中德生活垃圾分类管理模式对比——以上海和慕尼黑为例

随着经济的飞速发展与人口的普遍增长,居民生活垃圾总量呈直线增长态势上升。党的十九大明确提出,将生态文明建设和生态环境保护提升到前所未有的战略高度,为2019年垃圾分类的进一步推行提供了必要性与重要性。众所周知,德国以其完善的管理体系一直走在垃圾分类领域的前列。1972年,德国通过了首部《废物避免产生和废物管理法》,而后的47年里,其垃圾分类成就之巨为人称道。本文以两国垃圾分类“排头兵”——慕尼黑和上海市为例,系统对比中德两国垃圾分类法律法规、管理及评估体系,得出两国的差异及各自的优劣情况,总结经验,以期借鉴。

卡那霉素人工核糖开关构建和验证

适体酶是一种常用的人工核糖开关,被广泛用于基因表达调控,目前报道最多且更加成熟的仍是抑制类型(OFF)的适体酶,激活类型(ON)的适体酶报道较少且效率不高,为获得更多激活类型的适体酶,设计并验证可响应卡那霉素调节的激活型适体酶.通过理性设计适体酶linker部分,使用适体酶控制表达卡那霉素抗性基因和荧光蛋白,在大肠杆菌中进行验证及评估.设计了7个不同linker的适体酶结构,在通过大肠杆菌平台进行验证时,其中4个无法在卡那霉素抗性平板上正常生长,3个结构能够正常生长,引入荧光蛋白评估这3个结构发现,这3个结构都能够响应卡那霉素的调节,其调控效率分别为1.93倍、2.99倍和1.43倍.本研究成功实现了在大肠杆菌中对抗生素类型适体酶的验证和评估,并且通过这一策略获得了3个激活类型,响应卡那霉素调节的适体酶结构.

利用CRISPR/Cas9技术构建拟南芥多基因缺失突变体体系

CRISPR／Cas系统来源于古细菌和细菌在进化过程中逐渐形成的一种适应性免疫系统，近年来被改造成为一种新型的基因编辑技术，它能在sgRNA引导下利用Cas9核酸酶对DNA进行定点切割。然而，此系统的缺点在于一对sgRNA具有较高的脱靶率。本实验拟通过改造CRISPR／Cas9相关载体，一方面简化载体构建步骤，另一方面通过设计两对sgRNA1和sgRNA2，提高靶标识别特异性，克服较高脱靶率的问题。实验以拟南芥基因组中U-BoxE3家族基因中3个高度同源基因为靶对象，利用改造后的CRISPR／Cas9载体构建拟南芥多基因缺失突变体体系。此体系的建立有助于研究拟南芥基因组中的家族基因功能，并克服拟南芥家族基因功能研究中的冗余问题。