抑肽酶的提取及活性研究

以牛肺为原料,经酸沉淀,胰蛋白酶亲和层析,分离提纯抑肽酶。并建立了二种抑肽酶活性测定方法(UKIU法及PKAIU法)。提纯后抑肽酶纯度提高88.3倍。得率为96.8％。活性抑制试验表明,该抑肽酶可抑制PKA对前激肽释放酶(PK)的作用,以及尿激酶对纤溶酶原的作用,对纤溶酶原的活化及纤溶酶活性也有较强抑制作用。

纤维蛋白凝胶的研制

以血浆蛋白冷沉淀为原料制备粘合蛋白，富含纤维蛋白原、调理素蛋白、凝血因子XⅢ，其可凝固蛋白大于75mg／ml，蛋白含量大于100mg／ml；主要以CohnⅢ为原料．采用组织凝血活酶和Ca激活制备高效价凝血酶，成品放价达400～500u／ml；以牛肺为原料，经特异沉淀和亲和层析制备抑肽酶，成品效价达10000UKIV／ml以上．以粘合蛋白、凝血酶、抑肽酶组成的纤维蛋白凝胶，其质量基本达到国际同类产品先进水平。动物试验和初步临床观察表明．凝胶具有止血、粘合等功能，尤其是在常规方法难以处理的部位更加有效。

转铁蛋白－MTX偶联物的制备及体外试验

以人血浆组份Ⅳ为原料，经过多步纯化及铁饱和，得到纯度为９９％的铁饱和转铁蛋白（Ｈｏｌｏ－ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ，Ｈｏｌｏ－ＴＦ）；以转铁蛋白（Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ，ＴＦ）为载体，采用两种不同的偶联方法制备ＴＦ－氨甲蝶呤（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｕｍ，ＭＴＸ）偶联物：（１）碳二亚胺（ＣＤＣ）法；（２）活化酯（ａｃｔｉｖｅｅｓｔｅｒ）法。偶联制备得到的偶联物兼具有转铁蛋白和药物的特性。体外杀伤试验表明，ＴＦ－ＭＴＸ对Ｋ（５６２）白血病细胞较游离ＭＴＸ分别强８．０倍（ＣＤＣ）和９．０倍（ａｃｔｉｖｅｅｓｔｅｒ）；对ＢＥＬ－７７２１肝癌细胞较游离ＭＴＸ强１４．７倍（ａｃｔｉｖｅｅｓｔｅｒ）。这说明按本文方法制备的偶联药物对于肝癌细胞，白血病细胞有一定的导向杀伤作用。