响应面法分析玉米半胱氨酸蛋白酶活性影响因素

玉米半胱氨酸蛋白酶(zea mays Cysteine Protease)是一类重要的蛋白水解酶,为了研究玉米半胱氨酸蛋白酶酶学性质,用重组毕赤酵母表达玉米半胱氨酸蛋白酶,以玉米半胱氨酸蛋白酶的相对酶活力为指标,采用响应面法分析p H、温度、Mg Cl2浓度对该酶活性的影响。结果表明,当p H 5.95,温度55.89℃,Mg Cl2浓度6.08 m M,预测的相对酶活力为166.78%,实测值为167.13%。模型合理,有参考价值。

玉米半胱氨酸蛋白酶突变体W308C的原核表达和酶学性质表征

通过对玉米半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease from Zea mays,zmCP1)同源模建和底物对接研究发现,W308位点在木瓜蛋白酶家族(C1家族)高度保守,且位于zmCP1催化三联体残基N306位点附近,与绝大多数底物形成π-π键,可参与底物和酶活性中心的结合,是该酶的关键位点;结合Rosetta design程序设计,对W308位点进行突变,获得W308C突变体,并在大肠杆菌BL21中表达。酶学性质表征实验结果表明:突变体W308C的最适温度为55℃,最适pH 6.0;在70、80、90℃下的半衰期为75.33、57.24、40.29 min,分别是野生型的1.21、1.19、1.01倍;突变体W308C和野生型的特异性常数Kcat/Km分别为11.02、5.92 L/(μmol·min),催化活性提高了0.86倍。

玉米半胱氨酸蛋白酶的原核表达及酶学性质表征

以玉米基因组DNA为模板扩增获得玉米半胱氨酸蛋白酶基因(zmCP1),先将其克隆至pET-28a(+)原核表达载体中,再转化至大肠杆菌BL21(DE3)中.对重组酶进行诱导表达后经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹(Western blotting)鉴定,经Ni柱纯化后其质量分数大于95%.利用二肽荧光底物(R-AMC)和四肽荧光底物(LAFR-AMC)进行酶反应动力学实验,证明该酶对小底物R-AMC具有更好的亲和力和催化活性.重组酶的酶学性质研究表明,该酶最适温度为55℃,最适pH值为6.0,在90℃下的半衰期为39.82min.

支气管黏液嵌塞的CT诊断

目的探讨支气管黏液嵌塞的CT表现及其诊断价值。方法回顾性分析经临床及支气管镜确诊的18例支气管黏液嵌塞的CT表现。结果 CT显示支气管黏液嵌塞呈指套状11例(61.1%)、短管状3例(16.7%)、葡萄状4例(22.2%)。MPR显示指套状11例,10例增强扫描黏液栓均无强化,7例病灶周边见肺动脉及其分支伴行。结论 "指套征"为支气管黏液嵌塞的较特征性CT表现,正确认识其特点,有利于提高诊断的准确率。

玉米半胱氨酸蛋白酶的真核表达及酶学性质表征

玉米半胱氨酸蛋白酶是一种重要的蛋白水解酶,作为C1家族蛋白酶的一员,可在食品、医药等领域广泛应用。本研究从玉米幼苗中提取总RNA,反转录扩增得到玉米半胱氨酸蛋白酶基因,进而构建重组真核表达载体p PICZα-zm CP1,转化毕赤酵母GS115构建重组菌。对表达的玉米半胱氨酸蛋白酶进行酶学性质研究,结果表明该酶最适反应温度为55℃,最适反应pH值为6.0,具有较好的热稳定性和有机溶剂抗性,但是pH值的稳定性、金属离子耐受性表现一般。底物特异性研究发现,该酶对小分子底物具有较强的水解能力,且偏爱P1位点为精氨酸的底物。

血管介入治疗医患双方乙型肝炎病毒感染防护方法比较

目的:比较血管介入性治疗期间医、患双方乙型肝炎病毒(HBV)感染的防护方法。方法:在测定HBV传染性和经手术感染阈值的基础上,从传染源、传播途径和易感性三方面比较血管介入性治疗期间医、患双方HBV感染的防护方法。结果:23.7%的手术患者HBsAg阳性,HBsAg阳性者中19.9%HBeAg阳性。HBsAg阳性和阴性、HBeAg阳性和阴性者的传染性范围分别在0～109、0～104、102～109和0～106ID/mL。手术患者的HBV感染阈值为105ID/mL,3.2%HBeAg阴性和80%阳性者为传染源,双层手套可使HBeAg阴性传染源和32%阳性传染源的传染性消失,剩余者仍具有传染性。手术医生HBV感染阈值为108.5ID/mL,HBeAg阴性者不能成为传染源,HBeAg3.2%阳性者为传染源,使用双层手套后传染性消失。结论:医生和患者经手术感染HBV的传染源和感染阈值不同,防护方法也不相同。

羊肚菌固态发酵玉米蛋白粉的研究

以玉米蛋白粉为主要原料,采用羊肚菌对其进行固态发酵培养,确定羊肚菌固态发酵玉米蛋白粉的培养基配方以及培养条件。结果表明:羊肚菌固态发酵玉米蛋白粉最适培养基配方为玉米蛋白粉30 g、葡萄糖2.5%、Mg SO4·7H2O 0.15%、KH2PO40.25%、含水量65%;最佳培养条件为接种量14%、培养温度25℃、初始p H 6、发酵时间20 d。此条件下,得蛋白转化率为22.36%,菌丝体生物量为0.136 9 g/g。对发酵前后玉米蛋白粉进行氨基酸分析,结果表明:发酵后亲水性氨基酸含量比发酵前提高12.75%。对玉米蛋白粉原料和发酵后玉米蛋白粉进行扫描电镜观察,发酵后的玉米蛋白紧密的结构被打开,表面积增加,表面凹凸加剧,孔洞更为明显。

MR血管成像与CT血管造影对颅内动脉瘤的临床诊断价值

目的:对比分析MR血管成像与CT血管造影对颅内动脉瘤的临床诊断价值。方法:选择在我院进行诊治的45例颅内动脉瘤患者作为研究对象,所有的研究对象均采取数字减影血管造影检查,并且行MR血管成像以及CT血管造影检查。结果:本研究中的45例颅内动脉瘤患者共检出肿瘤49个,数字减影血管造影检查、MR血管成像与CT血管造影的临床诊断符合率分别为100.00%、83.67%、85.71%;MR血管成像与CT血管造影的临床诊断符合率明显低于数字减影血管造影检查(P<0.05),但MR血管成像与CT血管造影的临床诊断符合率相比无明显差异(P>0.05)。结论:MR血管成像与CT血管造影对颅内动脉瘤均具有较好的临床诊断价值,可按照患者的实际情况合理选择此两种检查方法。

低电压下低浓度CT造影剂在胸痛三联征CT检查中的应用

目的探讨低电压下低浓度造影剂应用于胸痛三联征(TRO)体层摄影(CT)检查的临床价值。方法回顾性分析86例急性胸痛患者临床资料,行常规设置CT血管造影检查者纳入对照组(n=47),行低电压低浓度造影剂设置CT血管造影检查者纳入观察组(n=39)。以数字血管减影造影术(DSA)检查结果为'金标准',比较两组诊断准确性及影像质量差异。结果两组患者诊断准确性比较无统计学意义(P>0.05);两组影像主观评分及左冠状动脉前降支、升主动脉、主肺动脉干SNR水平比较均无统计学意义(P>0.05)。结论TRO的CT检查中采用低电压下低浓度CT造影剂并不对影像质量及诊断效能产生显著影响,有一定可行性。

不同温度和放置时间对糙米粉脂肪酸值的影响

根据GB/T20569-2006《稻谷储存品质判定规则》,研究25℃、4℃、0℃条件下,不同放置时间对稻谷糙米粉脂肪酸值的影响,为粮食检测机构对稻谷脂肪酸值的测定提供参考。实验结果表明:25℃条件下,糙米粉放置0、2h、4h、6h、8h、10h后,脂肪酸值相对于0h的增长率分别为0.22%、5.95%、29.39%、40.93%、46.01%,增幅较大;4℃条件下分别为3.34%、3.41%、13.86%、15.97%、18.65%,增幅较小;0℃条件下分别为:2.03%、5.22%、7.11%、8.42%、9.43%,数值变化在误差范围内。

玉米黄素生物活性及其在食品中应用研究进展

玉米黄素属于含氧类胡萝卜素,是天然色素类物质,在自然界中主要以全反式异构体存在,饮食中主要来源于黄玉米和蛋黄等。玉米黄素具有极强的抗氧化活性,可用于预防癌症、视网膜黄斑变性白内障、心脑血管疾病、炎性及氧化应激反应,因此受到人们的广泛关注。综述了玉米黄素来源、生物活性最新研究进展以及在食品领域应用现状,并对玉米黄素的开发前景进行了展望。

植物中C1半胱氨酸蛋白酶的研究进展

C1家族蛋白酶,又称木瓜蛋白酶类半胱氨酸蛋白酶,是一类重要的蛋白水解酶。从不同的植物来源中提取得到了多种该家族的蛋白酶,并对其酶学活性、催化机理、功能开展了大量研究,该酶被广泛应用于食品、医药、化工等行业。

腰背部浅筋膜炎的MRI诊断分析

目的:探讨腰背部浅筋膜炎的磁共振成像(MRI)表现及临床意义。方法:回顾性分析经临床及影像学确诊的60例腰背部浅筋膜炎的MRI表现。结果:腰背部浅筋膜炎的MRI表现为60例患者腰背部浅筋膜层中均可见到条状或条片状异常信号影,T1WI表现为低信号,T2WI呈高或稍高信号,短时反转恢复序列(STIR)呈明显高信号,边界较清楚。29例伴腰(骶)部其他病变,31例为单纯性病变。结论:腰背部浅筋膜炎是造成腰腿痛的重要原因之一,MRI是该病的有效检查方法,具有很高的临床应用价值。

分析淋巴瘤患者放化疗后应用PET-CT对效果与预后的影响价值

探讨淋巴瘤患者接受放化疗治疗期间,应用PET-CT的效果及对患者预后的影响。方法 100例样本选自2021年3月-2023年3月,接受的淋巴瘤患者。根据患者的住院号通过随机抽选的方式,分成两个组别,每组各50例。对照组在治疗后进行PET-CT显像检查;观察组在治疗前后均进行PET-CT显像检查。比较两组的临床效果。结果 对患者的PET-CT显像情况进行测定,观察组之前的SUVmax均值明显高于治疗之后的数值(P<0.05);且治疗后观察组的SUVmax均值更高(P<0.05)。就临床疗效来看,观察组的缓解人数共47名,其有效率在两组中为更高的一方(P<0.05)。结论 淋巴瘤患者在接受放化疗治疗期间,采用PET-CT进行检查对患者的化疗效果具有显著的促进作用,对残余病灶是否存在复发的情况能够进行有效的判断,为临床治疗提高可靠依据。