狗肝菜多糖通过抗氧化应激对大鼠腮腺放射性损伤的保护作用

目的 探讨狗肝菜多糖通对腮腺放射性损伤大鼠腮腺氧化应激的影响,阐明狗肝菜多糖对放射性损伤腮腺的可能作用机制。方法 将60只大鼠随机分为正常组、正常药物组、放射组、放射药物组,每组15只。采用头颈部18 Gy60Co γ线照射建立放射性腮腺损伤模型。药物组每天给予狗肝菜多糖(200 mg/kg)灌胃。苏木素-伊红(HE)染色观察腮腺病理学变化,免疫组化染色测定腮腺组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达,测定腮腺组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,Western印迹测定各组腮腺组织SOD1、SOD2蛋白水平。结果 与正常组和正常药物组比较,放射组体质量、腮腺质量明显降低,腮腺组织PCNA阳性细胞数明显降低,MDA含量明显升高,SOD活力明显降低,SOD1、SOD2蛋白水平明显降低(P<0.05)。与放射组比较,放射药物组体质量、腮腺重明显升高,腮腺组织PCNA阳性细胞数明显升高,MDA含量明显降低,SOD活力明显升高,SOD1、SOD2蛋白水平明显升高(均P<0.05)。正常组和正常药物组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。正常组和正常药物组腮腺腺泡细胞形态未见明显异常;放射组腮腺腺泡细胞明显皱缩,细胞核碎裂、固缩;放射药物组腮腺腺泡细胞皱缩较轻,细胞核碎裂不明显。结论 狗肝菜多糖可抑制腮腺氧化应激反应,减轻放射性腮腺损伤。

甲状腺疾病术中冰冻及石蜡病理诊断结果的对比与分析

目的通过对甲状腺疾病的冰冻切片进行回顾性分析,探讨甲状腺冰冻滞诊与误诊的原因及对策。方法选取2014年5月-2016年6月1285例甲状腺术中冰冻切片,并与对应的石蜡切片进行对比,总结分析甲状腺冰冻诊断特点及滞诊、误诊原因。结果 1285例甲状腺的术中冰冻确诊率为97.04%(1247/1285),滞诊率为1.63%(21/1285),误诊率为1.32%(17/1285),其中假阴性率为94.1%(16/17),假阳性率为5.9%(1/17)。冰冻与常规诊断不一致比例最高的为微小乳头状癌71.1%(27/38),其次为乳头状癌13.2%(5/38)。结论术中冰冻诊断对甲状腺肿瘤的定性具有重要意义,正确的诊断需要病理医师有良好的病理基础和丰富的经验,掌握冰冻制片中细胞及组织结构在形态上的不同特点,并且取材全面,以提高术中冰冻诊断的准确性和及时性。

异种烧结骨修复颌骨缺损的临床观察

本文报告了应用异种烧结骨修复颌骨缺损25例,采用手术前后X线及免疫学、r骨显像等观察,进行了较系统的临床研究.经6～12个月追踪观察,结果表明:创口愈合正常,未见免疫排斥反应.术后3周左右植骨成活,2～3个月有新骨形成、与空白对照组比较,烧结骨有明显加快骨缺损部位成骨作用,新生骨出现早,成骨速度快.证实烧结骨具有良好的组织相容性和骨传导能力,具有较高的临床实用性,是一种较理想的骨移植材料.

老年甲状腺癌术后低钙血症与病理因素的相关性

目的分析老年甲状腺癌患者术后出现低钙血症的因素。方法老年甲状腺癌手术患者170例,均于术前1～5 d和术后1～2 d进行血清钙检测,血清钙<2.25 mmol/L视为低钙血症。结果大年龄组患者术后出现低钙血症明显高于小年龄组(P<0.05);切除组织中有甲状旁腺的患者出现低钙血症的明显高于无甲状旁腺(P<0.05);手术过程中进行淋巴结清扫患者出现低钙血症明显增高(P<0.05);甲状腺全切术出现低钙血症明显高于甲状腺腺叶加峡部切除术(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示年龄越大、手术切除组织中有甲状旁腺、术中进行淋巴结清扫和手术范围越大的患者越容易出现术后低钙血症。结论老年甲状腺患者术后出现低钙血症与年龄、手术范围、手术切除组织中有甲状旁腺组织及淋巴结清扫密切相关。

细针穿刺细胞学检查对甲状腺疾病的临床诊断价值

目的探讨细针穿刺细胞学检查诊断甲状腺疾病的临床应用价值。方法 179例甲状腺疾病患者均接受细针穿刺细胞学检查,指定高年资、专科医生完成相关操作,记录其检查结果,将所得数据输入SPSS软件后给予相应分析并得出结论。结果 179例甲状腺疾病患者均顺利完成细针穿刺细胞学检查成功率100.00%,患者病变多为良性,其中以结节性甲状腺肿所占比例最高（30.73%）,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论利用细针穿刺细胞学检查可为临床医生提供可靠地甲状腺疾病诊断依据,有利于患者尽快确诊病情并获得及时救治,对保障其疗效、预后具有积极意义。

人端粒酶逆转录酶与p53蛋白在甲状腺癌组织中的表达、相关性及临床意义

目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERTmRNA)与突变型p53蛋白在甲状腺癌和甲状腺良性组织中的表达、相关性及临床意义。方法采用原位杂交法检测hTERTmRNA的表达,采用免疫组织化学法检测突变型p53蛋白的表达。结果①hTERTmRNA和突变型p53蛋白在甲状腺癌中高表达(P<0.05)。②hTERTmRNA与p53蛋白阳性率与甲状腺癌的临床病理分型,有无淋巴结转移,肿瘤TNM分期有关(P<0.05),与患者年龄,性别无关。③hTERTmRNA与p53蛋白在甲状腺癌组织中的表达呈显著正相关,具有统计学意义(P<0.05)。结论①hTERTmRNA和突变型p53蛋白的高表达在甲状腺癌的发生发展过程中起到重要作用。②p53蛋白调控hTERTmRNA的表达,p53蛋白在甲状腺癌中表达的增高可激活hTERTm-RNA,从而导致甲状腺癌的发生。③hTERTmRNA和p53蛋白在甲状腺癌中表达的变化可用于评估其生物学行为和判断预后,对临床上甲状腺癌的靶向治疗起到重要的指导作用。

Claudin-1蛋白在甲状腺癌中的表达及调控

目的:研究Claudin-1蛋白在甲状腺癌中的表达。方法:选取27例乳头状甲状腺癌及其淋巴结转移组织、17例滤泡性甲状腺癌以及19例滤泡性腺癌患者的肿瘤组织,使用免疫组织化学方法检测Claudin-1蛋白的表达,并检测Claudin-1蛋白调控通路中β-catenin的表达。结果:乳头状甲状腺癌组织及转移淋巴结中均有Claudin-1蛋白的高表达,滤泡性甲状腺癌以及滤泡性腺癌患者的肿瘤组织中Claudin-1蛋白的表达较低。相关分析表明β-catenin的表达与Claudin-1蛋白的表达呈显著相关性,甲状腺癌中Claudin-1蛋白的表达可能受wnt/β-catenin途径进行调控。结论:Claudin-1蛋白在甲状腺癌不同类型中有不同的表达,是甲状腺肿瘤的一个重要标志物,其产生受wnt/β-catenin途径进行调控。

p53与PTEN蛋白在头颈部鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨抑癌基因p53与PTEN蛋白在头颈部鳞癌中的表达及意义。方法采用SP法检测98例头颈部鳞癌组织中p53与PTEN蛋白表达,并分析其与头颈部鳞癌临床病理特征的关系。结果98例头颈部鳞癌标本中,p53阳性率71.4%,PTEN阳性率67.3%;随恶性程度增高及淋巴结转移的出现,p53与PTEN表达明显减小;p53与PTEN呈正相关。结论p53与PTEN关系密切,在头颈部鳞癌的发生发展中起重要作用。

斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗头颈部恶性肿瘤76例临床观察

目的研究斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗头颈部恶性肿瘤的临床疗效。方法将76例住院的头颈部恶性肿瘤患者随机分为斑蝥酸钠维生素B6治疗组和对照组,2组均采用一般支持治疗和对症治疗.治疗组加用斑蝥酸钠维生素B6注射液40 mL(0.4 mg)静脉滴注,1次/d,2周为1疗程,连续2个疗程,1个月后观察症状体征变化,再评估Karnofsky评分,作近期疗效评定。结果治疗组治疗前后症状体征变化差异有统计学意义,Karnofsky分差异有统计学意义,近期疗效与对照组相比差异有统计学意义。结论斑蝥酸钠维生素B6注射液可抑制肿瘤细胞生长,降低放化疗的毒副作用,提高机体免疫力,并具有升高白细胞及止痛作用,对提高患者生存质量,延长生命有积极意义。

siRNA靶向沉默TAK1基因对甲状腺癌细胞增殖、迁移和p38 MAPK信号通路的抑制作用

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默转化生长因子β激活激酶1(TAK1)基因对甲状腺癌细胞增殖、迁移和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响,阐明沉默TAK1基因对甲状腺癌的可能作用机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和Western blotting法检测甲状腺癌8505C、NPA、BCPAP和KMH-2细胞中TAK1 mRNA和蛋白表达水平。将KMH-2细胞随机分为空白对照组、阴性对照组和siRNA-TAK1组。对照组细胞不转染,阴性对照组细胞转染阴性对照siRNA,siRNA-TAK1组细胞转染TAK1 siRNA。采用qRT-PCR和Western blotting法检测各组细胞转染效率(即细胞中TAK1 mRNA和蛋白表达水平),MTT法检测细胞增殖活性,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭和迁移能力,Western blotting法检测各组细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、p38和磷酸化p38(p-p38)蛋白表达水平。结果:与正常甲状腺上皮Nthyori3-1细胞比较,甲状腺癌8505C、NPA、BCPAP及KMH-2细胞中TAK1 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,siRNA-TAK1组KMH-2细胞中TAK1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移细胞数均明显降低(P<0.05),细胞中PCNA、MMP-2、MMP-9和p-p38蛋白水平明显降低(P<0.05);与空白对照组比较,阴性对照组KMH-2细胞中上述各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:siRNA靶向沉默TAK1基因可通过抑制p38 MAPK信号通路的激活进而抑制甲状腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移过程。

沉默赖氨酸乙酰基转移酶基因对人甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨赖氨酸乙酰基转移酶(Kat5)对甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)信号通路的作用,阐明Kat5在甲状腺乳头状癌细胞增殖和凋亡中的可能作用机制。方法:RT-PCR和Western blotting法检测甲状腺乳头状癌BHP10-3、TPC-1、K1细胞和甲状腺上皮Nthy-ori3-1细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平。将对数生长期甲状腺乳头状癌TPC-1细胞分为空白对照组、阴性对照组和沉默Kat5组(si-Kat5组)。空白对照组甲状腺乳头状癌TPC-1细胞不转染,阴性对照组甲状腺乳头状癌TPC-1细胞转染阴性对照siRNA,si-Kat5组甲状腺乳头状癌TPC-1细胞转染Kat5 siRNA。RT-PCR和Western blotting法检测各组甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组TPC-1细胞增殖活性,克隆形成实验检测各组TPC-1细胞克隆形成率,流式细胞术检测各组TPC-1细胞凋亡率,Western blotting法检测各组TPC-1细胞中周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、P21、P53、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白水平。结果:甲状腺乳头状癌BHP10-3、TPC-1和K1细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平均高于甲状腺上皮Nthy-ori3-1细胞(P<0.05)。各组TPC-1细胞中Kat5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、细胞克隆形成率、细胞凋亡率以及细胞中CDK2、P21、P53、cleaved caspase-3、PI3K、p-PI3K、AKT及p-AKT蛋白表达水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);与空白对照组和阴性对照组比较,si-Kat5组TPC-1细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞克隆形成率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中CDK2、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平降低(P<0.05),P21、P53和cleaved caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:甲状腺乳头状癌细胞中Kat5 mRNA和蛋白表达水平升高,沉默Kat5基因可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与其抑制PI3K/AKT信号通路有关。

BTG3在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其对细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的:探讨B细胞转位基因3(BTG3)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:选择60例甲状腺乳头状癌患者的新鲜肿瘤标本及其对应的癌旁组织,采用免疫组化法测定组织中BTG3蛋白表达水平。将甲状腺乳头状癌TPC-1细胞分为BTG3过表达组、阴性对照组和空白对照组,分别于0、24、72 h加入10μl CCK-8试剂孵育2 h,测定TPC-1细胞增殖能力(OD值),采用微孔滤膜实验测定TPC-1细胞侵袭和迁移能力,采用蛋白质印迹法测定各组TPC-1细胞的波形蛋白、N-钙粘蛋白和E-钙粘蛋白水平。结果:甲状腺乳头状癌组织中BTG3蛋白阳性率低于癌旁组织(P<0.05)。TPC-1细胞0、24、72 h的OD值BTG3过表达组明显低于阴性对照组和空白对照组相应时间点的OD值(均P<0.001)。TPC-1细胞BTG3过表达组细胞侵袭迁移能力和E-钙粘蛋白水平高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);波形蛋白、N-钙粘蛋白水平低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05)。结论:BTG3在甲状腺乳头状癌组织中低表达;甲状腺乳头状癌细胞过表达BTG3后,其增殖、侵袭和迁移能力下降,波形蛋白、N-钙粘蛋白和E-钙粘蛋白水平发生变化。

临床颈淋巴结阴性甲状腺乳头状癌不同手术方式的疗效比较

目的：探讨临床颈淋巴结阴性（cN0）甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）患者不同手术方式疗效和安全性,为手术方案的选择提供理论基础。方法：选取唐山市工人医院头颈外科2009年12月至2014年12月225例cN0期PTC患者,根据手术方式的差异分为全切组110例,行甲状腺全切;腺叶切除组115例,行患侧腺叶及峡部切除。所有患者均予以患侧中央区淋巴结清扫。分析两组患者的手术及住院情况、病理特征、并发症情况及随访和复发情况。结果：1）两组患者的切口长度、术中出血量、手术时间及住院时间比较均无显著性差异（P〉0.05）。2）全切组多发癌灶例数多于腺叶切除组患者,有显著性差异（P〈0.05）,两组患者癌灶平均直径比较无显著性差异（P〉0.05）;两组患者中央淋巴结清扫枚数、淋巴结转移总枚数、中央淋巴结转移例数比较均无显著性差异（P〉0.05）;两组患者误切甲状旁腺、一过性低血钙、暂时性喉返神经麻痹、喉上神经损伤发生率比较无显著性差异（P〉0.05）,无永久性低血钙及永久性喉返神经损伤出现。3）全部患者获得随访,随访2~4.5年,全切组患者无复发病例。腺叶切除组8例患者在对侧腺叶出现癌灶的转移,加做对侧腺叶切除,4例患者患侧颈部侧区出现淋巴结转移,给予功能性淋巴结清除。两组患者的转移和复发率存在显著性差异（P〈0.05）。随访期间无死亡病例。结论：对于cN0期PTC患者,甲状腺全切联合清除患侧中央区淋巴结可以减少微小病灶的残留,与手术范围仅包括患侧腺叶及峡部的手术相比,其癌灶残留、转移、复发的概率降低,术后并发症无显著增加。

p53在人腮腺腺样囊性癌组织中的表达及意义

采用S-P免疫组化法对43例人类腮腺腺样囊性癌石蜡组织标本(观察组)及10例良性囊腺瘤标本(对照组)进行p53检测。结果观察组和对照组p53阳性表达率分别为72.1%(31/46)和100%(10/10),P<0.05;相关性分析显示,随恶性程度增加,观察组p53阳性表达率下降,强度减弱(P<0.01)。认为p53基因可抑制肿瘤生长,其缺失与表达水平的改变与人类腮腺腺样囊性癌的发生、发展有关。

颈部支气管源性囊肿1例

1 临床资料患者，女，24岁，主因颈前肿块发现2月余人院。患者2个月前触摸颈部时发现颈前可扪及一个肿块，如“板栗”大小，不痛，无任何不适。2个月来肿块稍有增大，至入院时己如“鸽蛋”大小，患者无声音嘶哑，无吞咽困难，不伴发热，局部无红肿热痛，无异常分泌物。查体：颈前软组织膨隆，表面皮肤颜色正常，无红肿，无破溃，无瘢痕，无颈静脉怒张及动脉异常搏动。于颈前正中舌骨下方，甲状软骨板表面可触及一肿块，约3cm×3cm×3cm大小，质中等，无压痛，表面光滑，边界清楚，与周围组织稍有粘连，可随吞咽上下活动，颈部及下颔下区末扪及肿大淋巴结。

MCM7、SKP2和P27蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床意义

(1)目的探讨微小染色体维持蛋白7(Minichromosome maintenance protein7,MCM7)、S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,SKP2)和细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白P27(cyclin dependent kinase inhibited protein,P27)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达及其临床病理特征之间的关系。(2)方法采用免疫组织化学S-P法检测MCM7、SKP2和P27蛋白在50例甲状腺乳头状癌、30例结节性甲状腺肿、30例甲状腺腺瘤及20例正常甲状腺组织中的表达。(3)结果甲状腺乳头状癌组织中MCM7、SKP2蛋白的阳性表达率均显著高于结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织。甲状腺乳头状癌中P27蛋白的阳性表达率显著低于结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织。MCM7与P27蛋白的表达、SKP2与P27蛋白的表达均呈负相关。(4)结论MCM7、SKP2及P27蛋白与甲状腺乳头状癌的发生和发展起着重要的作用,且MCM7、SKP2蛋白对于淋巴结有无转移方面可能有鉴别意义。在临床上将MCM7、SKP2及P27蛋白联合检测,对于提高术前诊断的准确性及判断淋巴结的转移情况可能有一定的作用。

HMGB1、CD68和D2-40与甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的相关性研究

(1)目的研究高迁移率族蛋白1(HMGB1)、CD68及D2-40在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达水平以及与PTC颈部淋巴结转移的相关性,为临床判断患者预后提供重要的实验证据。(2)方法采用免疫组化SP法检测PTC组织和甲状腺良性肿瘤组织中HMGB1、CD68及D2-40的表达水平。(3)结果 HMGB1、CD68和D2-40在PTC组织中的表达水平明显高于在甲状腺良性肿瘤组织中的表达水平;在伴颈部淋巴结转移的PTC组织中的表达水平明显高于在未伴颈部淋巴结转移的PTC组织中的表达水平。(4)结论 HMGB1、CD68及D2-40三者的表达水平在PTC中明显高于在甲状腺良性肿瘤中的表达水平;三者在PTC中的表达水平与年龄、性别均无明显关系,而与有无颈部淋巴结转移有关,因此三者的表达水平之间均呈显著正相关。三者的高表达促进PTC的淋巴结转移,在PTC的发生、发展以及淋巴结转移的过程中扮演了重要的角色。

过表达免疫负调控分子肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2对人甲状腺癌细胞FTC-133增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 检测肿瘤坏死因子诱导蛋白8样蛋白2（TIPE2）过表达对甲状腺癌细胞FTC-133增殖、凋亡以及侵袭能力的影响.方法 采用脂质体进行瞬时转染和G418筛选法构建TIPE2基因稳定转染甲状腺癌细胞FTC-133;细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测24、48、72 h的细胞增殖,绘制细胞生长曲线,并计算细胞增殖抑制率;膜联蛋白V（Annexin V）/碘化丙锭（PI）法检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞的侵袭能力.结果 筛选获得稳定高表达TIPE2的克隆细胞;Westernblot结果显示稳定转染TIPE2的FTC-133可明显上调TIPE2蛋白的表达水平,上调倍数达3.33倍;TIPE2过表达后细胞生长速度较对照组细胞明显减慢,24、48、72 h的细胞增殖抑制率分别为（21.60±5.66）％、（31.30±3.97）％、（40.80士7.37）％;TIPE2过表达后细胞凋亡明显增加,细胞总凋亡率为（13.06±1.89）％,而对照组细胞的总凋亡率为（5.73±0.43）％,两者差异有统计学意义（f=8.671,P ＜0.01）;Transwell实验结果显示表达TIPE2的甲状腺癌细胞穿膜细胞数为（51.3 ±16.7）个,而对照组的穿膜细胞数为（91.7±22.7）个,差异有统计学意义（t=7.916,P＜0.01）.结论 TIPE2能明显抑制甲状腺癌细胞的生长、促进其凋亡,同时抑制肿瘤细胞的侵袭能力.