一氧化氮与炎症兔疫细胞

一氧化氮(Nitric oxide,NO)是一种结构简单的气体,在有氧的大气中是一高度活泼的分子。1987年首次证明血管内皮细胞可由左旋精氨酸(L—arginine,L—Arg)经酶合成NO,并揭示了NO与血管内皮衍生的舒张因子(EDRF)同质。历经数年对NO的多学科研究,发现体内(L—Arg:NO合成途径广泛存在,除血管内皮细胞外,还分布于中枢与外周神经原,内分泌腺与肝、肺、肠等组织,以及多种炎症、免疫细胞。

白芍总甙对B淋巴细胞增殖和白介素1生成的调节作用

白芍总甙（ＴＧＰ）对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应的量效曲线呈钟形，用贴壁法除去脾细胞中巨噬细胞（ＭΦ）或加入１０μｍｏｌ·Ｌ１吲哚美辛（Ｉｎｄ）可使ＴＧＰ量效曲线的下降支消失，再加５％同系小鼠腹腔ＭΦ中或前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）０．０２２０μｍｏｌ·Ｌ１可使量效曲线下降支再现．同步检测ＴＧＰ对ＬＰＳ诱导大鼠腹腔ＭΦ产生ＰＧＥ２与白介素１（ＩＬ１）．结果表明，ＴＧＰ０．５－３ｌ２．５μｇ·ｍＬ１对ＬＰＳ诱导的ＩＬ－１产生曲线呈钟形．而ＴＧＰＬＰＳ的ＰＧＥ２产生曲线呈浓度依赖性地增高；在１２．５－３１２．５μｇ·ｍＬＴＧＰ范围内，１０μｍｏｌ·Ｌ１Ｉｎｄ可使高浓度ＴＣＰＬＰＳ的ＩＬ－１释放曲线明显抬高。提示ＴＧＰ对ＬＰＳ诱导的Ｂ细胞增殖反应和ＩＬ－１诱生的负调节作用都与其促进ＭΦ释放ＰＧＥ２有关．

白芍总甙治疗类风湿性关节炎的临床药理研究

对２９例类风湿性关节炎（ＲＡ）患者进行了白芍总甙（ＴＧＰ）的开放性临床试验．结果表明，大剂量ＴＧＰ（１．２～１．８ｇ·ｄ－１）服用８ｗｋ，对ＲＡ患者有明显疗效．不仅改善临床症状与体征以及降低血球沉降率与类风湿因子滴度，而且对ＲＡ患者的异常免疫功能，如外周血单个核细胞产生ＩＬ－１水平；外周血淋巴细胞的致分裂素反应与产生ＩＬ－２水平以及ＩＬ－２受体密度；抑制性Ｔ细胞的数目等均有机能依赖性恢复作用。与氨甲喋呤（ＭＴＸ）的比较试验表明．ＴＧＰ的抗关节炎作用起效较ＭＴＸ早．但疗效较温和，对ＲＡ患者异常免疫功能的影响也不完全相同，且ＴＧＰ的耐受性远较小剂量ＭＴＸ为优。本试验还表明．ＩＬ－１可作为监护ＴＧＰ疗效和调整剂量的一种灵敏而简便的指标。

黄芪总苷对肝星状细胞增殖和合成胶原的抑制作用

目的 探讨黄芪总苷 (AST)对肝星状细胞增殖和合成胶原的影响。方法 采用枯细胞条件培养基 (KCCM )及含新生牛血清 (NBS)和健康大鼠血清 (RS)的混合血清刺激大鼠肝星状细胞 (HSC)系HSC T6 ,用 3H TdR和3H 脯氨酸参入法检测HSC增殖活性和胶原合成状况。结果 AST(1 6、32、64、1 2 8和 2 56mg·L- 1 )对KCCM 1∶4刺激HSC T6细胞增殖和胶原合成均有明显的抑制作用 ;在含 1 0 %NBS- 3 %RS混合血清刺激的HSC T6细胞 ,AST(32、64、1 2 8和 2 56mg·L- 1 )作用 48h对HSC T6细胞增殖 ,及AST(1 6、32、64、1 2 8和 2 56mg·L- 1 )作用 72h对HSC T6细胞胶原合成均有明显的抑制作用 ,呈浓度依赖型趋势。结论 AST对体外激活肝星状细胞的增殖和产生胶原有明显抑制作用 。

白芍总甙对佐剂性关节炎大鼠关节损伤的保护作用

通过检测佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠不同时间非致炎侧足爪容积，血浆丙二醛（ＭＤＡ）含量红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ），全血谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）活性，以及腹腔巨噬细胞释放亚硝酸盐（ＮＯ－２）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），研究了白芍总甙对关节损伤的保护作用．结果表明，白芍总甙５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ｉｇ×１４～２８ｄ对ＡＡ大鼠全程给药，不仅抑制足肿胀，而且降低ＡＡ大鼠过高的ＭＤＡ，ＮＯ－２和ＴＮＦ水平，同时还使其过低的ＳＯＤ和ＧＳＨＰｘ活性增高或恢复正常．相关分析结果提示，白芍总甙的抗关节炎作用与其降低脂质过氧化。

黄芪提取物的体外抗乙肝病毒作用

目的 研究黄芪提取物抗乙型肝炎病毒 (HBV)作用。方法 采用ELISA法观察两种黄芪提取物黄芪总苷(AST)、黄芪多糖 (ASP)对HBV DNA转染的HepG2 2 2 15细胞分泌表面抗原 (HBsAg)和e抗原 (HBeAg)影响 ,同时用3 H TdR掺入法检测HepG2 2 2 15细胞增殖。结果 AST( 4 0、80、16 0mg/L)、ASP( 2 5 6、5 12mg/L)对HBsAg、HBeAg分泌有抑制作用 ,ASP( 12 8mg/L)还可以抑制HBsAg分泌。AST( 4 0、80、16 0mg/L)、ASP( 12 8、2 5 6、5 12mg/L)可抑制HepG2 2 2 15细胞的增殖。抑制HepG2 2 2 15细胞分泌HBeAg、HBsAg和细胞增殖的半数有效浓度 (EC50 ) ,AST为88 14、92 0 7、32 81mg/L ,ASP为 35 0 5 9、35 4 38、139 5 5mg/L。结论 AST、ASP在体外实验中有抗HBV和抑制HepG2 2 2 15细胞增殖的作用 ,AST作用优于ASP。

黄芪总甙的抗炎作用及其作用机制探索

目的探索黄芪总甙 (AST)的抗炎作用及其作用机制。方法采用大鼠角叉菜胶气囊炎症模型 ,测定渗出液量、中性白细胞游出数、蛋白质、PGE2、IL_8、NO、PLA2 含量以及O2· 的生成量。结果AST40、80mg·kg-1 可使角叉菜胶诱导大鼠气囊炎症的渗出液量、中性白细胞游出数、蛋白质含量显著减少,降低渗出液及中性白细胞中PLA2 活性 ,减少渗出液中IL_8含量及中性白细胞O2· 的生成。AST也可明显减少渗出液中PGE2、NO的含量。结论AST的抗炎作用机理与其降低血管通透性和抑制白细胞游出、降低PLA2 活性、减少IL_8、PGE2。

白细胞介素Ⅰ的检测及白芍总甙对其产生的影响

本文对小鼠胸腺细胞增殖法检测IL—1的条件及白芍总甙(TGP)对其产生的影响进行了探讨。结果表明,LPS诱导大鼠腹腔Mφ产生IL—1的最佳浓度为8mg/L,诱导出富含IL—1的上清经活化的小鼠脾细胞检测表明无明显IL—2污染。富含IL—1的待测上清协同亚适量Con A诱导小鼠胸腺细胞增殖反应的最佳稀释度为1:90。TGP和亚适浓度LPS与大鼠腹腔Mφ体外共育6h后洗去药物和LPS,结果表明,TGP(0.5～12.5mg/L)可浓度依赖性地增加IL—1的产生,但高浓度TGP(62.5～125mg/L)时,IL—1产生显著降低,量效曲线呈钟罩形趋势,提示TGP对IL—1的产生具有双向作用。

香菇多糖的免疫调节作用

检测香菇多糖（ＬＮＴ）对环磷酰胺（Ｃｙ）诱导的免疫功能低下的小鼠脾细胞溶血素抗体（ＩｇＭ）生成的影响和对ＣｏｎＡ诱导小鼠脾淋巴细胞增殖反应和ＩＬ－２生成的影响。结果表明，国产ＬＮＴ的３种剂量（０．５，１，２ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×５ｄ，ｉｐ）显著促进ＩｇＭ抗体的生成，且以１ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１作用最佳。ＬＮＴ（１～１２５ｍｇ·Ｌ－１）可明显促进ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞增殖反应和ＩＬ－２的生成。量效曲线呈钟罩形。提示有浓度依赖性的双向免疫调节作用。

白芍总甙对T细胞调节功能的影响

本文用超适量免疫及^(60)Co照射加输注受训胸腺细胞等方法,诱导抗原特异性T_s和T_h细胞,并经过继性转移系统测定其功能及自芍总甙的作用,结果表明,白芍总甙(5 mg·kg^(-1)·d^(-1)×8 d,ip)对超适量2,4-二硝基氯苯(3 mg)或羊红细胞(SRBC,4×10~9)诱导的环磷酰胺敏感的T_s细胞均有促进作用,前者表现为受体鼠的耳肿度(Δwt7.4±s2.8mg)与ConA诱导的脾淋巴细胞增殖反应(3.4±s0.9)×10^(-3)cpm明显分别低于溶媒对照组的耳肿度(Δwt13.6±s3.2mg)和淋巴细胞转化(10.9±s2.8)×10^(-3)cpm,后者表现为溶血素抗体生成(A 0.26±s0.05)明显低于溶媒对照组,白芍总甙(5mg·kg^(-1)·d^(-)×10 d,ip)对小鼠辐照后低剂量SRBC(2×10~8)诱导的T_h细胞亦有增强作用,使受体鼠的溶血素抗体生成(A 0.74±s 0.10)明显高于溶媒对照组(A 0.57±s 0.06),提示白芍总甙对不同条件下分别诱导的T_s和T_h细胞均有促进作用,这可能是其发挥免疫调节作用的机理之一。

丹皮总苷体外对三类免疫细胞功能的影响

目的研究丹皮总苷（ＴＧＭ）体外对３类免疫细胞功能的影响。方法采用［３Ｈ］－ＴｄＲ参入法，检测Ｔ淋巴细胞增殖反应和分泌白介素２（ＩＬ－２）活性，Ｂ淋巴细胞增殖反应以及巨噬细胞产生ＩＬ－１。结果ＴＧＭ２～５０ｍｇ·Ｌ－１可明显促进刀豆蛋白Ａ诱导小鼠Ｔ淋巴细胞增殖反应和大鼠Ｔ淋巴细胞产生ＩＬ－２，ＴＧＭ还可促进脂多糖诱导Ｂ淋巴细胞增殖反应以及大鼠腹腔巨噬细胞产生ＩＬ－１，它们的浓度－效应曲线呈钟罩形。结论ＴＧＭ具有浓度依赖性双向免疫调节作用。

白芍总甙对白细胞介素-2产生的影响

白芍总甙(0.5～62.5mg/L)对ConA(3mg/L)诱导的大鼠脾细胞产生白细胞介素-2具有双向调节作用。同时用活化小鼠脾细胞检测了ConA诱导大鼠脾细胞产生白细胞介素-2的纯度,表明,主要以白细胞介素-2为主。

黄芪总苷的抑瘤作用及其作用机制

目的 探讨黄芪总苷的抗肿瘤作用及其作用机制。方法 采用小鼠肝癌 (HepA)和肉瘤 (S1 80 )两种小鼠移植瘤的动物模型 ,以瘤重抑制率作指标。体外采用人宫颈癌细胞株HeLa细胞 ,用MTT法测肿瘤细胞的生长 ,流式细胞术及TUNEL法检测细胞周期及细胞凋亡。结果 黄芪总苷显著抑制小鼠肝癌 (HepA)和肉瘤 (S1 80 )的生长 ;体外可显著抑制HeLa细胞的生长 ,使细胞周期阻滞于G0 /G1 期 ,并诱导其凋亡。结论 黄芪总苷对小鼠肝癌 (HepA)与肉瘤(S1 80 )具有抑瘤作用。对HeLa细胞的生长有直接抑制作用。其抗肿瘤作用可能与细胞周期阻滞于G0 /G1

白芍总甙对应激大鼠下丘脑一垂体一肾上腺轴和免疫功能的调节

本文以血浆皮质酮（ＣＳ）、促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）和β－内啡肽（β－ＥＮＤ）含量为指标，观察了白芍总甙（ＴＧＰ）对不同状态（正常或不同应激）的大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴（ＨＰＡＡ）及其免疫功能的调节作用。结果表明，ＴＧＰ对正常大鼠的ＨＰＡＡ呈现小剂量（１２．５～５０．０ｍｇ·ｋｇ－１）兴奋（血浆ＣＳ含量升高）和大剂量（１００～２００ｍｇ·ｋｇ－１）抑制（血浆ＣＳ含量降低）的剂量依赖性调节作用。其次，ＴＧＰ可兴奋轻度应激（２０℃水游泳）大鼠的ＨＰＡＡ和抑制重度应激（４℃水游泳或２４ｈ束缚）大鼠的ＨＰＡＡ，使过高的血浆ＣＳ、ＡＣＴＨ和β－ＥＮＤ含量降低，提示ＴＧＰ对应激大鼠ＨＰＡＡ呈现轴机能依赖性的调节作用。此外，ＴＧＰ在降低束缚应激大鼠血浆ＣＳ、ＡＣＴＨ和β－ＥＮＤ水平的同时，上调受抑大鼠脾淋巴细胞ＣｏｎＡ增殖反应和腹腔Ｍ释放Ｈ２Ｏ２，提示ＴＧＰ的免疫调节作用可能与其调节ＨＰＡＡ的功能有关。

黄芪总黄酮对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及机理研究

目的 :研究黄芪总黄酮 (TFA)对大鼠佐剂性关节炎 (AA)的治疗作用及机理。方法 :检测大鼠非致炎侧足爪体积 ,血清丙二醛 (MDA) ,滑膜细胞产生白细胞介素 1(IL 1)和亚硝酸盐 (NO-2 )量。结果 :AA鼠血清LPO、滑膜细胞产生IL 1和NO-2 量明显升高 ,且MDA和IL 1与AA鼠非致炎侧足肿胀度呈明显正相关 ,TFA全程或一周的阶段性治疗在发挥抗炎作用的同时 ,均可使AA鼠过高的MDA ,IL 1和NO降低。结论 :TFA对大鼠佐剂性关节炎有治疗作用 ,此作用可能与其降低血清LPO ,滑膜细胞产生的IL 1和NO量有关。

白芍总甙的免疫调节作用及机理

本文报道TGP的免疫调节作用,并探讨其作用机理。TGP 5 mg·kg^(-1)·d^(-1) ip 5～8 d对Cy诱导的小鼠DTH反应增高或降低呈反向调节,也可拮抗Cy诱导的小鼠溶血素生成量下降,表现出双向调节特征。TGP本身无有丝分裂原样作用,但终浓度45和450 ng/ml可促进ConA诱导小鼠脾淋巴细胞的增殖;同样浓度还可促进NDV诱导的人脐血白细胞产生IFNα,TGP的这种免疫增强作用可能是其体内向上恢复免疫功能的机理之一。TGP 5～10 mg·kg^(-1)·d^(-1) ip 4～8 d对DXM抑制小鼠溶血素的生成及DTH反应无明显拮抗作用,同时TGP还可使正常小鼠和DXM处理的SRBC致敏小鼠血浆CS水平下降。

白芍总甙对大鼠腹腔巨噬细胞产生白三烯B_4的影响

本文建立了测定大鼠腹腔巨噬细胞产生白三烯B_4的反相高效液相色谱法,并初步探讨了白芍总甙对白三烯B_4产生的影响。结果表明,在腹腔巨噬细胞(10~9～15×10^(10)/L)范围内,随着细胞数目的增加,白三烯B_4产生量也增加;白芍总甙(100mg/L)对大鼠巨噬细胞产生白三烯B_4的抑制作用与相同剂量的非甾体抗炎药氟灭酸相当,但作用较缓慢。白芍总甙(0.001～100mg/L)可剂量依赖性地抑制白三烯B_4的产生,其50%抑制率(IC_50)为0.66mg/L。提示白芍总甙的抗炎与免疫调节作用可能与其影响白三烯B_4的产生有关。

白芍总甙调节小鼠免疫功能的机理

用单克隆抗体间接免疫荧光法观察白芍总甙(TGP)调节小鼠免疫功能的部分机理。TGP(5 mg/kg·d^(-1)×8d,ip)拮抗环磷酰胺(Cy)所致小鼠DTH反应增高,与其使L3T4^+/Lyt-2^+细胞比值降低有关;TGP(5mg/kg·d^(-1)×5d,ip)拮抗Cy所致小鼠DTH反应低下及脾细胞抗SRBC溶血素的减少,与其使该比值增高有关。提示TGP对小鼠免疫功能的调节作用与其调节Th/Ts细胞比值有关。

黄芪总提取物抗衰老作用的实验研究

目的 研究黄芪总提取物 (totalextractofastragalus,TEA)延缓衰老的作用机理。方法采用小鼠D_半乳糖 (D_galactose,D_gal)人工衰老模型和自然衰老模型(17mon),从氧自由基代谢方面进行研究。结果TEA(40mg·kg-1·d-1ig×10wk)可明显降低D_gal衰老小鼠过高的MDA含量 ,上调其过低的抗氧化酶 (GSHPX、Mn_SOD)活性和GSH/GSSG比值。TEA(40mg·kg-1·d -1ig×3mon)对17mon小鼠亦有类似作用。结论TEA对D_gal衰老小鼠和由中年期(14mon)进入老前期 (17mon)小鼠的自然衰老进程有明显的延缓作用 。

白芍总甙对佐剂性生关节炎大鼠的免疫调节机制

动态观察白芍总甙（ＴＧＰ，５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｇ×２７ｄ）对佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠脾细胞刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）增殖反应发现，ＴＧＰ能使ｄ１４，２１与ｄ２８低下牌细胞增殖反应恢复正常。采用贴壁法纯化牌淋巴细胞（Ａ－），再回加２．５％的同系大鼠的腹腔巨噬细胞（ＰＭφ）建立重组细胞培养系统。结果发现，ＡＡ组的ＰＭφ能抑制正常和ＡＡ组Ａ－细胞的ＣｏｎＡ增殖反应，而ＴＧＦ治疗的ＡＡ组的ＰＭφ使上述培养的ＣｏｎＡ反应恢复正常，提示ＰＭφ是ＴＧＰ发挥治疗作用的一种靶细胞。采用放免法，动态观察ＴＧＰ对ＡＡ大鼠产生ＰＧＥ２的影响，发现ＴＧＰ能使ＡＡ鼠ｄ７、１４、２１与ｄ２８产生过高的ＰＧＥ２均恢复到正常水平。ＰＧＥ２与ＣｏｎＡ反应经相关性分析，发现ｒ＝－０．５５（Ｐ＞０．０５），提示ＡＡ大鼠ＰＭφ对ＣｏｎＡ增殖反应的抑制作用，除ＰＧＥ２外还有其它因子参与。