山奈酚联合骨髓间充质干细胞治疗溃疡性结肠炎小鼠的疗效及机制

目的观察山奈酚联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗溃疡性结肠炎小鼠的疗效并探讨其机制。方法3周龄雄性C57BL/6J小鼠处死后提取BMSCs,12只6周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组、造模组、造模与山奈酚治疗组以及造模与山奈酚联合BMSCs治疗组,每组3只。对照组小鼠自由饮用正常灭菌双蒸水,其余3组小鼠自由饮用含3%葡聚糖硫酸钠的灭菌双蒸水建立溃疡性结肠炎模型,造模与山奈酚治疗组、造模与山奈酚联合BMSCs治疗组小鼠同时给予每日山奈酚灌胃,造模与山奈酚联合BMSCs治疗组在造模第1天、第4天和第7天尾静脉注射提取的BMSCs,其余组小鼠灌注同样量的溶解剂。造模结束后10 d,每天测量小鼠体质量,10 d后取出小鼠结肠,测量小鼠结肠长度。采用流式细胞术检测小鼠结肠组织辅助性T淋巴细胞(Th17)、调节性T淋巴细胞(Treg)比例,ELISA法检测小鼠血浆白细胞介素17A(IL-17A)、IL-10,RT-qPCR法检测小鼠结肠组织IL-17A、IL-10 mRNA。采用HE染色观察小鼠结肠黏膜组织病理学改变,免疫组织化学染色观察小鼠结肠组织肠上皮紧密连接蛋白occludin及ZO-1表达情况。结果结肠长度对照组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>造模与山奈酚治疗组>造模组(P均<0.05);造模结束后1~10 d,对照组体质量逐渐上升,造模组体质量逐渐下降,造模与山奈酚治疗组、造模与山奈酚联合BMSCs治疗组体质量自第6天开始逐渐上升,且造模与山奈酚联合BMSCs治疗组体质量高于造模与山奈酚治疗组。结肠组织Th17比例造模组>造模与山奈酚治疗组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>对照组,结肠组织Treg比例对照组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>造模与山奈酚治疗组>造模组(P均<0.05)。血浆、结肠组织IL-17A表达造模组>造模与山奈酚治疗组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>对照组,IL-10表达对照组>造模与山奈酚联合BMSCs治疗组>造模与山奈酚治疗组>造模组(P均<0.05)。HE及免疫组化染色结果显示,与造模组比较,造模与山奈酚治疗组、造模与山奈酚联合BMSCs治疗组结肠黏膜组织损伤程度减轻,肠上皮紧密连接蛋白occludin及ZO-1表达增加,且造模与山奈酚联合BMSCs治疗组对结肠黏膜组织损伤的改善作用更加明显。结论山奈酚联合BMSCs治疗溃疡性结肠炎小鼠能够提高疗效,其机制可能与调节Th17/Treg平衡以修复肠道上皮屏障有关。

人胃癌组织中γδT细胞亚群变化及意义

目的通过检测人胃癌组织中γδT细胞及其亚群多种效应分子、细胞因子的水平,了解γδT细胞及其亚群的功能变化及意义。方法选取手术切除的新鲜胃癌组织和正常胃组织(距离癌灶边缘>5 cm)标本,采用Ⅱ型胶原酶等酶消化法分离成单细胞悬液;流式细胞术检测γδT细胞颗粒酶B、穿孔素、CD107a和IL-17A、IFN-γ的水平。结果 (1)胃癌组织中CD27+γδT细胞比例显著高于CD27-γδT细胞的比例及正常胃组织中CD27+γδT细胞比例(P<0.05);(2)胃癌组织中γδT细胞IL-17A的分泌水平明显高于正常胃组织(P<0.05),而颗粒酶B、穿孔素、CD107a等抗肿瘤效应分子的表达与正常胃组织比较,差异无统计学意义(P>0.05);(3)CD27+γδT细胞IL-17A的分泌水平显著高于CD27-γδT细胞(P<0.01),且其在胃癌组织中明显高于正常胃组织(P<0.05),在Ⅲ/Ⅳ期胃癌组织明显高于Ⅰ/Ⅱ期胃癌组织(P<0.05)。结论 (1)胃癌组织中的γδT细胞分泌IL-17A明显增高;(2)CD27+γδT细胞亚群是胃癌组织中γδT细胞的优势亚群,并可能通过分泌细胞因子IL-17A参与胃癌的发生、发展。

人胃癌组织中淋巴细胞亚群比例变化及意义

目的通过检测人胃癌组织中淋巴细胞亚群的比例及78T细胞IL-10的分泌水平，了解胃癌组织中淋巴细胞亚群的变化及意义。方法取手术切除的新鲜胃癌组织和正常胃组织（距离癌灶边缘大于5cm）标本，采用Ⅱ型胶原酶等酶消化法分离成单细胞悬液；流式细胞术检测淋巴细胞亚群的比例及78T细胞IL-10的分泌水平。结果胃癌组织中的CD4＋T细胞亚群明显高于正常胃组织，而CD8＋T细胞亚群则明显低于正常胃组织，癌组织中CIM＋T细胞与CD8＋T细胞的比值明显较正常胃组织高（P〈0．05）。胃癌组织中CD27＋γδT细胞比例[（68．40±1．94）％]显著高于CD27-γδT细胞的比例[（31．60±1．94）％]及正常胃组织中CD27＋γδT细胞比例[（58．98±3．46）％]（P〈0．05）。胃癌组织中18T细胞IL-10的分泌水平[（7．87±1．05）％]明显高于正常胃组织[（3．82±0．71）％]（P〈0．01）；各组织中CD27＋γδT细胞IL-10的分泌水平显著高于CD27-78T细胞（P〈0．05），并且胃癌组织CD27＋γδT细胞IL-10的分泌水平明显高于正常胃组织（P〈0．05）。结论胃癌患者癌组织内CD8＋T细胞比例明显下降，提示胃癌组织内CD8＋T相关的细胞毒T细胞存在免疫抑制。CD27＋γδT细胞亚群是胃癌组织中γδT细胞的主要功能活性亚群，并且通过分泌细胞因子IL-10参与胃癌肿瘤微环境中的炎症反应和免疫调节。

康复新液联合泮托拉唑治疗消化性溃疡疗效观察及安全性评价

目的观察康复新液联合泮托拉唑治疗消化性溃疡的疗效并评价其安全性。方法选取医院收治的消化性溃疡患者60例作为研究对象,随机分为独立组和联合组,每组30例。独立组采用泮托拉唑治疗,联合组在独立组治疗基础上加用康复新液治疗,观察2组用药后治疗总有效率及不良反应发生率。结果经治疗,联合组治疗总有效率为96.67%,高于独立组的80.00%(P<0.05);联合组不良反应发生率为10.00%,独立组不良反应发生率为6.67%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用康复新液联合泮托拉唑治疗消化性溃疡疗效显著,用药安全性高,具有较高的临床应用价值。

外周血内PCT、CRP、ESR、PLT水平对炎症性肠病的预判价值分析

目的分析外周血降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、血小板计数(PLT)对炎症性肠病(IBD)的预判价值,为IBD的临床诊断及病情了解提供参考依据。方法收集徐州医科大学附属市立医院消化内科住院并明确诊断为IBD的患者85例,其中溃疡性结肠炎患者40例,克罗恩病患者45例,同时选取25例门诊体检健康者作为健康对照组。根据克罗恩病活动指数和Mayo评分系统评估克罗恩病和溃疡性结肠炎疾病活动性。用相应方法检测IBD患者及健康对照组人群的外周血PCT、CRP、ESR、PLT的水平,比较各标志物在IBD患者不同时期及健康对照组之间的差异,采用Spearman相关分析法分析各标志物与IBD患者临床疾病活动性评分的相关性。结果与健康对照组比较,IBD患者外周血PCT、CRP、ESR、PLT水平均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与疾病缓解期比较,轻度活动期PCT、CRP、ESR、PLT水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);中重度活动期PCT、CRP、ESR、PLT水平又明显高于轻度活动期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。IBD患者疾病的严重程度与其外周血PCT、CRP、ESR、PLT水平呈正相关。结论外周血PCT、CRP、ESR、PLT水平可作为判断IBD患者临床疾病活动度的可靠、非侵入性生物标志物,在评价IBD患者病情中具有重要价值。

γδT细胞与其他免疫细胞的关系及其对肿瘤的作用

γδT细胞参与了固有免疫和适应性免疫，其可以识别微生物以及肿瘤表达的抗原，然后产生免疫监视功能，在免疫应答中具有重要的作用。目前有许多研究发现，γδT细胞与其他免疫细胞有着密切的关系。另外，γδT细胞在肿瘤微环境的建立以及肿瘤免疫的发展过程中被视为重要的免疫细胞，成为目前国内外研究过继性细胞免疫疗法治疗肿瘤的热点之一。