过氧化氢对内皮细胞表面粘附分子表达的影响

目的 研究 H2 O2 影响内皮细胞与中性粒细胞的粘附机理。方法 采用流式细胞仪检测了 H2 O2(2 5 0 μmol/L)对培养的人脐静脉内皮细胞 (HU VECs)表面粘附分子 ICAM- 1、VCAM- 1、E- selectin表达影响的时程变化 ,和不同浓度 H2 O2 (5 0、15 0、2 5 0、35 0、45 0 μmol/L )作用下内皮细胞粘附分子 ICAM- 1、VCAM- 1、E- selectin表达的变化。结果 1用浓度为 2 5 0 μmol/L 的 H2 O2 处理内皮细胞 ,三种粘附分子表达的时间过程不完全相同 ,I-CAM- 1表达持续上调 ,VCAM- 1表达在 3小时达到峰值 ,而后随着时间的延长逐渐下降 ;E- selectin表达在 3小时才开始显著上调 ,5小时达到峰值 ,然后随着时间的延长逐渐下降 ;2用不同浓度的 H2 O2 处理内皮细胞 3小时后 ,介导三种粘附分子表达达到峰值的浓度不完全相同。ICAM- 1和 VCAM- 1表达在浓度为 2 5 0 μmol/L 时达到峰值 ,而 E- selectin表达的峰值在浓度为 35 0 μmol/L 时 ,当浓度继续增高时 ,其表达明显下调。结论 H2 O2 能引起内皮细胞表面粘附分子表达上调 ,在中性粒细胞对内皮细胞的粘附过程中起着重要作用 ,H2 O2 可能通过激活粘附分子的表达而加重炎症过程。

流体低切应力对内皮细胞IL-8 mRNA表达的影响

为证实内皮细胞 IL- 8表达不仅受化学因子的调节 ,而且还受力学因素的影响。我们用低层流切应力(4 .2 dyne/ cm2 )处理培养的人脐静脉内皮细胞后采用 RT- PCR法检测内皮细胞 IL- 8基因表达 ,并用免疫细胞化学染色法检测内皮细胞内 NF- κB激活的影响 ,结果发现 :1未用切应力处理和切应力作用 0 .5 h后内皮细胞 IL- 8m RNA表达量很少 ,切应力作用 1h后内皮细胞 IL- 8m RNA表达增加 ,2 h进一步增加。2未用切应力处理和切应力作用 0 .5 h内皮细胞核内 NF- κB p6 5染色阴性 ,切应力作用 1h呈弱阳性 ,2 h呈阳性。提示低层流切应力可诱导内皮细胞表达增加 ,IL- 8表达量与切应力作用时间有关。流体切应力可诱导内皮细胞内 NF- κB的激活 ,激活程度与作用时间有关。低切应力诱导内皮细胞表达 IL- 8,可能在急性炎症和动脉粥样硬化发生。

体外诱导条件下大鼠骨髓基质细胞骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA的表达

目的 研究体外培养大鼠骨髓基质细胞诱导条件下 ,成骨分化标志骨钙素和 型胶原 m RNA水平的表达。方法 采用成骨诱导剂 (含地塞米松 10 - 8mol/ L、β甘油磷酸钠 10 mm ol/ L和抗坏血酸 AA 5 0μg/ml)对培养状态下的不同代大鼠骨髓基质细胞进行成骨诱导 ,提取 RNA,采用 RT- PCR方法 ,以β-肌动蛋白 c DNA为内参照 ,检测骨钙素和 型胶原 m RNA的表达。结果 与对照组相比 ,接受成骨诱导剂作用的大鼠骨髓基质细胞随诱导时间的延长骨钙素和 型胶原 m RNA出现高表达 ,且维生素 D为诱导骨钙素 m RNA表达的必需成分。结论 体外培养的大鼠骨髓基质细胞保持成骨未分化状态 ,无骨钙素和 型胶原 m RNA的表达 ,诱导后可向成骨分化 ,骨钙素和 型胶原 m

绝经后骨质疏松的动物模型

绝经后骨质疏松的动物模型陈槐卿李良郑虎老年性骨质疏松症是中老年人的常见病，严重威胁着中老年人的健康，使他们的生活质量下降。随着我国经济的发展，人民生活水平不断提高，我国居民平均寿命延长，到２１世纪，我国将进入老龄化社会，老年性骨质疏松，尤其是妇女绝经...

增龄对大鼠骨髓基质细胞分化的影响

目的对比研究3、6、9、12个月龄大鼠的骨髓基质细胞(marrowstromalcells,MSCs)成骨与成脂肪能力的变化。方法培养液中分别加入成骨、成脂肪诱导剂,在不同时间行细胞化学染色观察3和12个月龄两组大鼠MSCs的成骨与成脂肪能力的变化;采用RT-PCR法分别检测3、6、9、12个月龄大鼠的MSCs的Ⅰ型胶原mRNA和脂蛋白脂酶mRNA水平的变化。结果成骨诱导1周后,12个月龄大鼠的MSCs对照与诱导组碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)表达阳性率均低于3个月龄大鼠的同组细胞。成骨诱导12d后,3个月龄大鼠组的MSCs先于12个月龄大鼠组形成钙化。成脂肪诱导第2天,12个月龄大鼠组的MSCs先于3个月龄大鼠组MSCs生成脂滴。RT-PCR检测显示Ⅰ型胶原mRNA水平随月龄增长表达降低,且随诱导时间延长降低幅度变大;脂蛋白脂酶的mRNA水平随月龄增长表达增加,随诱导时间延长增加幅度变大。结论大鼠的MSCs随月龄增长成骨能力降低,成脂肪能力增强。

年龄变化与性别对血液粘弹特性的影响

用Low Shear-30流变仪测定了350例健康成年人（男178名,女172名）和211名健康儿童（男108名,女103名）于血细胞压积自然状态下的血液粘弹性参数和有关流变参数:复粘度的粘性分量q’和弹性分量n”、剪切弹性模量G’、在0石125-‘和51.ZS-‘下全血表观粘度（n。。;。、n。;。）、释氧系数（OD）、纤维蛋白原和血浆粘度（n。）。将男女受试者按年龄分成9组:I组,新生儿（生后1—7天）;I组,l--x岁;互组,5—9岁;N组,10—15岁;v组,17—29岁;v组,30—39岁;w组,40—49岁;贝组;50-59岁;辽组,大于60岁。探讨年龄对全血粘弹特性参数和其他流变参数的影响。结果征明新生儿组处于血液高粘滞状态,He丁,n。。;:,儿;.1,丫、丫、0’明显高于其他各组;而刀、巨组处于血液低粘滞状态,上述各参数低于其他各组;I-互组血液粘弹性参数无性别差异;w组才出现男女性别差异;在卜亚组,男性血液的丫、门”、G’、n。。;。、n。;.:明显高于女性组,女性组血液的ODk于男性组,纤维蛋白原和＊。男女两组间无差异。纤维蛋白原和nP随年龄增长而增高;HCT、n。。;:、门s:。在男子第伍组比 V-w组明显降低,在女子第可组这些参数高于第R组。OD在第卜皿组均无慑别差异,在第可组达闻峰,且女子组OD值高于男子组而后随年龄增长几乎平行地降低。n’在男?

人血粘弹性的研究

采用Low Shear-30流变测定仪,改变人血红细胞压积(HCT),血浆浓度和正弦振荡剪切流频率,观察血液粘弹特性的变化。建立了经验方程,以表示HCT与粘性分量(η′),弹性分量(η″)的关系。

流体切应力对中性粒细胞表面粘附分子表达的影响

采用Ｌｏｗ ｓｈｅａｒ ３０ 对中性粒细胞施加不同强度、不同形式的剪切，在经过荧光单克隆抗体标记后，用流式细胞仪检测ＣＤ１８ 和ＣＤ６２Ｌ在细胞表面的表达情况。结果显示：剪切后ＣＤ１８ 有显著升高，而ＣＤ６２Ｌ阳性细胞比率显著下降，但对ＣＤ６２Ｌ阳性细胞表面ＣＤ６２Ｌ的含量没有明显影响。不同方式的剪切影响有细微差异。ｆＭＬＰ或ＴＮＦ单独作用可以使细胞表面的ＣＤ１８ 表达轻微降低而使ＣＤ６２Ｌ同样发生脱落，刺激因子与切应力同时作用下两种粘附分子的表现有加和性。本文提示，力学作用与生物化学因子的激活作用可能是通过不同的感受器，经过不同的信号转导途径，产生不了同的效应；

雌激素和异黄酮类药物对中性粒细胞粘附分子表达的影响

目的 研究雌激素和异黄酮类药物对中性粒细胞粘附分子表达的影响。方法 利用肿瘤坏死因子 ( TNFα)处理健康人和缺血性中风患者的中性粒细胞 ,加用不同浓度的异黄酮 ( WZ1 、WZ2 )和雌激素 ( WZ3 、WZ4)进行干预 ,采用流式细胞仪定量测定细胞表面的粘附分子表达。结果 110 ng/ml TNFα对健康人中性粒细胞有明显的激活作用 ,可使 CD18表达上调 10 % ,CD6 2 L平均荧光强度下降 15 % ,阳性细胞百分数下降 30 %。 2异黄酮类药物 WZ1 、WZ2 对中性粒细胞表面的 CD18和 CD6 2 L表达基本上没有影响。 3用雌激素类药物 WZ3 、WZ4预处理中性粒细胞后再加 TNFα激活 ,可以使中性粒细胞表面粘附分子 CD18的平均荧光强度下降 8% ,CD6 2 L的平均荧光强度增加 15 % ,CD6 2 L 的阳性细胞百分率增加 2 0 % ;如果先用 TNFα激活中性粒细胞然后再用 WZ3 、WZ4处理 ,中性粒细胞粘附分子的表达与单纯 TNFα组之间无显著性差别。 4TNFα处理缺血性中风患者中性粒细胞后 ,CD18表达增加 2 0 % ,CD6 2 L 的平均荧光强度和阳性细胞百分数均下降 30 % ,与健康对照组相比有统计学差异 ;雌激素预处理后可以抑制中性粒细胞的激活。结论 1TNFα是中性粒细胞强有力的激活剂 ,在中风的发生、发展过程发挥了重要作用。 2异黄酮类药?

流体切应力下IL-8对中性粒细胞的作用

目的 考察中性粒细胞在不同类型流场中对 IL - 8的各种响应强度变化及其相互关系。方法 采用 IL - 8和稳定剪切流或正弦振荡剪切流同时对中性粒细胞作用 1分钟后 ,用流式细胞术测定中性粒细胞 CD18,CD6 2 L表达和 F- actin含量 ;以荧光染料 Fura2 /AM标记细胞内游离钙离子 (〔Ca2 +〕i) ,用荧光分光光度计测定〔Ca2 +〕i。结果 流体切应力能较大程度地影响 IL - 8作用下中性粒细胞表面粘附分子的表达 ,CD18升高 ,CD6 2 L大幅度脱落 ,这一变化与切应力的大小、型式等没有明显的关系 ;另一方面 ,流体场中 IL - 8作用的中性粒细胞内 F-actin含量随切变率的升高而迅速下降 ,继而回升 ,在切变率达 6 0 0 s- 1 时 ,已回复到无切应力时的对照水平 ;〔Ca2 +〕i在 IL- 8和流体切应力的双重作用下先大幅下降 ,而后迅速回升到对照水平。结论 流体切应力在很大程度上影响了 IL- 8对中性粒细胞的激活作用 ,调节了中性粒细胞的反应强度。细胞内游离钙离子浓度的变化最敏感 ,变化幅度最大 ,这与其第二信使作用相符合。

中国成年人全血触变特性的研究

作者应用Low Shar-30流变测定仪,据Huang氏方程,用改良的方法测定了314名健康中国人(男160名,女154名)全血触变参数。提出了男、女两性全血触变参数的正常值范围。两组血浆粕度(η_0)和纤维蛋白原无明显差异。男子组红细胞压积(HCT)、屈服应力(τ_0)、粘度的牛顿分量(μ)、非牛顿分量(η_s-μ)、表观粘度(η_s)(2.378^(-1))、结构参数平衡值(A)、红细胞叠连解聚反应的表观速率常数(ARC)均比女子组明显增高。本研究还发现,随着年龄增大,纤维蛋白原和血浆粘度有增高趋势,男女老年组比青年组明显增高。男女老年组的HCT、τ_0、μ、η_s、(η_s-μ)和A明显比青、中年组低。有趣的是男女两组ARC与年龄的关系是有差别的,其机理有待进一步研究。

正常红细胞与血管内皮细胞粘附特性

用流室法研究正常红细胞（ＲＢＣ）与人工培养的脐静脉内皮细胞之间的粘附特性。结果表明在低切应力下，正常红细胞与内皮细胞之间存在一定数量的粘附，随着切应力的逐步增大，ＲＢＣ—内皮细胞的粘附越来越减少。自体血浆的参与能增加ＲＢＣ—内皮细胞之间的粘附数量约３～５倍，并且也增强了粘附的强度。本文给出了反映切应力与ＲＢＣ—内皮细胞粘附数关系的经验公式，得到粘附特征参数ａ，ｂ值。此ａ，ｂ值能反映不同条件下的ＲＢＣ—内皮细胞粘附特性，本文结果还提出，在体内微静脉部位。

健康青年全血触变特性的测定

本文用Low Shear 30流变测定仪及其附件,记录切变率分别为1.285和2.37秒^(-1)时男女青年全血的二条扭矩衰减曲线,按Huang方程,用非线性参数估计法,计算出五个触变参数,方法较简便,便于推广。其结果与Huang的报导很接近。这些参数与红细胞压积(HCT)之间的关系和我们以前的结果是一致的。男女两组,各有被试者32例;男子组的τ_0,μ,(ηS-μ),A,ARC明显大于女子组,而c和n值在两组间无明显差异,本文认为造成这种差异的原因,可能主要是由于男子组的HCT明显高于女子组。

健康男女青年血液的粘弹特性

作者报道了146例健康青年学生血液粘弹特性和其他多个流变参数和生化指标的测定结果。七项生化指标测定结果表明,血清球蛋白、胆固醇、血糖、纤维蛋白原男女组间无显著性差异(P>0.05),而血清白蛋白、血红蛋白、甘油三酯男子组明显高于女子组(P<0.01)。男女两组的血浆粘度η,无显著性差异(P>0.05),男性组HCT、η_(0.512)、η_(51.2)、AI、明显高于女性组(P<0.01),而女性组ESR、OD明显比男性组高(P<0.01),血液粘弹性指标η′、η″、G′和λ值男性组均高于女性组(P<0.01).作者并对男女两组间的这些差异进行了讨论。

双侧卵巢切除山羊不同时间段血生化指标的变化

动态观察山羊假手术组 ( Sham)和双侧卵巢切除组 ( OVX)在术前、术后 3月、6月、12月和 18月不同时间段血清骨特异性碱性磷酸酶 ( B- AL P)、抗酒石酸酸性磷酸酶 ( TRAP)、血清骨钙素 ( BGP)、血清磷 ( P)、血清钙 ( Ca)的变化规律 ,以及术后 12月血清雌二醇 ( E2 )水平的改变和术后 6月、18月子宫与阴道重量的变化。结果显示 :Sham组术后 18月 B- AL P水平明显高于术前 ( P<0 .0 1) ,其余各时间段相比差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。 Sham组中 TRAP、P、Ca各时间段亦无明显改变 ( P>0 .0 5 ) ;而 BGP在术后 3月下降 ,明显低于术前 ( P<0 .0 5 ) ,以后逐渐升高 ,恢复到术前水平。 OVX组 B- AL P在术后 3月出现增高 ,但与术前相比差异无显著性 ( P>0 .0 5 ) ;术后 6个月 B- ALP迅速增高 ,比术前升高 167% ( P<0 .0 1) ;此后 B- ALP仍缓慢上升 ,至后术后 18个月比术前升高 2 19% ( P<0 .0 1)。 OVX组术后 6月、12月和 18月与同时间段 Sham组相比 ,其 B- AL P水平差异有显著性 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。 OVX组中TRAP在术后 3月比术前明显增高 ( P<0 .0 5 ) ;术后 6月增高最为明显 ( P<0 .0 1) ,与同时间段 Sham组相比也明显增高 ( P<0 .0 5 )。OVX组血清 P在术后 3月、12月比术前明显增高 ( P<0 .0 5 ) ;

骨质疏松症与骨髓基质细胞

最近研究发现各种原因(增龄、去卵巢等)造成的骨质疏松都存在骨量减少和骨髓脂肪增加的现象。在骨质疏松患者中不仅存在骨祖细胞减少,骨髓基质细胞(MSCs)本身的成骨能力也降低。MSCs具有干细胞特性,其细胞分化方向改变,致成骨细胞生成减少,脂肪细胞生成增多可能是老年骨质疏松症的原因之一,其为阐明骨质疏松症的病理机制和研制治疗药物提供了一个新的方向。

实验性急性坏死性胰腺炎狗血液粘弹性改变

为研究血液流变学在急性出血性坏死性胰腺炎(AHNP)发病机理中的作用,将44条杂种狗分成5组。第Ⅰ、Ⅱ组分别为手术对照组和急性间质性胰胰炎组(两组各有8条狗)。第Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组狗的主管内注入牛磺胆酸钠溶液形成实验性急性出血性坏死性胰腺炎。而第Ⅳ、Ⅴ组分别用低分子右旋糖酐40(DX40)和丹参溶液静脉注入作为治疗。在所有5组中动脉血压和中心静脉压于手术前后均未见显著性改变。第Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的血清淀粉酶和脂肪酶水平在实验性AHNP形成后明显增高。但在第Ⅳ、Ⅴ组用药物治疗后,此两酶水平迅速降低。用Low Shear-30流变测定仪测定血液流变学改变。所有5组血浆粘度在手术前、后无明显变化。第Ⅰ、Ⅱ组狗全血的红细胞压积(HCT),在0.512秒^(-1)和51.2秒^(-1)下的表观粘度(η0.512,η51.2),红细胞聚集指数(AI),复粘度的粘性分量(η′)和弹性分量(η″)、以及弹性模量(G′)在手术前后均无明显改变。然而,上述这些参数在实验性AHNP形成后的第Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组有明显增高。但在第Ⅳ和Ⅴ组用药物治疗后,这些参数持续下降;而且,第Ⅴ组丹参溶液比第Ⅳ组的DX40对于血液流变学改变有更好的改善作用。结果证明血液流变学异常是AHNP时引起胰腺微循环障碍的重要因素,并且血液流变学异常的纠正能改善出血性坏死性胰腺炎的症状。

中国人血粘弹性参数正常值及其临床应用

1988年1月～1992年12月,对中国人血粘弹性参数正常值及临床应用进行了系列研究。 (一)研制低剪切-30流变测定仪,提供正弦剪切流测定血液粘弹性参数新方法。并研究了血细胞压积、血浆浓度和正弦剪切流频率等因素与血液粘弹性参数之间的定量关系。