二甲亚砜和维甲酸对人卵巢癌细胞COC1的生长抑制和超微结构的影响

本实验以人卵巢癌细胞株COC1为模型，观察了诱导分化剂二甲亚砜（DMS0）与维甲酸（RA）对该细胞生长增殖及超微结构的影响。结果表明，DMSO和RA可明显抑制COC1细胞的生长，并改变其恶性细胞的结构特征，使之向正常细胞的方向逆转，从而提示DMSO和RA对人卵巢癌细胞有一定的诱导分化作用。

10例进行性肌营养不良肌肉组织活检的电镜观察

目的 探讨进行性肌营养不良的发病机理及诊断。方法 对 10例不同临床类型的进行性肌营养不良症的腓肠肌活检标本进行了光镜和电镜观察。结果 在所有的标本中肿胀肌纤维与萎缩肌纤维混合存在 ,大量的小泡多见于前者肌浆中。局灶性微孔肌浆膜的出现常见于该病症的早期。随病程进行 ,肌浆膜有片状缺失。常见肌纤维间、原纤维间、微丝间和肌浆内水肿变性。多见线粒体肿胀、嵴断裂、消失及结晶样包含物的出现 ,同时见到肌浆网扩张。二者同积聚的糖原常充填于肌溶灶处。在病变早期肌原纤维的微丝显出排列紊乱 ,相邻原纤维的Z线不在一条水平线上排列 ,Ⅰ带变宽 ,肌小体增长。最后受损肌原纤维溶解 ,断裂和凝固性坏死 ,随后单核细胞入侵。结论 虽然临床上将本病症分为若干类型 ,但所有标本中的类型未见有特异性的超微结构改变 ;微孔肌浆膜的早期出现是该病的主要特征。本文最后还就肌浆膜的破损、Dystrophin(肌营养不良蛋白 )

HSV-2阴道感染并诱导小鼠阴道粘膜上皮细胞凋亡

最近的报道指出，某些病毒有诱导体外细胞凋亡的作用，借以限制病毒的扩散。为探讨ＨＳＶ－２在体内诱导细胞凋亡的效果及其形态学特点，用 ＨＳＶ－２ ３３３株感染小鼠阴道，于感染后不同天数处死动物，取其阴道，固定于１０％中性福尔马林，ＴＵＮＥＬ末端标记染色显示凋亡的细胞，光镜下进行原位观察。结果显示：感染后的第１天粘膜上皮内即出现大量的凋亡细胞，第２天至１１天凋亡细胞的数量及在上皮内的分布范围达最高水平。早期的凋亡细胞见于感染后所有标本，其核染色质形态及分布似正常细胞，但它被ＴＵＮＥＬ标记染成棕黄色；晚期的凋亡细胞亦见于所有标本，其胞核缩小，染色质浓缩并在核周边集聚，核中心空化。载有凋亡细胞的上皮在阴道粘膜上分布很广，最广的可占全阴道上皮的２／３。同时可见ＨＳＶ．２引起的上皮细胞坏死及疱疹形成，二者均由凋亡细胞包围。凋亡细胞不断地由上皮表面脱落至阴道，未见凋亡小体及吞噬现象。结果提示，ＨＳＶ－２ ３３３株阴道感染可同时诱导细胞坏死及凋亡，细胞凋亡可能在限制病毒产生子代及限制感染区域扩展起重要作用。

3-氯丙二醇及2,3-氧丙醇合并用药对大白鼠附睾超微结构的影响

本研究用电镜(辅以半薄切片的光镜检查)观察了3-氯丙二醇及2,3-氧丙醇合并用药对大白鼠附睾起始部及尾部超微结构的影响。同时,对二者单独使用时的作用进行了对比观察。结果表明:在较低有效抗生育剂量合并用药(α-ch 5mg+gly 75mg/kg/天×2)3天后,多数动物附睾管的主细胞、顶端细胞、基底细胞及亮细胞,管壁平滑肌细胞以及间质微血管内皮细胞的线粒体出现了不同程度的肿胀和退变。部分动物附睾上皮主细胞的高尔基大泡,吞饮小泡、多泡小体、不动纤毛及顶部滑面内质网亦有减少。细胞核未见明显改变。随着停药时间的延长,正常形态的线粒体的数量有相对增加的趋向,其它因药物作用而变化的细胞器亦趋向恢复。在高剂量合并用药组(α-ch 20mg+gly 100 mg/kg/天×2),除见有上述变化外,在部分动物的少数附睾管断面见到上皮细胞坏死、脱落,精子的质膜破裂、线粒体肿胀及核固缩等改变。单独使用3-氯丙二醇及2,3-氧丙醇对附睾超微结构的影响与合并用药相似。但二者影响的程度不及合并用药明显。这类药物在较低有效抗生育剂量下引起的附睾上皮细胞线粒体的损伤,主细胞高尔基复合体、滑面内质网及吞饮小泡的减少或功能降低,可能导致附睾正常生理功能的改变,从而造成不利于精子成熟的环境而产生抗生育作用。此外,药物对附睾管壁平滑肌细胞的线粒体及附睾微血管内皮细胞线粒体均引起不同程度的损伤,其程度严重者可能导致精液囊肿的产生。

二甲亚砜与维甲酸对人卵巢癌细胞COC1的生长抑制及转化生长因子β_1表达的影响

本实验以人卵巢癌细胞株（ＣＯＣ１）为模型，观察诱导分化剂二甲亚砜（ＤＭＳＯ）与维甲酸（ＲＡ）对该细胞生长增殖、ＤＮＡ合成和转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在细胞内表达的影响。结果显示：ＤＭＳＯ与ＲＡ对人卵巢细胞ＣＯＣ１生长有明显的抑制作用，生长曲线表明作用５天后其生长抑制率分别为６２．７％和４２．１％；３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入实验说明ＤＭＳＯ组与ＲＡ组的单位时间计数率（ＣＰＭ）明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。用药３天后百分掺入抑制率分别为６０．４％与３７．９％，表明ＤＭＳＯ与ＲＡ抑制ＣＯＣ１细胞的ＤＮＡ合成；免疫细胞化学反应表明，ＤＭＳＯ或ＲＡ处理５天后，对照组细胞ＴＧＦβ１表达为阳性，定位于胞浆，而处理组细胞ＴＧＦβ１呈阴性或弱阳性反应。以上结果提示ＤＭＳＯ和ＲＡ对人卵巢癌细胞有一定的诱导分化作用。

胶体金免疫电子显微技术用于病毒抗原的检测

本文报道了一种改良的胶体金免疫电镜技术:以低温包埋,常规超薄切片代替超薄冰冻切片,成功地显示了细胞内的病毒抗原定位。

黑线姬鼠肺泡Ⅱ型细胞及表面活性物质的电镜观察

本文对经免疫荧光证明为流行性出血热抗原阳性的黑线姬鼠肺泡Ⅱ型细胞及表面活性物质进行了电镜观察。以抗原阴性的黑线姬鼠,实验室的大、小白鼠的肺组织作为对照。在上述所有的肺组织的肺泡腔面,均可发现髓膜样结构及指纹状结构。后者由髓管组成,其横断面呈晶格状,类似病毒颗粒,与Lee在1978年报道的流行性出血热的病毒样颗粒,几乎一致。本研究描述了由髓膜样结构发展为指纹状结构及肺泡Ⅱ型细胞中,多板层小体发展为髓膜样结构的过程。在肺泡Ⅱ型细胞中尚观察到由线粒体发展为多板层小体的多种过渡形态。

几种缺血原位肾保护方法的比较实验研究——组织学及组织化学观察

本文对局部低温、低温平衡液附加其它药物灌注等五种保护缺血肾的方法,在13只狗的实验中进行了组织学及组织化学的初步观察和比较。实验结果表明:A组(局部低温)、D组(局部低温加肝素)及E组(局部常温)实验处理四小时内的不同间隔及停止处理后存活30~60天的取材标本中均显示了不可逆的组织学变化。琥珀酸脱氢酶、碱性磷酸酶、三磷酸腺苷酶均于实验处理1~2小时后开始减少,四小时后呈弱阳性或阴性反应,反应肾组织因缺血受损程度严重,说明这三种护肾措施对缺血肾保护作用不明显。B组(低温灌注液加普鲁卡因及肝素灌注)实验处理时组织学及组织化学变化轻微,实验处理后60天所有变化基本恢复。C组(低温灌注液加甘露醇、硫酸镁、ATP及肝素灌注),实验处理时及处理后60天均未发现组织学及组织化学有异常变化,说明该组措施对缺血肾的保护效果较其余各组为佳。

3-氯丙二醇及2,3-氧丙醇合并给药对大鼠附睾、肝、肾超微结构的影响

以每日5mg/kg的3-氯丙二醇及75mg/kg的2,3-氧丙醇同时给大鼠灌胃,连续给药2天后停药8天,共10天为一疗程。观察了3,6,9疗程结束时,附睾起始部主细胞的超微结构改变,及附睾管起始部的精子和肝脏、肾脏的超微结构。发现在3、6疗程末,附睾主细胞的高尔基复合体扁平囊变窄,大泡皱缩。在6疗程末,细胞表面的吞饮小泡和静纤毛减少。仅在3疗程见到粗面内质网扩张。9疗程的超微结构与对照比较无明显区别。结果提示,每一疗程药物引起的附睾主细胞超微结构的改变,在多数动物是可恢复的。但由于个体差异,部分动物于疗程之末,尚未完全恢复。在第6疗程末的肝脏,有部分肝细胞滑面内质网扩张,线粒体体积缩小,基质电子密度增高。这些变化可能是一种轻度的细胞损伤,这种损伤在3,9疗程均未发现,说明它与疗程长短不呈平行关系。肾尿细管上皮细胞及附睾起始部精子的超微结构,无可见改变。这一结果为阐明3-氯丙二醇及2,3-氧丙醇合并用药的抗生育作用,及对有关内脏的毒性作用,提供了形态学的依据。

3-氯丙二醇和2,3-氧丙醇小剂量合并长期间歇用药后某些器官的组织学检查

本实验每日以5mg/kg体重3-氯丙二醇和75mg/kg体重2,3-氧丙醇合并用药给雄大鼠灌胃,连续2天,停药8天,以10天为一疗程,共给药9疗程。于给药3、6、9疗程及3、6疗程停药后90天,9疗程停药后120天,分别对大鼠睾丸、附睾的组织学改变以及内脏器官组织学变化、末梢血液细胞计数及分类、骨髓细胞增生度及骨髓细胞微核率进行检查。研究结果表明,合并用药引起睾丸生精上皮功能抑制和附睾内精子退变所产生的抗生育作用是可逆的;对造血功能以及内脏的组织学结构、骨髓细胞微核率的影响不明显,或无统计学意义。因此,以小剂量3-氯丙二醇和2,3-氧丙醇间歇(疗程)长期给药,无明显毒性和副作用。

宫颈癌病毒病因研究 Ⅰ.宫颈癌活检组织中疱疹病毒Ⅱ型核酸及抗原的检测

自Naib提出生殖道HSV-2感染与宫颈癌发生有关这一假设以来,许多学者试图在宫颈癌组织中证明HSV-2 DNA的存在。1972年Frenkel等首先报道在宫颈癌组织中发现HSV-2 DNA序列,此标本含有39％的病毒基因组,以后许多学者应用相似的方法在有限量的标本中均未证实这一观察。

宫颈疾患中人乳头瘤病毒抗原的检测及其与组织学的关系

通过特异性强的过氧化物酶——抗过氧化物酶(PAP)法,我们对一系列临床宫颈疾患中人乳头癌病毒(Human Papillomavirus,HPV)抗原进行了检测,并分析了空泡细胞与抗原检出率的关系,结果表明,在31.3％(5/16)的宫颈不典型增生中和2.1％(1/48)的浸润性宫颈癌中测到了 HPV 抗原,而19例慢性宫颈炎标本中无一例阳性;16例宫颈不典型增生中有11例存在空泡细胞,而这11例空泡细胞阳性的标本中仅有4例 HPV 抗原阳性;16.6％(8/48)的浸润性宫颈癌中存在空泡细胞,但仅有1例标本 HPV 抗原阳性。实验结果提示,HPV 可能与宫颈癌的发生有关,空泡细胞作为诊断宫颈 HPV 感染的特征性标志,值得怀疑。

超声波对家犬实验性附睾淤积症治疗的电镜观察

用超声波处理家犬附睾淤积区8 min(功率0.75 W/cm^(2)),每日1次,连续7 d。结果发现:由输精管结扎所引起的附睾超微结构的异常改变或明显改善,或完全复原;同时造成附睾主细胞新的损伤。本实验通过输精管结扎组与对照组、超声波治疗组与输精管结扎组的比较,既为超声波对输精管结扎并发附睾淤积症疗程治疗近期效果提供了形态学依据,也提示进一步探索该物理因子作用最适宜的“量”的必要性。本文还对超声波治疗输精管结扎并发附睾淤积症的机理进行了讨论。

鹌鹑(Coturnix coturnix Japonica)作为抗生育药物筛选的动物模型的可能性

啮齿动物是实验室的常用动物,也是抗生育药物筛选的常用动物。但是近年来运用鹌鹑作为实验对象的报道不断出现,由于其蛋孵化期短、体型小、早熟、产蛋率高、换代快,故受到实验动物学家们的欢迎,尤其受到遗传学家们的偏爱。鉴于上述诸优点,本实验就鹌鹑对抗生育药物的反应进行了研究,以期对该动物能否作为一种抗生育药物筛选的动物模型作出评价。

HSV—2(333)对小鼠C型病毒的辅助致癌作用观察

HSV—2(333)是一种DNA病素,C型病毒是一种RNA病素。在接种3C型病毒的小鼠中白血病的发生率是41.02％,当用这两种病毒接种小鼠以后,白血病发生率增加到79.16％,单独用HSV—2(333)接种的小鼠和对照组的小鼠无白血病发生。实验结果表明HSV—2(333)对小鼠无致癌作用,它是一种辅助致癌因子。

HSV-2感染小鼠导致脊髓白质髓鞘脱失的研究

该实验为了解人类Ⅱ型单纯疮疹病毒（HSV－2）所致中枢神经系统（CNS）白质的脱髓鞘机制，将病毒经阴道感染小鼠。在感染前用环磷酸胺腹腔注射抑制小鼠免疫力，在病毒感染后第8天取小鼠脊髓制作样本分别进行光镜和电镜观察。结果显示，在机体免疫力抑制的条件下，病毒引起的髓鞘脱失率高于单独病毒感染所致。认为髓鞘脱失是由于病毒直接作用于少突胶质细胞及与其有关的髓鞘所致，而非自身免疫所引起。在讨论中认为由于免疫力降低，增加了病毒对少突胶质细胞及与其有关的髓鞘的毒性攻击能力，以致脱髓鞘频率增高。本实验的电镜中观察显示了少突细胞线粒体变性及髓鞘水肿变性，此时神经纤维轴索未受损伤。随后纤维断裂、崩解、被吞噬细胞吞噬，其时胞浆中内含有大量的次级溶酶体，其中的变性髓鞘处于不同的消化阶段。

单纯疱疹病毒Ⅱ型与白血病的相关性研究

小鼠白血病可由C型病毒引起早已得到证实。在本实验中用C型病毒接种小鼠以后其白血病的发生率是41.02%,用HSV—2(333)接种的小鼠以及对照组的小鼠均未发生白血病。当用了C型病毒与HSV—2(333)共同接种小鼠以后其白血病的发病率高达79.16%。它与单独接种了C型病毒的小鼠白血病发病率相比较,在统计学上具有高度显著性差异(P<0.01)。实验结果表明HSV—2(333)对小鼠无致白血病作用,可是它对C型病毒诱发小鼠白血病具有促进作用。

实验性小鼠宫颈癌和(或)阴道癌中HSV—2抗原的检测

为进一步探索HSV—2与宫颈癌的关系,本实验采用PAP方法检测了HSV—2诱发的实验性小鼠宫颈癌或阴道癌中的HSV—2抗原。19例癌组织中有18例为HSV—2抗原阳性,阳性率为94.27％。在24例无癌宫颈阴道组织中,12例为HSV—2抗原阳性,阳性率为50％。两组阳性率有高度显著性差异。本实验进一步完善了HSV—2诱发宫颈癌动物模型。

郎格罕细胞抗单纯疱疹病毒感染作用的实验研究

本实验用接种单纯疱疹病毒方法,诱发豚鼠皮肤及唇粘膜疱疹,动态观察接种区疱疹发生及郎格罕细胞 (LC) 的变化。结果表明接种病毒后2～3天,皮肤或唇粘膜即发生疱疹,前音散在出现,持续3～5天;后者成群发生,持续5一8天。皮肤病灶内 LC 数目明显减少,而唇粘膜接种部位内树枝状、ATPase(+)LC 完全消失。病灶周围皮肤或粘膜 LC 随之向病灶迁移,聚集在形成疱疹的部位。至疱疹消失,LC 数目复原。由此提示,在病毒感染早期,LC 可能具有类似巨噬细胞的功能。

疫苗在单纯疱疹病毒Ⅱ型诱发小鼠宫颈癌中的作用

本世纪六十年代以来,人们对单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)与宫颈癌的关系进行了多方面的研究,大量资料提示:HSV-2与宫颈癌的发生密切相关。