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人胆囊类器官培养体系的建立与鉴定
被引量:
1
1
作者
陈智闻
陈费
+5 位作者
刘畅
刘清桂
王紫君
王敏君
李瑶
胡以平
《海军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期402-408,共7页
目的构建人胆囊类器官的培养体系,实现人胆囊类器官体外稳定快速扩增,并鉴定其特性。方法分离人来源胆囊组织上皮细胞,运用三维培养体系将细胞嵌入基质胶中进行3D培养。观察胆囊类器官生长过程中球囊样结构的面积、周长与形态,计算形状...
目的构建人胆囊类器官的培养体系,实现人胆囊类器官体外稳定快速扩增,并鉴定其特性。方法分离人来源胆囊组织上皮细胞,运用三维培养体系将细胞嵌入基质胶中进行3D培养。观察胆囊类器官生长过程中球囊样结构的面积、周长与形态,计算形状因子。利用细胞免疫荧光染色技术检测胆囊类器官的干性标志物CD133、富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(LGR5)以及胆管上皮细胞标志物肝细胞核因子1β(HNF1β)、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、细胞角蛋白7、细胞角蛋白19、性别决定区Y框9(SOX9)的表达情况。使用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)摄入实验检测小分子CHIR-99021和blebbistatin对类器官增殖特性的影响。结果胆囊类器官在体外培养过程中,类器官形成的球囊面积逐渐增大,第7天的类器官面积与第1天比较差异有统计学意义(P<0.01),第7天时其形状因子从第1天的0.80(0.75,0.84)增高至0.83(0.81,0.85)(P<0.01),表明类器官在体外稳定生长且形状逐渐趋于一个完美的圆。免疫荧光染色可见类器官表达胆管上皮细胞标志物。在培养基中加入小分子CHIR-99021和blebbistatin后,Brd U检测显示类器官的增殖能力增强(P<0.01)。结论在体外成功培养获得了具有增殖能力的人胆囊类器官,其具有胆管上皮细胞的特性,可用于胆管疾病的研究与建模。
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关键词
人胆囊上皮细胞
类器官
干细胞
细胞增殖
胆管上皮细胞
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题名
人胆囊类器官培养体系的建立与鉴定
被引量:
1
1
作者
陈智闻
陈费
刘畅
刘清桂
王紫君
王敏君
李瑶
胡以平
机构
复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室
海军军医大学(第二军医大学)基础医学院细胞生物学教研室
出处
《海军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期402-408,共7页
基金
上海市自然科学基金(21ZR1477400)
遗传工程国家重点实验室开放课题(SKLGE-1901)。
文摘
目的构建人胆囊类器官的培养体系,实现人胆囊类器官体外稳定快速扩增,并鉴定其特性。方法分离人来源胆囊组织上皮细胞,运用三维培养体系将细胞嵌入基质胶中进行3D培养。观察胆囊类器官生长过程中球囊样结构的面积、周长与形态,计算形状因子。利用细胞免疫荧光染色技术检测胆囊类器官的干性标志物CD133、富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(LGR5)以及胆管上皮细胞标志物肝细胞核因子1β(HNF1β)、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、细胞角蛋白7、细胞角蛋白19、性别决定区Y框9(SOX9)的表达情况。使用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)摄入实验检测小分子CHIR-99021和blebbistatin对类器官增殖特性的影响。结果胆囊类器官在体外培养过程中,类器官形成的球囊面积逐渐增大,第7天的类器官面积与第1天比较差异有统计学意义(P<0.01),第7天时其形状因子从第1天的0.80(0.75,0.84)增高至0.83(0.81,0.85)(P<0.01),表明类器官在体外稳定生长且形状逐渐趋于一个完美的圆。免疫荧光染色可见类器官表达胆管上皮细胞标志物。在培养基中加入小分子CHIR-99021和blebbistatin后,Brd U检测显示类器官的增殖能力增强(P<0.01)。结论在体外成功培养获得了具有增殖能力的人胆囊类器官,其具有胆管上皮细胞的特性,可用于胆管疾病的研究与建模。
关键词
人胆囊上皮细胞
类器官
干细胞
细胞增殖
胆管上皮细胞
Keywords
human gallbladder epithelial cells
organoids
stem cells
cell proliferation
bile duct epithelial cells
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
人胆囊类器官培养体系的建立与鉴定
陈智闻
陈费
刘畅
刘清桂
王紫君
王敏君
李瑶
胡以平
《海军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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