遗传性耳聋基因治疗临床指南

遗传性耳聋是一种常见的遗传性疾病,新生儿的发病率为1‰~3‰。患者终身携带致病突变,导致不可逆性耳聋,至今尚无临床可用的治疗药物。在部分遗传性耳聋动物模型中,基因治疗已被证实为潜在有效的治疗方法。国内外已开展了多项遗传性耳聋基因治疗的临床试验。其中,由东南大学附属中大医院牵头,联合国内多家医院成功开展的遗传性耳聋基因治疗临床试验,取得了显著的疗效,并积累了丰富的经验。为规范遗传性耳聋基因治疗并提供临床研究指导,全国多家医院的耳科专家讨论制定了遗传性耳聋基因治疗临床指南,内容涵盖了伦理审查、遗传性耳聋的诊断和入组标准、临床前准备、药物、疗效与安全性评估标准、术后言语康复等。本指南将为耳聋基因治疗的临床诊疗提供规范的理论和技术指导。

线粒体DNA耗竭综合征7型的多学科诊疗一例

一例3岁4月龄女性患儿,共济失调伴极重度感音神经性听力下降2年,为改善听力就诊于我院。基因检测提示TWNK基因c.1186C>T(p.P396S)和c.1357C>T (p.R453W)复合杂合变异,经多学科团队共同讨论,考虑诊断为线粒体DNA耗竭综合征7型(肝脑型)可能性大,患者已有神经系统受累,暂无肝功能不全的证据,人工耳蜗植入术疗效不确定,全身麻醉将加快脑病进展、并可能导致多器官功能衰竭,考虑围术期安全性问题,家长暂不考虑听力干预,予辅酶Q10、叶酸、左卡尼汀、复合维生素口服对症支持治疗。

腰大池腹腔分流术与脑室腹腔分流术治疗特发性正常压力脑积水的临床疗效及安全性研究

目的比较腰大池腹腔分流(lumboperitoneal shunt,LPS)与脑室腹腔分流(ventriculoperitoneal shunt,VPS)治疗特发性正常压力脑积水(idiopathic normal pressure hydrocephalus,i NPH)的临床疗效和安全性。方法特发性正常压力脑积水并行分流手术病人96例,按术式分为行腰大池腹腔分流术组(LPS组)和脑室腹腔分流术组(VPS组),LPS组28例,VPS组68例。比较两组病人治疗前后临床症状、预后评分及并发症发生率。结果治疗后LPS组和VPS组步态不稳分别为60. 0%和63. 5%,认知障碍分别为54. 2%和57. 9%,尿失禁分别为44. 4%和47. 7%,两组比较差异均无统计学意义(P> 0. 05); LPS组和VPS组改良Rankin量表(modified Rankin Scale,mRS)评分分别为(-0. 9±0. 5)和(-1. 0±0. 9),两组比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。LPS组和VPS组并发症发生率分别为17. 9%和16. 2%,两组比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 LPS和VPS治疗i NPH的疗效和安全性相似,但LPS可以避免脑室穿刺造成的脑实质出血。

clock基因在脑胶质瘤组织中的表达变化

目的探讨生物钟基因clock在脑胶质瘤发生、发展中的作用。方法采用RT-PCR及免疫组化方法检测67例不同级别的脑胶质瘤(胶质瘤组)和周围正常组织(对照组)clock的转录活性及表达强度。结果两组clock基因均有表达,胶质瘤组Ⅲ～Ⅳ级者clock基因mRNA及蛋白表达均高于Ⅰ～Ⅱ级者及对照组(P均<0.05)。结论生物钟基因clock在高级别脑胶质瘤组织中呈高表达,clock表达强度与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关。

抑制人喉癌细胞生长的p53基因反转录病毒重组体的构建

野生型ｐ５３基因在细胞增殖与分化的调控过程中起着重要作用。已有研究表明，人喉癌中存在ｐ５３基因的结构异常或表达异常。本实验根据这一特点，设计出能整合在人喉癌细胞染色体上并适宜表达的野生型ｐ５３基因反转录病毒重组体Ｐｃ５３Ｎ２Ａ。通过体外实验证明，这一重组体能够以基因替代的方式，恢复ｐ５３基因的功能，抑制人喉癌细胞的生长。

反转录病毒介导的野生型p53基因诱发人喉癌细胞凋亡的实验研究

为探讨抗癌基因在肿瘤治疗中作用的可能性，以反转录病毒N2A为载体，将p53cDNA及顺式作用元件反向插入N2A两端LTR间的XhoⅠ位点，获得了野生型p53基因反转录病毒重组体。将该病毒重组体转染单向性包装细胞系ψ－2和双向性包装细胞系PA317）筛选后扩增有抗性的细胞克隆，用其产生的新鲜病毒颗粒感染p53基因表达异常的人喉癌细胞系（Hep2）。发现有前病毒整合的受体细胞，细胞染色质浓缩周边化，细胞肿胀，出现凋亡小体，基因组DNA电泳图谱呈阶梯状改变。结果表明反转录病毒介导的野生型p53基因能不同程度地诱导人喉癌细胞凋亡。

HSV介导的神经营养因子-3体外表达拮抗顺铂的耳毒性作用

目的 观察单纯疱疹病毒 (HSV)扩增子型表达载体介导的神经营养因子 3(NT 3)体外表达对顺伯耳毒性的拮抗作用。 方法 以HSV扩增子型表达载体为基础 ,构建由CMV作启动子 ,表达c myc标记的大鼠NT3或鼠的小肠碱性磷酸酶 (MIAP)的HSVnt3和HSVmaip扩增子型表达载体。通过无辅助病毒的包装体系包装后 ,感染体外培养的耳蜗器官 ,经不同浓度的顺铂处理 4 8h后 ,观察转导NT 3或报告基因 (MIAP)后的耳蜗螺旋神经节细胞存活和神经突起的再生。 结果 显示在病毒滴度 (MOI)为 0 2 5时 ,HSVnt3感染体外培养的耳蜗 4 8h后 ,能够刺激耳蜗分泌较高水平的NT 3(3μg L)。用不同浓度的顺铂处理 4 8h ,HSVnt3转导的耳蜗螺旋神经节细胞可以在一定范围内 ,耐受顺铂的耳毒性作用 ,与HSVmiap转导的耳蜗比较 ,神经元残留的数量明显高于对照组 (P <0 0 0 1) ,耳蜗螺旋神经节细胞神经突起的长度和密度也与对照组有明显的差别 (P <0 0 0 1)。 结论 提示无辅助病毒的HSV所介导的神经营养因子 3表达 ,能够在体外拮抗顺铂的耳毒性作用。

NT-3体外转导在小鼠耳蜗螺旋神经节细胞的表达

以新一代HSV Amplicon做载体 ,探讨在体外培养的小鼠耳蜗螺旋神经节细胞 (SGNC)中转导神经营养因子 3(NT 3)的表达和对听觉神经系统的神经元发育和存活的影响。实验构建了表达NT 3的HSV Amplicon重组体 ,经过无辅助病毒的包装细胞系包装后 ,感染体外培养的小鼠SGNC。结果显示HSV Amplicon转导的NT 3表达 ,能够刺激SGNC分泌较高水平的NT 3;SGNC的神经突起增长 ;耐受顺铂 (DDP)的毒性作用。其作用的机制可能是抑制Caspase 3前体的活化 ,减少了SGNC进入凋亡。

外源性野生型p53基因对人喉癌等肿瘤细胞生长抑制的实验研究

以反转录病毒Ｎ２Ａ为载体，使携带自身正调控序列的野生型ｐ５３基因反向插入Ｎ２Ａ两端ＬＴＲ间的ＸｈｏＩ位点，获得了野生型ｐ５３基因反转录病毒重组体，建立了产病毒的ＰＡ３１７细胞系。用该细胞系产生的新鲜病毒颗粒感染有ｐ５３基因异常的人喉癌细胞系（Ｈｅｐ２）和纤维肉瘤细胞系（ＭＤＡＨ０４１），Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ分析证实野生型ｐ５３基因反转录病毒前病毒能稳定整合在受体细胞染色体基因组上并有表达。感染病毒后的肿瘤细胞恶性表型发生了逆转，在裸鼠体内形成生长缓慢的移植瘤或不形成移植瘤。

鼓阶内电刺激对豚鼠耳蜗结构的影响

有关慢性电刺激的实验研究,已有报道.猫植入鼓阶电极,刺激数周后,Corti氏器和螺旋神经节细胞发生变性、坏死,邻近电极的基底转损伤较其它部位严重.植入人工耳蜗的猿和人,数年后发现接受电刺激的耳蜗,结构变化较大.基底膜断裂、骨性螺旋板损伤、耳蜗骨化和螺旋神经节细胞减少.为探讨耳蜗损伤的机制,

现代分子生物学技术在耳科研究领域中的应用──内耳发育中的转录因子实验研究（上）

现代分子生物学技术在耳科研究领域中的应用──内耳发育中的转录因子实验研究（上）陈晓巍，曹克利综述张连山王直中审校我国现有先天性聋哑儿童约３００万。目前已知的先天性聋哑类型达１２０种以上，也常同时伴有其它器官或系统的多发畸形或病变，构成多种综合征。因此...

前庭水管扩大综合征患者的人工耳蜗植入术

目的 评价前庭水管扩大综合征患者人工耳蜗植入术的安全性和可行性。方法 1995年 5月 1日～ 2 0 0 2年 6月 1日因双耳重 极重度感音神经性聋在北京协和医院接受人工耳蜗植入术的患者 312例中诊断为双耳前庭水管扩大者 10例 (3 2 % ) ,其中语前聋 7例 ,语后聋 3例。回顾性分析这 10例患者的临床资料。结果 10例患者人工耳蜗电极植入顺利 ,8例耳蜗底回开窗时发生轻度井喷 ,迅速用颞肌筋膜牢固封闭圆窗制止井喷。全部患者术后未出现脑脊液漏、颅内感染、面瘫、中耳炎等并发症。开机 6个月时 8例患者具有开放性言语识别力 ,已进入普通学校 (幼儿园、小学、大学 )就读。另 2例语前聋的幼儿视觉强化测听听阈达 4 0dBHL ,与其他无内耳畸形的全聋儿童术后效果差异无显著性。全聋前语言能力较好的 5例患者术后语言能力明显好于语前聋的患者 ,语言交流基本听不出聋人特有的语音特征。另 5例患者语言均有不同程度的进步。结论 尽管前庭水管扩大患者在人工耳蜗植入术中可能出现井喷 ,但术后未出现并发症且听力 言语康复效果好 ,因此重

多道人工耳蜗植入533例临床分析

目的 分析人工耳蜗植入患者的手术适应证、手术方法和术后效果。方法 533例(534耳)重度和极重度聋患者接受人工耳蜗植入手术。其中语前聋495例,语后聋38例。植入时年龄:1～3岁167例,～5岁77例,-7岁73例,-14岁136例,～17岁28例,>17岁52例。内耳中耳畸形共76例,其中Mondini畸形26例、共同腔畸形10例、前庭水管扩大综合征20例。术前纯音听阈(听力级)为105.5 dB,听性脑干反应阈>95 dB,40 Hz相关电位(500 Hz)>101.7 dB。使用装置:Nucleus 22M 27耳,24M 308耳,24R Contour 131耳,24RST 21耳;Med El C40+44耳;Clarion CI 3耳。常规手术采用面隐窝进路方法。共同腔畸形病例采用经水平半规管进路。部分病例行术后声场测听和听觉言语评估。结果 Mondini畸形26例中有20例术中出现脑脊液井喷。电极平均植入深度:耳蜗正常病例中Nucleus 30环,Med El为31 mm。Mondini畸形病例中Nucleus 28环。共同腔畸形病例中Necleus 26环。语后聋患者的平均开放言语识别率为71％,17岁以下语前聋的问卷调查满意度为94.7％。结论 人工耳蜗是使重度和极重度聋患者恢复听觉功能的有效方法,术前评估,手术和术后康复都是治疗效果的关键。

内蒙古查干凹陷火山岩油藏成藏模式

火山岩油藏是查干凹陷进行油气勘探的现实目标。建立火山岩油藏成藏模式,对预测火山岩油气藏的分布和目标选择具有重要的现实意义。查干凹陷火山岩油藏的主力烃源岩为下白垩统巴音戈壁组二段;储集空间是原生孔隙和原生裂缝,局部为由于后期溶蚀作用产生的溶蚀孔隙和构造作用形成的构造裂缝;苏红图二段的棕红色泥岩是主力盖层。根据查干凹陷火山岩油气成藏条件及其控制因素的研究,总结出查干凹陷火山岩油藏具有2种成藏模式,即岩性成藏模式和构造-岩性成藏模式,其中构造-岩性成藏模式是主要的成藏类型。

颞骨显微外科技术培训模式研究

目的分析总结颞骨显微外科技术培训课程,检验培训效果,探讨耳显微外科医生外科技术培养模式。方法采用问卷方式收集2013年6月到2014年6月期间北京协和医院耳显微外科技术研修班3期共35位学员信息,调查分析学员参加完学习班后于所在医院按照研修班技术开展手术的情况、遇到的障碍、对研修班教学特点的评价等。结果 35位学员中,副高级以上职称54.29%(19/35),主治医师及以下45.71%(16/35),其中博士、硕士、本科及大专学历分别为34.29%、17.14%、40.00%及8.57%,所在科室医生人数大于15人者为54.29%(16/35),小于等于15人者45.71%(19/35);参加学习班后开展手术的学员比例为65.71%(23/35),未开展手术学员比例34.29%(12/35);学员普遍认为课前讲解分步教学、结合实际手术讨论、操作导师实时指导、良好的器械设备是颞骨显微外科技术培训成功的重要因素。结论颞骨显微外科技术的培训应以临床应用为目的,课前讲解分步教学、结合实际手术讨论、操作导师实时指导、良好的器械设备是高效有益的颞骨显微外科技术培训成功的重要因素。

语前聋儿童人工耳蜗植入患者的电极极间辨差阈与声调识别的初步研究

目的 通过测试语前聋儿童植入电极极间辨别能力 ,观测汉语声调识别结果 ,以了解电极极间辨差阈与汉语普通话声调辨别结果的关系 ,使言语处理方案和电听觉图更加合理和个性化。方法 14例语前聋儿童 ,Nucleus 2 4M型 (2 2通道 )人工耳蜗植入者参加本次测试。声调识别材料共 2 5组 ,采用封闭项列测试法进行测试 ,每组包括声母韵母相同、声调不同的 4个汉字。选择 7个电极与相近电极进行音高比较辨别测试 ,正确辨别出差异的最相近电极对为电极极间辨差阈值。结果声调正确识别率为 (6 2 .8± 14 .7) % ( x±s,下同 ) ,识别率最低为 35 % ,最高为 99% ,全部高于机会水平。电极极间辨差阈为 3.4± 0 .9。E 14和E 17电极的阈值最小 ,其次是E 10和E 2 0 ,与其它电极差异有显著性。不同受试者的电极极间辨差阈值差异也存在显著性。结论 人工耳蜗使用者的声调识别能力与电极极间辨别能力 ,有负相关趋势 ,但未见统计学上显著性差异 ,同时存在个体差异 。

尼莫地平联合高压氧治疗弥漫性轴索损伤的临床研究

目的探讨尼莫地平联合高压氧治疗弥漫性轴索损伤的疗效。方法将176例弥漫性轴索损伤患者按随机数字表法随机分为4组:对照组(常规治疗),尼莫地平组(常规治疗+尼莫地平联合治疗),高压氧组(常规治疗+高压氧联合治疗),联合治疗组(常规治疗+尼莫地平+高压氧联合治疗),于伤后第1、4、8、15、22天采用经颅多普勒超声(TCD)测定所有患者双侧大脑中动脉及颈内动脉颅外段血流速度;分别于伤后当天,治疗后1、8、15、22d行GCS评分及治疗半年后行GOS评分,并互相比较。结果治疗22d后,联合治疗组患者GCS评分明显提高(P<0.01),预后良好率均明显高于其他三组(P<0.05),且联合治疗组脑血管痉挛明显改善。结论尼莫地平联合高压氧治疗有助于改善弥漫性轴索损伤患者的预后。

耳鼻喉科临床“三生”统一纳入住院医师规范化培训体系与固定临床导师制实施效果

住院医师规范化培训是我国现行的毕业后医学教育的重要组成部分,目的是培养具有良好职业道德、扎实医学理论知识和临床技能,能独立、规范地承担本专业常见多发疾病诊疗工作的临床医师。北京市在多年住院医师规范化培训试行的基础上,自2005年起全面开展住院医师临床规范化培训工作。

前列地尔治疗难治性突发性聋临床研究

目的研究前列地尔在难治性突发性聋患者中的临床疗效及作用机制。方法采用前瞻性研究,选择2004年5月～2007年11月在门诊就诊的病程31～90天、经常规治疗听力无改善的突发性聋患者46人(46耳),随机分为前列地尔治疗组和口服强的松对照治疗组,两组均联合使用维生素B1和甲钴胺。前列地尔治疗组21人,口服强的松组25人。除激素外,两组所有药物均以10天为一疗程。按照中华医学会耳鼻咽喉科学会(1997)标准作为诊断和疗效分级标准评定两组的治疗效果。结果经过一个疗程治疗后,前列地尔组听力改善显效1例,有效6例,无效14例,总有效率33.3%(7/21);口服强的松对照组显效1例,有效4例,无效20例,总有效率20.0%(5/25)。两组间总有效率差异无统计学意义(P>0.05)。随访至第2个月时有3例患者(前列地尔组1例,强的松组2例)出现延迟性听力改善>15dB,第5个月时前列地尔组有1例患者出现听力再次下降。结论前列地尔与口服激素治疗难治性突发性聋均有一定效果,提示前列地尔是常规治疗听力无改善突聋患者补充治疗的选择之一。

中耳胆脂瘤伴面神经受累临床特点分析

目的探讨中耳胆脂瘤伴面神经受累的临床特点和诊治措施。方法采用回顾性分析方法,对2004年1月至2013年12月由本文通讯作者主刀完成、随访时间大于6个月的因中耳胆脂瘤行开放式乳突根治手术患者的临床资料进行总结,并对术中发现的面神经受累情况进行分析。入选的90例(92耳,其中双侧2例)患者中,男性46例,女性44例;左侧44耳,右侧48耳;平均年龄38岁6个月±13年5个月,平均随访时间3年5个月±2年10个月。所有患者术前均行颞骨薄层CT(水平位+冠状位)检查,部分患者同时行面神经骨管重建。手术采用开放式乳突根治术式,术中探查并记录从膝状神经节至乳突垂直段下端面神经骨管完整性,同时对术前伴有面瘫的患者行面神经减压。术前术后均采用House-Brackmann(HB)评分系统对患者的面神经功能进行评价。结果 92耳病例中,27耳(29.3%)在术中探查时发现面神经骨管部分破坏或缺失,其中位于膝状神经节+水平段(G+H)2耳(7.4%),水平段(H)19耳(70.4%),水平段+垂直段(H+V)3耳(11.1%),垂直段(V)3耳(11.1%)。4例(4耳)术前伴发面瘫,行开放式乳突根治及面神经减压术后6个月内,面神经功能逐渐改善。术前面神经功能正常的86例(88耳)中,83例(85耳)术后面神经功能正常;3例(3耳)在术后4-7d出现逐渐加重的迟发性轻度面瘫,最严重时达2-3级,发现后立即取出松解术腔填塞的碘仿纱条、予口服激素及维生素B12等对症处理,3个月复查时面神经功能均完全恢复正常(HB 1级)。结论中耳胆脂瘤伴面神经受累以水平段面神经骨管最为常见,术前高分辨CT对于预判面神经骨管完整性具有一定的参考价值。术前伴发面瘫时应尽快手术并同时行面神经减压术,乳突根治术腔填塞不宜太紧以避免压迫裸露的面神经,术后如出现即发或迟发性面瘫应立即对症处理并根据病情发展决定是否行减压术。