家兔苦马豆素多克隆抗体的制备及其对小花棘豆中毒的治疗效果

采用合成的苦马豆素(swainsonine,SW)人工抗原免疫接种家兔,获得高效价的SW抗血清,分离纯化得到的家兔SW多克隆抗体,复制家兔小花棘豆中毒模型,用SW多克隆抗体治疗小花棘豆中毒家兔,通过检测血清生化指标和免疫学指标,评价SW多克隆抗体治疗家兔小花棘豆中毒的效果。将18只家兔随机分为对照组(6只)、攻毒组(6只)和攻毒治疗组(6只),攻毒组和攻毒治疗组按照10g/(kg·d)的剂量饲喂小花棘豆,攻毒组试验兔出现死亡时(第70天)停止攻毒。攻毒第21天,攻毒治疗组试验兔注射SW多克隆抗体,每只兔每天1mL,连续注射4d。以攻毒试验开始为第0天进行首次采血,试验开始后每7d采血1次,进行血清免疫和生化指标测定。结果显示,攻毒第7天时攻毒家兔血清AKP活性和SW质量浓度显著高于对照家兔(P<0.05);第14天时攻毒家兔血清AST和LDH活性显著高于对照家兔(P<0.05),血清AMA活性和E-玫瑰花环率均显著低于对照家兔(P<0.05);第21天时攻毒家兔血清BUN、CRE和GLU浓度显著高于对照组家兔(P<0.05)。攻毒治疗组家兔注射SW抗血清后血清AKP、LDH、AST、ALT活性,BUN、CRE、GLU浓度和SW质量浓度较攻毒家兔显著下降,AMA活性和E-玫瑰花环率显著上升。说明,SW多克隆抗体可有效治疗家兔小花棘豆中毒。

华支睾吸虫后囊蚴cDNA表达文库的构建及鉴定

构建华支睾吸虫后囊蚴cDNA表达文库,为筛选特异诊断抗原和疫苗候选抗原奠定基础,也为进一步研究华支睾吸虫后囊蚴感染宿主的信号传导机制、探究其致病机理提供新的起点。从中国东北疫区(镇赉县)麦穗鱼肉里分离收集华支睾吸虫囊蚴,采用Trizol Reagent提取其总RNA,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA,反转录合成第1链cDNA及第2链cDNA,加EcoRⅠ接头,经XhoⅠ酶切,用CHROMA SPIN-400柱离心层析纯化后,与载体λZAP Express连接,Gigapack Ⅲ Gold包装蛋白体外包装,构建华支睾吸虫后囊蚴cDNA表达文库。结果表明,构建的华支睾囊蚴cDNA表达文库的库容量为9.15×105PFU,重组率为99.5%,扩增后文库滴度为1.6×1010PFU/mL。成功构建了一高质量的华支睾吸虫后囊蚴cDNA表达文库。

不同年龄驴的后消化道中挥发性脂肪酸含量和组成的分析初探

主要研究不同年龄驴在后消化道不同部位的挥发性脂肪酸(VFA)含量及组成。选取幼龄、壮年及老龄驴46头,采集不同肠段食糜液,调查不同年龄动物不同后消化道部位中VFA变化。结果发现:1)驴个体间VFA含量差异较大,回肠中VFA含量低,而后肠VFA含量高,VFA含量通常为右腹结肠>右背结肠>盲肠>回肠。2)不同年龄驴后肠各部位中各VFA摩尔比例几乎无明显差异,微生物发酵类型为乙酸型,乙酸:丙酸:丁酸比例通常为65:20:10;但回肠各VFA比例与后肠差异较大,回肠中丁酸、异戊酸和戊酸比例较后肠高。总结:在大于1岁龄驴中,年龄不是影响驴后肠VFA含量及比例的主要因素,表明大于1岁龄驴的后肠发酵系统已经基本完善;但回肠与后肠的VFA含量和比例存在明显差异。

小花棘豆提取物抗炎镇痛作用的研究

为探讨小花棘豆活性成分的抗炎镇痛作用,通过醋酸扭体法、二甲苯诱导的小鼠耳肿胀法、蛋清致小鼠足趾肿胀法和热板法,观察其作用效果。结果显示,小花棘豆氯仿相与正丁醇相均可显著抑制小鼠耳肿胀和足趾肿胀,还具有较好的镇痛效果,其作用效果与阳性药物相当。结果表明,小花棘豆活性成分具有较好的抗炎镇痛作用。

小花棘豆中毒对绵羊运氧能力和抗氧化损伤的研究

探讨小花棘豆(Oxytropis glabra DC)对绵羊抗氧化能力的影响,揭示小花棘豆对绵羊的毒性作用机理。将16只绵羊随机分为4组,即对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,3个试验组分别按照每千克体重5、10、20 g的剂量饲喂小花棘豆,至典型临床症状出现,通过采血检测绵羊红细胞和抗氧化指标的变化。结果显示,与正常对照相比,中毒绵羊血液红细胞数(RBC)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(HGB)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞体积(MCV)、甘油三酯(TG)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、黄嘌呤氧化酶(XOD)活性显著下降,红细胞分布宽度(RDW)、总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、低密度脂蛋白(LDL-C)和极低密度脂蛋白(VLDL-C)含量均显著上升。结果表明,小花棘豆中毒可显著影响绵羊血液运氧和抗氧化能力,并影响绵羊的脂代谢。

股骨粗隆间骨折合并同侧股骨干骨折的手术治疗

目的探讨股骨粗隆间骨折合并同侧股骨干骨折的手术治疗方法及疗效。方法回顾分析我院自1998年1月至2005年12月收治股骨粗隆间骨折合并同侧股骨干骨折患者18例，全部病例均采用手术切开复位内固定，股骨粗隆间骨折应用动力髋内固定，股骨干骨折采用记忆合金环抱器内固定。结果术后随访2～8年，平均4．2年。全部病例均获骨性愈合，疗效满意。结论股骨粗隆间骨折合并同侧股骨干骨折在下肢骨折中相对较少，但处理较为复杂和困难，治疗有一定难度，使用动力髋与记忆合金环抱器同时进行内固定，方法简单，固定牢靠，患肢可早期进行功能锻炼，这种方法是治疗单侧肢体多处骨折较好的方法之一。

苦马豆素人工抗原免疫小鼠的安全性试验

通过分析苦马豆素(Swainsonine,SW)人工抗原SW-OVA对小鼠机体的影响,进行安全性评价。将36只昆明种小鼠随机分为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组,每组12只。试验组依次进行首免和加强免疫,免疫前采血,分析血清生化指标谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-甘露糖苷酶(AMA)、尿素氮(BUN)的变化,血常规指标红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)、淋巴细胞数(LYM)、血小板数(PLT)和血红蛋白含量(HGB)的变化,同时检测免疫组血清中有无SW,并观察小鼠脏器系数及其形态学变化。结果表明,免疫组小鼠与对照组小鼠血清生化指标、血常规指标和脏器系数差异不大,免疫小鼠血清中未检出SW,镜检未见免疫小鼠器官出现中毒现象。合成的人工抗原SW-OVA具有较好的安全性。

开放与微创经椎间孔椎体间融合治疗单节段退行性腰椎疾病的Meta分析

背景:微创经椎间孔椎体间融合技术采用微小切口经可扩张通道进行,与开放经椎间孔椎体间融合技术相比,微创技术视野小,操作更为精细,对周围组织的损伤较小,有利于恢复。目的:对微创经椎间孔椎体间融合技术与开放经椎间孔椎体间融合技术治疗单节段退行性腰椎疾病的疗效及临床价值进行评价。方法:检索2005至2012年间Cochrane library、PubMed、Embase、SCI、中国生物医学文献数据库、中国知网和万方数据库,手工检索相关文献的参考文献及4种中文主要骨科杂志,纳入以单节段退行性腰椎疾病为研究对象,比较微创与开放经椎间孔椎体间融合技术治疗的随机对照试验,前瞻性队列研究及回顾性队列研究,严格评价纳入研究的方法学质量并提取资料,用Cochrane协作网提供的Revman5.1进行Meta分析。结果与结论:经过筛选纳入7个研究(856例患者)。7个研究圴选用手术时间作为观察指标,结果显示微创手术的手术操作时间与开放手术比较差异无显著性意义(P=0.11);6个研究选用术中出血量作为观察指标,结果显示微创手术的术中出血量明显少于开放手术(P<0.00001);2个研究选用手术后下地时间作为观察指标,结果显示微创手术的术后下地时间短于开放手术(P<0.00001);6个研究选用术中及术后早期并发症作为观察指标,结果显示微创手术的并发症与开放手术比较差异无显著性意义(P=0.75);3个研究选用融合率作为观察指标,结果显示微创手术的术后融合率与开放手术比较差异无显著性意义(P=1.00)。提示微创经椎间孔椎体间融合技术是治疗单节段退行性腰椎疾病较理想的方式。

骨栓加钢板内固定治疗胫骨平台骨折

目的 回顾分析采用骨栓加钢板联合内固定的方法治疗胫骨平台骨折的疗效。使用这种内固定治疗胫骨平台骨折 ,方法简单 ,固定牢靠 ,效果良好。方法 收治 5 8例胫骨平台骨折。切开复位 ,用骨栓加钢板联合内固定。术后两周使用CMP被动和主动非持重功能锻炼 ,八周后逐渐负重。结果 随访时间 6个月～ 6年 ,5 8例随访 5 6例 ,随访率为 97% .按Merchant评定分标准 ,本组病例优良率达 89.3 %。结论 采用切开复位 ,骨栓与钢板联合内固定治疗胫骨平台骨折方法较为简单 ,损伤小 ,疗效可靠。可防止胫骨平台塌陷的并发症 ,有利于患者下肢早期功能锻炼。适合基层医院操作和掌握。

气相色谱内标法测定南疆地区小花棘豆中苦马豆素含量

【目的】建立以甲基-α-D-吡喃甘露糖苷(me-Gal)为内标,用气相色谱法测定小花棘豆中苦马豆素含量的方法。【方法】在柱温200℃、进样口温度300℃、氢火焰离子化检测器温度280℃、高纯氮气载气压力200 kPa条件下,对苦马豆素(SW)进行气相色谱分析。【结果】在0.375～6 mg/mL SW质量浓度范围内对SW和me-Gal峰面积比值的线性关系良好,加标平均回收率为102.18%,RSD=1.724%(n=5)。小花棘豆中各部位苦马豆素含量为:种子(58.09±0.48)mg/kg;叶(21.81±0.58)mg/kg;全株(19.14±0.16)mg/kg;茎(12.30±0.23 mg/kg)。【结论】该方法结果准确,可用于小花棘豆中苦马豆素含量的测定。

小花棘豆生态学研究概况

在充分调查研究的基础上,结合最新研究报道,对小花棘豆的种类与生态学分布,小花棘豆中毒与生态因子的关系,小花棘豆的生态学控制与利用等进行综述,为本区草地生态学研究与小花棘豆的开发利用提供基础。

扩髓与非扩髓髓内钉置入固定治疗成人闭合性胫骨干骨折的Meta分析

背景:一些对照研究试图回答扩髓与非扩髓髓内钉治疗胫骨闭合性骨折的优劣问题,得出结论各不相同。目的:对成人闭合性胫骨干骨折扩髓与非扩髓髓内钉固定的疗效进行Meta分析。方法:计算机检索PubMed、Embase、Cochrane图书馆及中国生物医学数据库、维普信息数据库、万方数据库。收集扩髓与非扩髓髓内钉固定相比较治疗成人闭合性胫骨干骨折的随机对照试验,并评价纳入研究的方法学质量。统计软件用Cochrane协作网提供的RevMan5.0。结果与结论:共纳入3个随机对照临床试验。Meta分析表明,扩髓髓内钉与非扩髓髓内钉固定治疗成人胫骨干骨折比较,其骨折不愈合率降低[RR0.25,95%CI(0.08,0.79),P=0.02],内置物失效率显著降低[RR0.25,95%CI(0.12,0.52)P=0.0002]。说明与非扩髓髓内钉固定相比较,扩髓髓内钉固定治疗成人闭合性胫骨干骨折时骨折不愈合率及内置物失效更少见。扩髓与否在骨折延迟愈合率、畸形愈合率、骨筋膜室综合征发生率方面差异无显著性意义。

和田羊睾丸支持细胞的体外培养与分离鉴定

【目的】研究和田羊睾丸支持细胞的体外培养特性。【方法】取新生和田羊睾丸组织,利用两步酶消化后,采用差速贴壁法纯化细胞进行体外培养,并通过形态学观察、HE染色、AKP染色、油红O染色、吖啶橙染色、罗丹明123染色、免疫组化染色、RTPCR和MTT法检测细胞活性及纯度。【结果】培养基中加入2.00%血清浓度的DMEM/F-12可提高支持细胞纯度,在体外培养传至20代的和田羊睾丸支持细胞形态和核型均为正常;所培养的细胞内波形蛋白表达及标志基因SCF和GDNF的表达均为阳性。【结论】本试验成功建立了和田羊睾丸支持细胞体外培养模型。

小花棘豆对和田羊血液生化指标影响

将12只和田羊随机分为3组,即对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别按10和20g.kg-1.d-1剂量饲喂小花棘豆干粉,饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒前及攻毒后每隔7 d采血1次,检测和田羊血液生化指标变化。结果表明,与正常对照相比,试验组和田羊血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性极显著上升,α-甘露糖苷酶(AMA)活性极显著下降;血清中尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)含量均高于对照;甘油三酯(TG)和白蛋白(ALB)含量低于对照。结果表明,小花棘豆中毒对和田羊血液生化指标有显著影响,并呈现出一定时间和剂量效应关系,小花棘豆对和田羊心、肝、肾等器官有一定毒害作用。

改良后路病灶清除打压植骨内固定治疗胸腰椎结核

目的:探讨改良后路病灶清除打压植骨内固定治疗胸腰椎结核的可行性及疗效。方法:2005年1月～2010年3月收治的胸腰椎结核患者中,对17例连续2个节段病变的患者采用改良后路病灶清除、打压植骨、短节段内固定术。T12～L1 4例,L1～L2 7例,L2～L3 6例。影像学检查均有椎旁小脓肿;术前后凸Cobb角22°～50°,平均31.2°;均伴神经功能障碍,ASIA分级C级9例,D级8例。术前、术后常规抗结核药物治疗和营养支持治疗。结果:患者均顺利完成手术,术中无脊髓、大血管及重要脏器损伤。手术时间155.4±21.6min,出血量511.8±98.2ml,输血量164.7±157.9ml,住院时间14.7±1.0d。术后2例患者出现神经根性刺激症状,1～2周后症状缓解;1例术后半年原切口皮下寒性脓肿形成并溃破,经换药治疗后痊愈。随访13～47个月,平均30个月,术后和末次随访时的Cobb角分别为13.0°±5.6°和14.8°±5.8°,矫正率和丢失率分别为58.3%、5.8%。术后4～7个月植骨均愈合,随访期间内固定无松动、断裂及脱落,均无结核复发。末次随访时3例术前ASIA C级患者恢复至D级,余均恢复至E级。结论:对连续2节段胸腰椎(T12～L3)结核患者在有效抗结核药物治疗的前提下采用改良后路病灶清除打压植骨内固定术安全、有效。

不同生长时期小花棘豆营养成分与苦马豆素含量比较

【目的】探讨南疆地区小花棘豆不同生长时期营养成分与苦马豆素(Swainsonine,SW)含量的动态变化,探讨小花棘豆作为饲草的应用前景。【方法】以6个不同生长时期的小花棘豆作为检测样本,通过饲草概略养分分析方法,对小花棘豆营养成分和矿物元素含量的动态变化进行测定;用气相色谱法测定SW含量,并进行显著性差异比较。【结果】随着小花棘豆的生长,其营养成分有不断增加的趋势。其中粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和钙含量在盛花期时达到最大值,干物质和磷含量在结荚期达到最大值,NDF和ADF含量在落叶期达到最大值。小花棘豆SW含量随生长时期的发生明显变化,其中结荚期SW含量均高于其它时期。【结论】小花棘豆营养水平较高,具有潜在的利用价值。对小花棘豆毒素含量和营养价值进行检测可评估其做为饲料的利用前景。

苦马豆素对小鼠肝脏抗氧化功能的影响

【目的】探讨苦马豆素对小鼠肝脏抗氧化功能的影响,进一步揭示苦马豆素的毒性作用机理。【方法】将64只昆明种小鼠随机分为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加15%(含苦马豆素30 mg/kg)、Ⅱ组添加30%(含苦马豆素60 mg/kg)、Ⅲ组添加45%(含苦马豆素90 mg/kg)的比例制作颗粒饲料,饲喂至典型中毒症状出现。攻毒第14、28、42、63 d每次每组随机采集4只小鼠的肝脏,检测SOD、GSH-Px、CAT、NOS活性及MDA、NEFA、·OH、NO和Glu含量的变化。【结果】与正常对照相比,试验组小鼠肝脏SOD、GSH-Px、CAT等抗氧化物酶的活性极显著下降(P<0.01),MDA、NEFA、·OH、NO含量极显著上升(P<0.01),Glu含量极显著下降(P<0.01)。【结论】苦马豆素对小鼠肝脏抗氧化功能有显著影响,而且具有一定的时间和剂量效应关系,长期低剂量摄入苦马豆素可引起小鼠不同程度的肝损伤。

显微内窥镜下腰椎间盘摘除和传统开放手术治疗腰椎间盘突出症的Meta分析

背景:显微内窥镜手术系统将传统开放手术和显微内镜技术相结合,将传统的髓核摘除内镜化、微创化。与传统开放手术相比,显微内窥镜腰椎间盘摘除可放大手术野、有良好的照明系统,术者视野更清晰,操作更为精细,对周围组织的损伤也较小。目的:对显微内窥镜下腰椎间盘摘除和传统开放手术治疗腰椎间盘突出症的疗效及临床价值进行评价。方法:按照Cochrane系统评价的方法,计算机检索Medline(1990-01/2010-03)、Embase(1990-01/2010-03)、Cochrane图书馆及中国生物医学数据库(1990-01/2010-03),并采用手工检索等方法收集会议文献。文献检索无语种限制。收集所有相关随机对照试验,采用Cochrane协作网提供的软件Revman5.0进行Meta分析,以获得显微内窥镜下腰椎间盘摘除和开放手术治疗腰椎间盘突出症的疗效是否有差异的相关证据。结果与结论:共纳入12个研究,包括1748例腰椎间盘突出症患者。进行Meta分析结果显示,显微内窥镜手术的操作时间与传统开放手术无明显差异,但在术中出血量、术后卧床时间和住院时间上优于传统开放手术。提示显微内窥镜手术是一种治疗腰椎间盘突出症理想的微创手术方式。

家兔小花棘豆中毒与血液生化指标的相关性研究

【目的】探讨家兔血清生化指标与小花棘豆中毒(Oxytropis glabra DC Poisoning,OgP)的关系,为小花棘豆中毒的诊治提供依据。【方法】以12只小花棘豆中毒家兔与10只正常家兔为研究对象,检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-甘露糖苷酶(AMA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和极低密度脂蛋白(VLDL-C)含量。采用t检验对两组资料进行差异显著性比较后,再采用简单相关分析方法对各指标与小花棘豆中毒的关系进行分析。【结果】与正常对照相比,小花棘豆中毒家兔血清的AST、ALT、AKP、LDH、MDA、BUN、CRE、GLU、TC、GLO、LDL-C值均极显著升高(P<0.01),AMA、SOD、GSH-Px、CAT、TG和ALB极显著下降(P<0.01),HDL-C值显著下降(P<0.05),TP和VLDL-C含量差异不显著(P>0.05)。与小花棘豆中毒相关的主要因素有AMA、CAT、GLU、LDH、GSH-Px、AKP、TG和CRE,并建立回归方程:OgP=0.714-0.078AMA-0.069CAT+0.038GLU+0.047LDH+0.045AKP。【结论】血清AMA、CAT、GLU、LDH、GSH-Px、AKP、TG和CRE对家兔小花棘豆中毒的早期诊断、治疗、疗效观察和转归判断具有一定参考价值。