辛伐他汀对内皮细胞株ECV-304细胞分化抗原40诱导表达的影响

为研究在人脐静脉内皮细胞中 ,3 羟 3 甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂 (即他汀类药物 )对细胞因子诱导的细胞分化抗原 4 0表达的影响 ,采用培养的人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4 ,联合应用肿瘤坏死因子α和干扰素γ作为刺激剂 ,用不同浓度辛伐他汀干预 ,并用流式细胞仪和逆转录—聚合酶链反应测定细胞分化抗原 4 0的表达。结果发现 ,联合应用肿瘤坏死因子α 10 0kU L和干扰素γ 15 0 0kU L ,可使ECV 30 4细胞株细胞分化抗原 4 0的表达明显增加 ,并有一定的时效关系 ,单独使用肿瘤坏死因子α或干扰素γ则效果不明显 ;辛伐他汀可减少肿瘤坏死因子α和干扰素γ所诱导的细胞分化抗原 4 0的表达 ,随着辛伐他汀药物浓度增加 (0～ 10 μmol L) ,细胞分化抗原 4 0表达逐渐减少 ,呈一定的剂量依赖性。由此提示他汀类药物治疗动脉粥样硬化的抗炎和抗免疫机制中可能有细胞分化抗原 4

CD40L诱导ECV-304细胞VCAM-1表达的分子机制

目的 研究人类脐静脉内皮细胞(ECV-304)、CD40/CD40L系统诱导血管细胞黏附分-1(VCAM-1)表达的分子机制。方法 体外培养ECV-304,免疫印迹分析法及TransAMTM系统分别检测CD40L干预前后转染核因子-κB(NF-κB)P65的表达量及活性。阳离子脂质体介导法短暂转染NF-κB(P65)正反义寡核苷酸(ODN),流式细胞仪检测VCAM-1表达。结果CD40L干预后24 h,VCAM-1的表达显著升高(P<0.05);未干预内皮细胞核内几乎无P65蛋白的表达,CD40L刺激30 min后,P65蛋白表达显著升高(P<0.01);CD40L干预后内皮细胞核抽提物的NF-κB(P65)转录因子活性明显升高。阳离子脂质体转染P65反义ODN至内皮细胞,可以显著抑制 rhsCD40L介导的VCAM-1的表达(P<0.05),转染P65正义ODN则不能抑制rhsCD40L介导的VCAM-1的表达。结论 NF-κB的活化可能部分参与了CD40/CD40L介导VCAM-1表达的信号转导途径。