清蛋白(OVA)组、低剂量(L-)齐墩果酸组、高剂量(H-)齐墩果酸组、DSGC、3-MA和H-齐墩果酸+Rapa组。HE染色和高碘酸席夫(PAS)染色观察组织学变化。ELISA检测血清学变化、IL-17A、IL-10、嗜酸性阳离子蛋白(ECP)和抗OVA特异性抗体表达。结果:AR患者存在Th17/Treg失衡和自噬激活,而齐墩果酸在体外恢复Th17/Treg平衡并抑制自噬。体内实验表明,齐墩果酸可抑制OVA诱导的过敏性鼻部症状和自噬通路激活,与3-MA的调节作用相同,而Rapa可减弱高剂量齐墩果酸的作用。此外,齐墩果酸可减少鼻腔灌洗液中不同炎症细胞浸润,防止上皮细胞损伤,改善鼻黏膜厚度及黏液分泌。齐墩果酸可调节小鼠Th17/Treg相关细胞因子表达平衡。结论:齐墩果酸是治疗AR极具潜力的药物,通过抑制自噬调节Th17/Treg平衡发挥作用。

孤立性蝶窦疾病误诊分析

目的:探讨孤立性蝶窦疾病的误诊原因,提高对本病的诊断准确率,以降低其误诊发生率。方法:回顾分析1996-2005年32例孤立性蝶窦疾病患者的临床资料,分析误诊原因,并复习相关文献。结果:32例中25例患者主要以头痛和(或)眼部症状为首诊症状,其中21例在确诊前均不同程度地经历过首诊科室的相关特殊检查和治疗。首诊误诊为血管性头痛7例,偏头痛4例,三叉神经痛1例,视神经炎2例,眼部炎症1例,眶尖综合征4例,青光眼1例,鼻咽癌1例。全部病例均经CT或MRI及术后病理检查确诊,其中孤立性蝶窦炎9例,霉菌性蝶窦炎5例,蝶窦囊肿5例,蝶窦脓囊肿7例,蝶窦炎并息肉3例,蝶窦异物、蝶窦颅咽管瘤及蝶窦嗜酸性细胞瘤各1例。全部病例均行鼻内镜下蝶窦开放术,31例术后所有症状先后缓解至消失,1例无明显变化。结论:孤立性蝶窦疾病临床少见,又因其临床表现的非特异性、蝶窦解剖位置的特殊性,临床医师对其认识不足易致误诊、漏诊。此疾病诊断有赖于CT或MRI检查。近年孤立性蝶窦疾病误诊有明显下降趋势。鼻内镜技术改进使蝶窦疾病的治疗更安全、有效。

鼻内镜下3种儿童腺样体切除术的临床分析

我科2008年4月~2013年11月分别采用鼻内镜下腺样体刮除术,鼻电动吸切器腺样体吸切术（简称腺样体吸切术）及低温等离子腺样体微创融切术3种不同手术方法治疗儿童腺样体肥大186例,现总结报道如下。1资料与方法1.1临床资料1 8 6例腺样体肥大患儿中男1 0 3例,女83例;年龄3.5~1 2.5岁,平均年龄7.2岁;病史8个月至5年。诊断标准：患儿均有不同程度睡眠时打鼾,张口呼吸,憋气,鼻塞等临床症状,部分患儿并发慢性鼻和/或鼻窦炎,

鼻内镜下鼻腔多结构异常的联合手术治疗

目的探讨鼻内镜下同期联合手术治疗鼻腔多结构异常的方法及其疗效。方法同期对鼻腔多结构异常患者87例选择性采用鼻内镜下鼻中隔成形术、中下鼻甲成形术、钩突、筛泡切除术等联合治疗。结果随访半年以上,无手术并发症,治愈76例(87.4%),有效10例(11.5%),无效1例(1.1%),总有效率9 8.9%。结论发挥鼻内镜手术微创特点,对鼻中隔、中鼻甲、下鼻甲、钩突和(或)筛泡的结构异常行同期联合手术治疗,方法可行,疗效满意。

胆脂瘤型中耳炎并发迷路瘘管的临床特征及手术治疗方法分析

目的探讨胆脂瘤型中耳炎并发迷路瘘管的临床特征及手术治疗方法。方法选取2012年5月至2014年5月该院100例胆脂瘤型中耳炎并发迷路瘘管患者,将其随机分为两组,对照组和实验组,对照组采用单纯筋膜修复手术方法进行治疗,实验组患者采用自体骨粉加筋膜修复手术方法进行治疗,分别对两组患者的临床治疗效果以及手术治疗后的并发症发生情况。结果对两组患者手术后的效果进行比较,实验组的总有效率(92.00%)明显好于对照组的总有效率(68.00%),结果有统计学意义(P<0.05)。实验组患者的并发症发生率(4.00%)与对照组患者的并发症发生率(32.00%)相比明显较低,结果有统计学意义(P<0.05)。实验组患者的手术后的纯音测听骨导平均阈值(4.1±1.8)d B与对照组患者的手术后的纯音测听骨导平均阈值(4.6±1.7)d B相比较没有明显差异,结果没有统计学意义(P>0.05)。结论采用自体骨粉加筋膜修复手术方法对胆脂瘤型中耳炎并发迷路瘘管患者治疗的临床效果显著,避免了患者治疗后并发症的发生,安全可靠,值得推广应用。

清热宣痹汤治疗儿童急性化脓性鼻窦炎(肺经风热证)的疗效观察

目的观察清热宣痹汤治疗儿童急性化脓性鼻窦炎(ASS)(肺经风热证)的疗效。方法选取ASS(肺经风热证)患儿90例,采用随机数字表法将其分成观察组和对照组各45例。对照组患儿予以头孢泊肟酯干混悬剂治疗,观察组在对照组基础上采用清热宣痹汤治疗。观察两组治疗前后的主要症状评分、主要症状消失时间、鼻腔情况评分和生活质量评分的差异性,比较两组临床疗效。结果观察组治疗后鼻涕、鼻塞、发热、鼻黏膜分泌物症状评分明显低于对照组(P<0.05)。观察组主要症状消失时间明显短于对照组(P<0.05)。观察组治疗后鼻腔情况评分、生活质量评分明显优于对照组(P<0.05)。观察组临床总有效率为91.11%,明显高于对照组的73.33%(P<0.05)。结论对ASS患儿(肺经风热证)使用清热宣痹汤治疗,疗效良好,对缓解临床症状、缩短症状改善时间、改善鼻腔情况和生活质量具有良好效果。

THBS1基因编辑BMSCs对变应性鼻炎模型小鼠鼻黏膜屏障功能及炎症反应的影响

目的 探究血小板反应蛋白1(THBS1)基因编辑骨髓间充质干细胞(BMSCs)对变应性鼻炎(AR)小鼠的鼻黏膜屏障功能与炎症反应的影响。方法 分离培养小鼠BMSCs,流式细胞仪测定细胞表面标记物表达,茜素红染色和油红O染色检测细胞成骨与成脂分化能力,鉴定分离的结果;使用含THBS1基因的慢病毒感染BMSCs,荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白EGFP表达,并以实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞内THBS1 mRNA和蛋白表达情况,鉴定感染效果。实验分为对照组、模型组、BMSCs组、THBS1-BMSCs组,每组15只,除对照组外的其余3组小鼠均构建AR模型,对照组和模型组小鼠均尾静脉注射0.1 m L PBS,BMSCs组和THBS1-BMSCs组小鼠分别尾静脉注射0.1 m L BMSCs、0.1 m L经THBS1基因编辑的BMSCs。处理结束后,对各组小鼠流涕、挠鼻及喷嚏情况进行统计,ELISA法检测血清IFN-γ、Ig E、TNF-α、IL-4及IL-6的含量,HE染色和PAS染色观察鼻黏膜病理形态学变化,免疫荧光染色检测鼻黏膜内CK-5与β-tubulin表达情况,Western blot检测鼻黏膜内紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin的水平。结果 分离的细胞表面CD105、CD90和CD73为阳性表达,CD34和CD45为阴性表达,并具备良好的成骨与成脂分化能力,说明成功分离到BMSCs。经含THBS1基因的慢病毒感染后的BMSCs出现明显绿色荧光蛋白EGFP表达,THBS1 mRNA和蛋白相对表达均上调(P <0.05)。与对照组比较,模型组小鼠精神萎靡,伴有连续性喷嚏和挠鼻次数增加(P <0.05),血清IFN-γ含量降低,Ig E、TNF-α、IL-4、IL-6含量均升高(P <0.05),鼻黏膜结构受损,有大量嗜酸性粒细胞浸润,且杯状细胞数目也明显增加(P <0.05),CK-5与β-tubulin的荧光强度均减弱(P <0.05),Claudin-1、Occludin的蛋白相对表达均下调(P <0.05);与模型组比较,BMSCs组和THBS1-BMSCs组小鼠精神状态有所好转,喷嚏和挠鼻次数减少(P <0.05),血清IFN-γ含量升高,Ig E、TNF-α、IL-4、IL-6含量均降低(P <0.05),鼻黏膜内嗜酸性粒细胞与杯状细胞数目均减少(P <0.05),CK-5与β-tubulin的荧光强度增强(P <0.05),Claudin-1、Occludin的蛋白相对表达量均上调(P <0.05);与BMSCs组比较,THBS1-BMSCs组小鼠喷嚏和挠鼻次数减少(P <0.05),血清IFN-γ含量升高,Ig E、TNF-α、IL-4、IL-6含量均降低(P <0.05),鼻黏膜嗜酸性粒细胞与杯状细胞数目均进一步减少(P <0.05),CK-5与β-tubulin荧光强度显著增强(P <0.05),Claudin-1、Occludin的蛋白相对表达均上调(P <0.05)。结论 经THBS1基因编辑的BMSCs可明显增强AR小鼠的鼻黏膜屏障功能,降低炎症反应,从而减轻鼻部症状。

齐墩果酸通过抑制自噬调节变应性鼻炎中的Treg/Th17细胞失衡

目的 探讨齐墩果酸对变应性鼻炎(AR)中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)/辅助性T细胞17(helper T cells17,Th17)的调节作用及潜在机制。方法 收集AR患者鼻黏膜组织及外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclear cell,PBMC)。饲养BALB/c小鼠。PBMC用于建立AR细胞模型,BALB/c小鼠用于建立AR动物模型。对于AR细胞使用150μg/ml的齐墩果酸进行治疗。对于AR小鼠使用低剂量(L)-齐墩果酸(50 mg/kg)、高剂量(H)-齐墩果酸(200 mg/kg)、自噬抑制剂3-MA(10 mg/kg)、H-齐墩果酸+自噬激活剂雷帕霉素(Rapa,1 mg/kg)分别进行治疗。qRT-PCR测人鼻黏膜组织IL-17A和Foxp3的表达以及小鼠各组鼻黏膜组织中RORγt和Foxp3的表达。流式细胞术从PBMC中分选Th17和Treg细胞,并检测PBMC中白细胞介素17A(IL-17A)细胞和叉头样转录因子3(Foxp3)细胞的比例。Western blot法检测Th17和Treg细胞中自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、p62的表达。酶联免疫吸附试验检测各组小鼠鼻腔灌洗液中IL-17A和IL-10的表达。结果 AR组患者鼻黏膜组织中IL-17A表达显著增加,但Foxp3的表达显著降低(P均<0.05)。齐墩果酸下调PBMC中IL-17A的表达,并上调Foxp3的表达。齐墩果酸抑制Th17细胞和Treg细胞中Beclin1、LC3-Ⅱ以及LC3-Ⅰ的表达(P均<0.05),促进p62的表达水平。齐墩果酸降低AR小鼠体内IL-17A和RORγt水平,并上调IL-10和Foxp3的水平(P均<0.05)。结论 齐墩果酸通过抑制自噬信号改善AR中Th17/Treg细胞的平衡。

瞬时受体电位锚蛋白1通道调节慢性鼻窦炎上皮细胞自噬及细胞间黏附分子表达的作用探究

目的 探究瞬时受体电位锚蛋白1(transient receptor potential ankyrin1,TRPA1)对慢性鼻窦炎(CRS)上皮细胞自噬与细胞间黏附分子(intercellular adhesion moleclar-1,ICAM-1)表达的影响。方法 通过免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR及Western blot检测TRPA1在对照组、慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(chronic nasal-sinusitis without nasal polyps,CRSsNP)及慢性鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)患者鼻黏膜组织中的表达水平,并采用免疫组织化学染色和Western blot观察各组患者鼻黏膜组织内自噬水平;分离培养鼻黏膜上皮细胞,利用细胞角蛋白AE1进行免疫荧光染色鉴定上皮细胞;将鼻黏膜上皮细胞随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+TRPA1抑制剂组,实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞TRPA1在mRNA和蛋白上的表达水平,以自噬双标腺病毒mRFP-GFP-LC3感染细胞并通过荧光显微镜观察各组细胞自噬情况,并使用透射电镜观测各组细胞自噬小体形成,实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞ICAM-1在mRNA和蛋白上的表达水平。结果 相较于对照组,CRSsNP与CRSwNP患者鼻黏膜上TRPA1平均光密度值升高,其mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均上调(P<0.05),且LC3-Ⅱ平均光密度值升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,Beclin-1蛋白相对表达量上调而p62蛋白相对表达量下调(P<0.05),组织内自噬水平升高。成功分离到生长密集、形状为梭形或多边形以及AE1呈阳性表达的鼻黏膜上皮细胞;与LPS组比较,经过LPS与TRPA1抑制剂共处理的鼻黏膜上皮细胞TRPA1 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05),自噬溶酶体红色荧光减弱,自噬小体也明显减少,同时,ICAM-1mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05)。结论CRS中TRPA1表达异常增加,自噬水平也升高,靶向抑制TRPA1能够抑制CRS上皮细胞自噬以及ICAM-1表达的升高。

鼻窦内镜手术后术腔未按时清理的矫正性治疗

目的探讨鼻窦内镜手术后术腔未按时清理的矫正性治疗的必要性。方法回顾性分析46例慢性鼻窦炎、鼻息肉病人鼻窦内镜手术后因经济困难、工作忙等原因未及时清理术腔,致使症状加重被动复诊而行内镜下术腔矫正性治疗。结果46例病人经矫正性治疗后随访1年以上,其中治愈30例(65.2%),好转9例(19.6%),无效7例(15.2%)。结论鼻窦内镜手术后术腔未按时清理的矫正性治疗可矫正鼻窦内镜手术后连续一定时期内未主动随访所致术腔的再生病变,提高治愈率。

鼻内镜手术后术腔修正性清理

目的探讨鼻内镜手术后术腔修正性清理的必要性、原因及特点。方法回顾性研究65例慢性鼻窦炎、鼻息肉鼻内镜手术后患者,因经济差、工作忙等原因未定期随访,致症状加重被动复诊而行鼻内镜下术腔修正性清理,其后进行随访观察。结果修正性清理后随访一年以上,其中治愈43例(66.1%),好转12例(18.5%),无效10例(15.4%)。结论鼻内镜手术后术腔修正性清理可矫正术后因未主动随访所致术腔的再生病变,提高治愈率,是避免再次手术的有效措施。修正性清理有其适应证和特点。

电视纤维鼻咽喉镜下治疗声带小结、息肉387例报告

目的 探讨电视纤维鼻咽喉镜下治疗声带小结、息肉的方法与疗效。方法 应用接电视监视器的纤维鼻咽喉镜及配套的活检钳对387例声带小结、息肉进行钳切治疗，并对声嘶恢复，并发症，复发率，确诊率等进行观察。结果 有效率100％，无1例喉痉挛，正常声带组织损伤等并发症，1年后复发率3．02％。结论 电视纤维鼻咽喉镜下治疗声带小结、息肉简便易行，疗效可靠，损伤小，费用少，患者痛苦小，无并发症，复发率低，适宜推广应用。

蝶窦病变25例临床分析

目的:探讨蝶窦病变的诊断和治疗,以降低本病的误诊和漏诊率。方法:回顾性分析1996～2005年25例蝶窦病变患者的临床资料,并复习相关文献;25例均行鼻内镜下蝶窦手术。结果:25例患者主要以头痛和(或)眼部症状为首发症状,其中21例在确诊前经过首诊科室的相关检查和对症治疗。全部患者经CT或MRI检查及术后病理检查确诊;24例术后所有症状先后缓解或消失,1例无明显变化。结论:蝶窦病变易误诊、漏诊。诊断本病有赖于CT和MRI检查,CT三维重建可为术前评估提供多方位空间信息,鼻内镜下蝶窦手术使本病的治疗更安全、有效。