流式细胞术在母婴血型不合新生儿溶血病检测中的应用

目的建立流式细胞仪检测母婴血型不合新生儿溶血病(HDN)的方法。方法对临床送检的115例拟诊新生儿溶血病标本以流式细胞仪进行直接抗人-IgG试验、血清游离抗体检测及红细胞放散液抗体检测3项试验,选择FITC标记的单克隆二抗作为与红细胞特异性抗体结合的抗体。同时以试管抗球蛋白法进行3项试验作为对照,比较两方法的差异。结果建立了以流式细胞仪检测新生儿溶血病的实验方法:细胞采集比例为54.5%;阴性阈值2%;流式法对ABO HDN和Rh HDN的检测阳性率分别为86%和100%。试管法检测阳性率分别为50%和100%。结论流式法具有敏感性高,特异性强,结果易判定,客观、标准等优点,为新生儿溶血病检测提供了一种可靠的诊断依据。

ABO血型不合新生儿溶血病3种检测方法的比较

目的比较ABO血型不合新生儿溶血病(HDN)传统试管检测法、凝胶卡式检测法和流式细胞仪检测法的优缺点。方法对临床拟诊的110例HDN标本同时用试管法、凝胶卡式法和流式细胞仪对患儿红细胞直接抗球蛋白试验(DAT)、血清游离抗体检测及患儿红细胞放散液鉴定3项试验进行检测,并对检测结果进行比较。结果110例HDN标本用试管法检测出符合ABO-HDN血型血清学特征的阳性标本55例,阳性率50%;凝胶法检测阳性73例,阳性率66%;流式细胞仪检测阳性95例,阳性率86%。结论3项试验的3种方法检测灵敏度从高到低排列依次是流式细胞仪法、凝胶卡式法、试管法;流式法的测定数值客观、定量、准确,有利于结果的判断,凝胶法操作简单快速,结果稳定且易保存,2种方法相对于传统的试管法具有明显的优点。

人类粒细胞特异性抗原HNA-3系统PCR-SBT分型技术的建立及应用

目的建立PCR-SBT技术对人类粒细胞特异性抗原HNA-3进行基因分型。方法采用PCR-SBT方法对360名广州地区汉族健康献血者进行HNA-3测序基因分型。结果试验发现HNA-3(IVS7+76T/C)新的单核苷酸多态性(IVS+76T/C)。结论应用的PCR-SBT方法检测HNA-3基因敏感性高,重复性好;而且可具有准确、高通量、直接发现新的等位基因等特点。而且我们发现的单核苷酸多态性可以作为HNA-3基因分型的辅助依据。

人类粒细胞特异性抗原HNA-3系统PCR-SBT分型技术的建立及应用

目的建立PCR-SBT技术对人类粒细胞特异性抗原HNA-3进行基因分型。方法采用PCR-SBT方法对360名广州地区汉族健康献血者进行HNA-3基因分型,计算HNA-3的基因频率,进行Hardy-Weinberg定律的吻合度检验。发现1新的单核苷酸多态性(IVS7+76T/C)结果广州地区汉族人群,HNA-3a与HNA-3b基因频率分别为0.69.、0.307。结论应用PCR-SBT方法检测HNA-3基因可具有准确、高通量、直接发现新的等位基因等特点,具有广泛的应用前景。