邻苯二甲酸二丁酯与邻苯二甲酸单丁酯对睾丸间质细胞睾酮水平和胰岛素样因子3表达的影响

目的观察邻苯二甲酸二丁酯（dibutyl phthalate，DBP）、邻苯二甲酸单丁酯（monobutyl phthalate，MBP）对小鼠睾丸间质瘤细胞（MA-10）中胰岛素样因子3（insulin．1ikefactor3，INSL3）mRNA及蛋白的表达量和细胞睾酮分泌水平的影响。方法以小鼠睾丸间质瘤细胞（MA-10）为模型，经过DBP、MBP直接染毒后，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞培养基上清中睾酮的含量，采用荧光定量PCR测定细胞中INSL3mRNA的表达，采用蛋白免疫印迹法（western blot）测定INSL3蛋白的表达水平。结果与对照组比较，MA-10细胞睾酮合成量在低染毒剂量（10^-9～10^-6mol／L）时均表现出刺激效应，睾酮含量增加；在高染毒剂量（10^-3mol／L）时表现抑制效应，随着染毒时间的延长，睾酮水平逐渐降低。荧光定量PCR以及Western blot测定结果显示，DBP在10^-6、10^4mol／L染毒时，INSL3mRNA及蛋白表达水平较对照组降低，差异有统计学意义（P〈0．05）；随着MBP染毒剂量的增加，INSL3mRNA及蛋白表达水平呈现下降趋势，但MBP在10^-7mol／L时，与对照组相比，对MA-10细胞中INSL3蛋白表达表现出刺激作用。结论DBP、MBP染毒对MA-10细胞睾酮分泌表现出高剂量抑制、低剂量刺激的双向效应；DBP、MBP染毒可抑制MA-10细胞中INSL3mRNA和蛋白的表达。