目的:研究苦参素(Oxymatrine,OMT)对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞的保护作用。方法:于无菌环境下分离SD大鼠乳鼠心肌细胞并培养72 h后随机分为:空白对照组、缺氧/复氧(H/R)模型对照组、OMT(20、40、80μg/m L)干预组和舒血宁注射液(SXN,10...目的:研究苦参素(Oxymatrine,OMT)对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞的保护作用。方法:于无菌环境下分离SD大鼠乳鼠心肌细胞并培养72 h后随机分为:空白对照组、缺氧/复氧(H/R)模型对照组、OMT(20、40、80μg/m L)干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/m L)干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。药物干预6 h后,通过倒置光学纤维镜观察细胞形态;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;检测细胞培养液中谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)释放量;测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫法(ELISA)测定培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量水平;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果:与模型对照组比较,OMT 40、80μg/m L干预组乳鼠心肌细胞形态和生存状态均明显好转,存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH释放量显著降低,细胞中SOD活性显著升高且MDA含量显著降低,细胞凋亡状况显著改善、凋亡率显著降低,细胞中bcl-2 m RNA表达显著上调且Bax m RNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,培养液中TNF-α、IL-6含量水平显著降低,上述差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);其中OMT 80μg/m L干预组细胞中GSH-Px活性显著升高(P<0.05),培养液中IL-1含量显著降低(P<0.05)。结论:苦参素能够有效改善缺氧/复氧损伤心肌细胞形态、提高细胞存活率、改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤、降低细胞凋亡率、并抑制炎症反应,提示苦参素对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞具有保护作用。展开更多
文摘目的:研究苦参素(Oxymatrine,OMT)对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞的保护作用。方法:于无菌环境下分离SD大鼠乳鼠心肌细胞并培养72 h后随机分为:空白对照组、缺氧/复氧(H/R)模型对照组、OMT(20、40、80μg/m L)干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/m L)干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。药物干预6 h后,通过倒置光学纤维镜观察细胞形态;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;检测细胞培养液中谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)释放量;测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫法(ELISA)测定培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量水平;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果:与模型对照组比较,OMT 40、80μg/m L干预组乳鼠心肌细胞形态和生存状态均明显好转,存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH释放量显著降低,细胞中SOD活性显著升高且MDA含量显著降低,细胞凋亡状况显著改善、凋亡率显著降低,细胞中bcl-2 m RNA表达显著上调且Bax m RNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,培养液中TNF-α、IL-6含量水平显著降低,上述差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);其中OMT 80μg/m L干预组细胞中GSH-Px活性显著升高(P<0.05),培养液中IL-1含量显著降低(P<0.05)。结论:苦参素能够有效改善缺氧/复氧损伤心肌细胞形态、提高细胞存活率、改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤、降低细胞凋亡率、并抑制炎症反应,提示苦参素对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞具有保护作用。