白术治疗溃疡性结肠炎作用机制的网络药理学分析及实验验证研究

目的基于网络药理学探究并预测白术治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用靶点及分子机制,并加以动物实验验证。方法从TCMSP数据库、TCM-ID数据库以及结合相关参考文献筛选出白术的活性成分,在Swiss数据库获得对应靶点,从GeneCards数据库中获取UC疾病的相关靶点,分别构建“药物-成分-靶点-疾病”网络图“、通路-活性成分-靶点”网络图以及绘制PPI核心靶点网络图,并进行GO功能富集分析和KEGG通路注释分析,然后进行活性成分与核心靶点的分子对接。以葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠UC模型,通过采用苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining)、AB-PAS染色法及免疫组织化学法分别检测小鼠结肠组织中病理形态学变化、杯状细胞数目以及炎症因子的表达情况,进行网络药理学预测结果的实验验证。结果筛选出白术内酯I、II、III等30个活性成分,获取其活性成分对应靶点591个,其中关键靶点有IL-1β、TNF-α等,分子对接结果显示IL-1β、TNF-α与核心成分具有良好的结合能力。动物实验结果显示,白术醇提物组可明显增加UC小鼠的结肠长度、降低DAI评分,还可改善UC小鼠结肠组织病变情况,增加杯状细胞的个数,抑制结肠组织中IL-1β、TNF-α的高表达。结论该研究表明白术可通过多组分、多靶点、多通路调控炎症因子的释放而抑制炎症反应,发挥改善UC的药效作用。

酸枣仁炮制前后镇静催眠作用比较研究

目的基于网络药理学和动物实验探讨中药酸枣仁(Semen Ziziphi Spinosae,SZS)炮制前后镇静催眠作用差异。方法通过相关平台和数据库收集SZS的化学成分,检索失眠和睡眠障碍的靶点进行检索,构建蛋白质相互作用关系,绘制出中药-成分-靶点-通路网络,并进行富集分析。结合预测结果,通过戊巴比妥诱导睡眠试验、行为学分析、脑组织相关基因mRNA水平和血浆神经递质评价SZS不同制品对昆明小鼠的影响。结果SZS与失眠相关的靶点基因共有22个,包括乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,ACHE)、α-1B肾上腺素能受体(alpha-1B adrenergic receptor,ADRA1B)、钠依赖性5-羟色胺转运蛋白[solute carrier family 6(neurotransmitter transporter,serotonin),member 4,SLC6A4]等,它们可能通过9个相关途径和69个生物学过程发挥作用,其中包括钙信号通路、唾液分泌等。体内实验发现,SZS生用、炒用及生炒合用均能减少小鼠活动性,增强戊巴比妥钠催眠效果,降低皮质及海马中ACHE、ADRA1B和SLC6A4 mRNA水平,调节血浆中乙酰胆碱、肾上腺素等含量,且效果与药物剂量呈正比。结论SZS具有镇静催眠作用,以高剂量的生炒SZS合煎液效果更佳,这种作用可能是由影响神经递质及其相关受体水平,介导中枢神经系统导致的。

覆盆子药材HPLC指纹图谱的研究

目的:研究中药覆盆子的高效液相指纹图谱,为科学评价及有效控制覆盆子药材的质量提供了可行的定性方法。方法:利用反相HPLC法测定了浙江、四川、福建等多产地覆盆子药材指纹谱,并以浙江产地为例阐述色谱条件为:A ll-tech C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,采用梯度洗脱,以1.0 mL/m in的流速于21 l nm的检测波长处进行检测。结果:覆盆子药材色谱指纹图谱中共检出15个分离度良好的共有峰,通过考察了浙江产地10批药材的指纹谱,表明方法的精密度、稳定性、重复性均符合国家相关规定。结论:本方法可作为控制覆盆子药材质量的定性标准,为厂方选择该药材的种植基地提供一定的依据。

胡芦巴药材HPLC指纹图谱的初步研究

目的研究胡芦巴药材的高效液相指纹图谱,为科学评价及有效控制药材的质量提供了可靠的方法。方法利用高效液相色谱法,梯度洗脱,测定了14个不同产地的胡芦巴药材样品。色谱条件为:Alltech C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水,流速:1 mL.min-1,检测波长:211 nm。结果各产地胡芦巴药材指纹图谱有21个共有峰,峰面积之和大于总峰面积的90%,经相似度计算,各产地药材之间的相似性良好。结论方法灵敏度高,重现性好,可作为控制胡芦巴药材内在质量的标准。

哈巴俄苷及其代谢产物在大鼠体内的药代动力学

采用LC-MS技术对哈巴俄苷单体给药后在大鼠体内的药动学进行了研究,发现并鉴定其主要代谢产物可能为肉桂酸,在此基础上应用HPLC法测定了哈巴俄苷经口给药或静脉给药后的药代动力学特征。色谱分离采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水-醋酸溶液(60∶40∶0.1),检测波长为279 nm。结果表明,哈巴俄苷经口给药后吸收迅速,达峰后迅速消除,tm ax和t1/2分别为(0.47±0.21)h和(4.96±0.98)h,4 h后血药浓度降至约0.1μg/mL。其代谢产物肉桂酸在给药后迅速出现并缓慢消除,tm ax和t1/2分别为(4.17±1.39)h和(5.78±2.67)h。哈巴俄苷静脉给药后消除迅速,t1/2为(1.89±0.32)h,而肉桂酸的消除速度仍与口服相近,t1/2为(5.16±2.27)h。实验结果显示哈巴俄苷口服吸收迅速,生物利用度低,在大鼠体内可能主要代谢为肉桂酸,后者在给药后迅速出现并缓慢消除。

蕨菜多糖超声波辅助提取及其药理活性初步研究

为优化蕨菜多糖的提取工艺,同时检测蕨菜多糖的药理学活性。实验采用超声波辅助提取法,在单因素试验的基础上,考察液料比、浸提次数、超声浸提时间、超声功率四因素对蕨菜多糖提取得率的影响。运用Design Expect 10.0软件分析,通过响应面分析法(RSM)优化提取条件,对蕨菜多糖促进小鼠脾细胞增殖能力和抑制结肠癌细胞(HTC-8)增殖能力进行分析。结果表明:蕨菜多糖的优化提取工艺为:液料比:36.2∶1;浸提次数:4次;超声浸提时间:43.1 min;超声波功率:240 W,在此条件下,蕨菜多糖提取效果最好,提取得率达8.60%。各因素对多糖提取得率的影响程度:浸提次数>液料比>超声浸提时间>超声功率。通过药理活性研究表明,本实验获得的蕨菜多糖具有脾细胞免疫增值和抑制结肠癌细胞增殖活性。

顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法分析丁香与肉桂子的香气成分

目的采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术(headspacesolid-phasemicroextraction-gas chromatography-massspectrometry,HS-SPME-GC-MS)对天然调味品丁香和肉桂子挥发性成分进行研究,揭示丁香与肉桂子主要香气成分并比较二者差异。方法样品经85℃加热30 min,顶空富集10 min,在250℃解析5min,再利用GC-MS进行测定,对丁香与肉桂子产生独特香气的化学成分进行分析,并用面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果 2种药材共检测到120个峰,共鉴定出56种主要成分。从丁香中检测到60个峰,鉴定出20种成分,占总挥发性成分的98.71%,其主要成分为β-石竹烯、丁香酚、α-律草烯、乙酸丁香酚酯等;从肉桂子中检测到60个峰,鉴定出45种成分,占总挥发性成分的97.31%,其主要成分为肉桂醛、(+)-d-杜松烯、δ-衣兰油烯、(-)-α-蒎烯、(-)香树烯等。结论虽然丁香和肉桂子的性状、气味相似,但所含挥发性成分有所差异,具有9种共同香气成分,其中β-石竹烯为主要香气成分。丁香中的α-律草烯和(-)-氧化石竹烯的含量更丰富,另外6种成分均低于肉桂子。研究结果为分析与鉴别丁香和肉桂子的挥发性香气成分提供科学依据。

山茱萸多糖延缓秀丽隐杆线虫衰老的药效评价及机制研究

目的考察山茱萸多糖(Corni Fructus polysaccharides,CFP)对秀丽隐杆线虫衰老的延缓作用并探讨其作用机制。方法以野生型秀丽隐杆线虫(N2线虫)作为动物模型,利用百草枯建立氧化应激模型,筛选CFP的最佳药效浓度;测定CFP对N2线虫的急性热应激、寿命、生殖及咽泵运动能力的影响;检测并比较给药组与空白组活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)及脂褐素水平;运用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测CFP对N2线虫衰老相关基因m RNA表达的影响。结果通过抗氧化应激实验测得CFP最佳给药浓度为150μg/m L;急性热应激实验中,CFP给药组较空白组的生存曲线右移;不同浓度CFP给药组较空白组的存活率更高(P<0.01),平均寿命(P<0.001)和最长寿命均延长;给药组子代数量在第1、3、5、7 d无显著性差异(P>0.05);50、150μg/m L的CFP组均可增强N2线虫咽泵运动能力(P<0.05);不同浓度CFP给药均能显著降低N2线虫体内ROS含量和减少脂褐素沉积;与空白组相比,150μg/m L CFP给药5 d后,DAF-16、SKN-1、SOD-3及CTL-2的m RNA转录水平均显著上调,AGE-1的m RNA转录水平显著下调。结论CFP能在一定程度上延缓秀丽线虫的衰老,其作用机制与提高线虫体内抗氧化应激能力、抑制ROS产生、减少脂褐素的沉积,以及调控胰岛素/胰岛素样生长因子(insulin like growth factor,IGF)-1信号(insulin/IGF-1 signaling,IIS)通路上的基因表达有关。

蕲竹的本草源流考证

蕲竹被誉为"蕲春四宝"之一,但其品种基原一直未能明确。该文通过对历代典籍著作、本草学家及植物学家对蕲竹的形态描述、地方志等的文献溯源,整理了蕲竹的研究现状、名称考证、蕲竹基原品种文献调研等方面的文献记载情况。认为蕲竹基原其实是清晰的,只是在文献流传中造成的疑误导致近现代蕲竹基原的混乱。初步确定水竹Phyllostachy sheteroclada Oliver、单竹Bambusa cerosissima McClure和慈竹Neosinocalamus affinis(Rendle)Keng是蕲竹的基原品种。该发现可为蕲竹的资源利用和开发提供科学依据。

基于网络药理学和实验验证的桂枝甘草汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究

基于网络药理学探讨桂枝甘草汤(Guizhi Gancao Decoction,GGD)对心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MI/RI)大鼠的保护作用及可能的药理机制。首先通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、SwissTargetPrediction数据库和文献检索获取GGD抗MI/RI的化学成分及作用靶点,采用STRING数据库和Cytoscape 3.7.2软件对交集靶点进行蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析,对核心靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,并构建“药物-核心成分-靶点-通路”网络,采用AutoDock Vina软件对主要活性成分与关键靶点进行分子对接验证。然后构建MI/RI大鼠模型,观察大鼠心肌梗死面积变化,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)检测心肌细胞病理和超微结构改变,蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测心肌组织相关蛋白表达。从GGD中筛选得到75个活性成分,对应318个治疗MI/RI靶点。PPI筛选得到肿瘤蛋白p53基因(tumor protein p53,TP53)、丝氨酸/苏氨酸激酶3(serine/threonine kinase 1,AKT1)、信号传导及转录激活蛋白(signal transducer and activator of transcription,STAT3)、非受体酪氨酸激酶(non-receptor tyrosine kinase,SRC)、丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1)、丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等46个核心靶点。GO和KEGG富集分析得知,核心靶点主要影响细胞增殖和迁移、信号转导、细胞凋亡、转录过程,涉及癌症、糖尿病并发症中的高级糖基化终末产物-受体(advanced glycation end products-receptor,AGERAGE)、MAPK等信号通路。分子对接结果显示,GGD核心成分肉桂醛、儿茶素和甘草查尔酮A与MAPK1、MAPK3等核心靶点均具有较好的结合活性。动物实验结果显示,GGD能够显著减少心肌梗死面积,提高MI/RI大鼠超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平,同时降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)水平;HE染色和TEM结果显示,模型组大鼠经GGD预处理后心肌细胞结构恢复正常,病理状态和线粒体超微结构损伤有所改善,且两药合用效果优于单用。WB结果显示GGD可显著下调心肌组织c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、酪氨酸磷酸蛋白激酶(tyrosine phosphoprotein kinase,p38)和上调细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)蛋白的磷酸化水平。结果表明,GGD可能通过桂枝、甘草的协同作用调控MAPK信号通路,发挥抗MI/RI作用。

当归芍药散入血成分的分析及药代动力学研究(英文)

目的:研究大鼠口服给药当归芍药散后体内的入血成分及其药代动力学。方法:大鼠灌胃给予当归芍药散提取物后,以HPLC-DAD-MSn分析含药血清中药物成分,并建立主要入血成分的HPLC测定方法以应用于药代动力学研究。结果:大鼠灌胃给予当归芍药散提取物后血清中检测到7个原型成分和1个代谢产物,并对大鼠血浆中芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸和藁本内酯进行了测定。方法学考察了线性范围(0.025-5.60μg·ml-1)、定量限(0.022-0.18μg·ml-1)、日内和日间精密度(<10.1%)、准确度(92.5%-111.5%)和回收率(>80%)。结论:芍药苷硫酸酯、芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、川芎内酯I、藁本内酯和丁烯基苯酞为当归芍药散主要的入血成分。对大鼠血浆中芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸和藁本内酯建立的测定方法简便、准确、灵敏度高,适用于血药浓度测定及其药动学研究。

当归芍药散配伍对主要成分体内吸收影响的研究

目的:探讨当归芍药散配伍对主要入血成分药动学的影响规律。方法:将当归芍药散分为白芍组(S)、归-芎组(DC)、芍-归-芎组(SDC)和全方组(DSS)。大鼠分别灌胃各组提取物,采用HPLC测定血浆中芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸和藁本内酯的含量,计算并比较各组药动学参数。结果:归-芎组与白芍配伍后使芍药苷和芍药内酯苷出现了多重吸收的过程,全方组中多重吸收现象消失,Tmax和MRT缩短,AUC降低。白芍与归-芎组配伍降低了阿魏酸的Cmax,Tmax,MRT和AUC,全方组较芍-归-芎组除AUC提高外无明显区别。白芍降低了归-芎组藁本内酯Cmax和AUC,与芍-归-芎组相比,全方组的MRT缩短,AUC增加。结论:方中臣药归-芎对君药白芍成分的影响体现在多重吸收的现象,君药对臣药成分的影响为显著降低血药浓度水平和生物利用度。佐使药对芍-归-芎组中君药成分影响较大,使其消除速度加快,生物利用度降低。

甲基莲心碱的药理作用研究进展

甲基莲心碱是从睡莲科植物莲Nelumbo nucifera的种子幼叶和胚根(莲子心)中分离得到的一种具有双苄基异喹啉特殊结构的生物碱,大量研究表明其具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗心律失常、抗血栓、降压和减肥消脂等多种生物活性,在肿瘤、心血管和神经退行性疾病领域有广阔的应用前景。通过对甲基莲心碱在不同细胞和动物模型中的药理作用及作用机制进行综述,为进一步阐明甲基莲心碱的药用价值和合理开发应用提供科学依据。

艾根多糖的结构特征及免疫活性研究

目的:艾根为种植艾叶(Artemisiae Argyi Folium)药材的副产品,富含黄酮和多糖,在民间常用作滋补食材,但其药用和保健价值未受重视。方法:该研究利用水提醇沉法提取分离得到艾根多糖(AARP),采用高效凝胶渗透色谱、PMP-HPLC和红外光谱初步解析其结构。CCK-8法检测AARP对脾淋巴细胞增殖的影响;中性红吞噬实验测定RAW264.7细胞吞噬能力,ELISA测定一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6及IL-1β的水平;采用环磷酰胺免疫抑制小鼠模型评价其体内免疫活性;最后通过DPPH自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O_(2)·^(-))自由基清除能力及ABTS、FRAP总抗氧化能力实验评价其抗氧化活性。结果:结果表明AARP主成分分子量为5.9 kDa,由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸(摩尔比62.91∶17.17∶8.55∶5.75∶1.96∶1.72∶1.94)和微量的木糖组成。该多糖在10~1000μg·mL^(-1)浓度范围内能显著促进脾淋巴细胞的增殖,提高巨噬细胞的吞噬能力及NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的释放;并可明显逆转环磷酰胺所致小鼠体重减轻,恢复器官指数和碳廓清能力;且对·OH、O_(2)·^(-)、DPPH和ABTS自由基有不同程度的清除能力。结论:该研究揭示了艾根多糖的基本结构并证实其具有优异的免疫调节及抗氧化活性,可为艾蒿植物资源利用和功能性产品的开发提供理论参考。

桉油精的药理作用研究进展

桉油精是许多芳香植物精油的主要有效成分,在医药、化妆品和香料工业领域广泛应用。大量研究证明桉油精具有抑菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、镇痛、神经保护等多种药理作用,具有较高的药用价值和开发前景。本文通过查阅国内外近10年的文献,对桉油精药理作用研究新进展进行梳理和总结,为桉油精的进一步开发和临床应用提供参考。

天麻茎秆4种干燥方法的比较研究

目的通过化学成分含量测定,优选天麻茎秆的最佳干燥方法。方法采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(UHPLC-QQQ-MS)技术对室温自然晾干、真空冷冻干燥、65℃减压干燥与100℃热风干燥后的天麻茎秆中的10种活性成分(琥珀酸,巴利森苷A、B、C、E,天麻素,对羟基苯甲醇,对羟基苯甲醛,对羟基苯甲酸原儿茶醛)进行含量测定,比较成分总量,以优化最佳干燥方法。结果冷冻干燥的天麻茎秆中10种成分总量最高,为3026.89 μg/g,100℃热风干燥的为2 711.79 μg/g,减压干燥的为2 524.94 μg/g,室温干燥的最低,为2153.25 μg/g。结论所建立的含量测定方法灵敏、准确可靠,可用于天麻茎秆的质量控制;冷冻干燥后天麻茎秆中10种成分保留最多,为最佳干燥方法。

UPLC-DAD-MS定性和定量分析蕲艾中的酚酸和黄酮类成分

采用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS鉴定蕲艾中的酚酸和黄酮类成分,UPLC-DAD测定药材中主要成分的含量。采用Xtimate UHPLC C18色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm),以乙腈-0. 1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0. 4 m L·min-1,检测波长330nm,质谱扫描为正离子模式。通过质谱数据解析、对照品和文献对照,共鉴定、推导出蕲艾中6个酚酸和10个黄酮类成分,并建立了新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、茵陈色原酮、高车前素、棕矢车菊素、5,7,3'-三羟基-6,4',5'-三甲氧基黄酮、异泽兰黄素和蔓荆子黄素12个成分的含量测定方法,各成分质量浓度与峰面积具有较好的线性关系;精密度、重复性和稳定性良好(RSD<3. 0%);加样回收率为103. 3～109. 2%。该方法新颖、快速、准确,可作为蕲艾全面可靠的质量控制方法,应用于不同产地艾叶中相关成分的测定,发现蕲艾中的成分含量具有独特性。

异泽兰黄素的药理作用研究进展

异泽兰黄素是从菊科蒿属植物中分离得到的一种黄酮苷元,大量研究表明异泽兰黄素具有多种显著的药理活性,包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗过敏等,文章总结了近年来国内外关于异泽兰黄素的药理作用及其机制研究进展,以期对它的深入研究和开发提供参考。

艾叶多糖提取、分离纯化及生物活性研究进展

艾叶为中医常用药材,含有挥发油、酚酸、黄酮和多糖等多种活性成分,其中多糖具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤、降血糖、保肝、调节肠道微生态系统等药用和保健功能,已成为近年的研究热点。本文通过对近十年艾叶多糖的提取、分离纯化以及药理活性等相关研究进行系统性整理、归纳与总结,为艾叶多糖的进一步研究与开发提供数据支持与理论参考。

经典名方参附方活性成分的药理作用及临床应用研究进展

参附方中的人参来源于五加科草本植物人参的根茎,盛产于东北,被誉为“百草之王”,性温,味甘、微苦,入脾、肺二经[1]。附子为毛茛科植物乌头的子根的加工品,味辛、甘,性大热,归心、肾、脾经[2]。人参附子二者联用,具有益气、温阳、固脱之功,主治厥脱及阳虚诸证[3]。参附方的主要活性成分为人参皂苷Rg1等皂苷类成分和乌头碱等生物碱类成分,研究表明这类成分均具有较好的药理活性[4]。参附方在临床上使用的制剂主要为参附汤和参附注射液,而参附注射液是依据“参附汤”通过剂型改良而成。