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Jagged1活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨分化但抑制增殖 被引量:7
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作者 王汝杰 刘复州 +7 位作者 沈伟伟 胡旭 陈培 毛德举 卓云云 陈武桂 周跃 初同伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期865-869,共5页
目的:探讨Jagged1通过活化Notch通路对RAW 264.7细胞向破骨分化及增殖的影响。方法:将RAW 264.7细胞分三组培养:对照组(细胞培养基+鼠RANKL 50 ng/L)、Jagged1组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组(细胞培... 目的:探讨Jagged1通过活化Notch通路对RAW 264.7细胞向破骨分化及增殖的影响。方法:将RAW 264.7细胞分三组培养:对照组(细胞培养基+鼠RANKL 50 ng/L)、Jagged1组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白+DAPT),实时荧光定量PCR检测各组破骨细胞标志基因组织蛋白酶K(Cathepsin K,CK)、抗酒石酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)、降钙素受体(Calcitionin receptor,CTR)及Notch靶基因HES-1、HEY-1 mRNA的表达,TRAP染色鉴定破骨细胞,扫描电镜检测破骨细胞溶骨功能。免疫荧光检测NICD的表达变化,CCK-8检测RAW 264.7细胞增殖。结果:Jagged1组TRAP、CK、CTR及HES-1、HEY-1 mRNA的表达、TRAP+细胞数较对照组及DAPT组明显升高(P<0.05),而DAPT组与对照组均无明显变化;细胞免疫荧光显示Jagged1组NICD除表达于细胞膜、细胞质外,细胞核也有较高表达,对照组及DAPT组细胞核中NICD无明显表达;细胞培养48 h,Jagged1组细增殖较对照组及DAPT组出现明显抑制。结论:Jagged1通过活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨细胞分化、抑制其增殖。 展开更多
关键词 JAGGED1 破骨细胞 NOTCH 细胞分化 细胞增殖
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siRNA沉默Sema 4D对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响 被引量:5
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作者 陈武桂 沈伟伟 +3 位作者 胡旭 卓云云 毛德举 初同伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期454-458,共5页
目的:观察siRNA沉默信号素4D(semaphorin 4D,Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、Western blotting检测干扰效率,筛选有效序列。si... 目的:观察siRNA沉默信号素4D(semaphorin 4D,Sema 4D)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移的影响。方法:构建靶向Sema 4D基因的siRNA,脂质体法转染MDA-MB-231细胞系,通过实时荧光定量-PCR、Western blotting检测干扰效率,筛选有效序列。siRNA有效干扰MDA-MB-231细胞Sema 4D表达后,CCK-8法及Transwell迁移实验检测细胞增殖及迁移能力的变化。结果:Sema 4D siRNA转染MDA-MB-231细胞后Sema 4D的(mRNA及蛋白)表达水平明显下降(P<0.05),其中以siRNA-C最明显(P<0.05);与空白、阴性对照组相比,siRNA-C沉默MDA-MB-231细胞Sema 4D表达可明显抑制MDA-MB-231细胞增殖(均P<0.05),同时明显减弱细胞的迁移能力[穿膜细胞数:(105.60±12.07)vs(196.20±9.04)、(186.40±6.69)个,均P<0.05]。结论:siRNA沉默Sema 4D可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并抑制细胞迁移,可作为乳腺癌基因治疗的潜在位点。 展开更多
关键词 SIRNA 信号素4D 乳腺癌 增殖 迁移
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通过骨基质表面培养板检测RANKL诱导破骨细胞骨侵蚀能力 被引量:1
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作者 陈武桂 孙靖 +5 位作者 李松涛 杨思振 张莹 胡旭 廖通权 初同伟 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期162-165,共4页
目的探讨以骨基质表面培养板替代骨磨片鉴定破骨细胞骨侵蚀能力的应用方法。方法通过RANKL诱导破骨前体细胞RAW264. 7建立破骨细胞分化模型,运用TRAP染色检测破骨细胞分化程度,并以骨基质表面培养板替代骨磨片行骨陷窝试验检测破骨细胞... 目的探讨以骨基质表面培养板替代骨磨片鉴定破骨细胞骨侵蚀能力的应用方法。方法通过RANKL诱导破骨前体细胞RAW264. 7建立破骨细胞分化模型,运用TRAP染色检测破骨细胞分化程度,并以骨基质表面培养板替代骨磨片行骨陷窝试验检测破骨细胞骨侵蚀能力,以侵蚀面积反映骨侵蚀能力。结果不同浓度的RANKL因子可有效诱导破骨前体细胞RAW264. 7分化为成熟多核破骨细胞,呈浓度依赖性。成熟破骨细胞在骨基质表面培养板上形成不同面积的不规则侵蚀圆环,趋势与破骨细胞分化程度一致。结论使用骨基质表面培养板可有效反映破骨细胞形成及骨侵蚀能力,与TRAP染色结果一致,并且具有操作简便、结果直观、便于统计分析等优点。 展开更多
关键词 RANKL 破骨细胞 分化 骨基质表面培养板 骨侵蚀实验
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成骨前体细胞对乳腺癌细胞表达骨拟态特性及增殖的影响 被引量:1
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作者 马敏 胡旭 +5 位作者 陈武桂 邱浩 臧乐源 胡建新 周跃 初同伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期954-958,共5页
目的通过共培养体系探讨成骨前体细胞MC3T3-E1对MDA-MB-231乳腺癌细胞表达骨拟态特性及增殖的影响。方法实验组将MC3T3-E1及MDA-MB-231细胞采用transwell小室共培养,上室接种MC3T3-E1成骨细胞,下室接种相同数量的MDA-MB-231细胞。对照... 目的通过共培养体系探讨成骨前体细胞MC3T3-E1对MDA-MB-231乳腺癌细胞表达骨拟态特性及增殖的影响。方法实验组将MC3T3-E1及MDA-MB-231细胞采用transwell小室共培养,上室接种MC3T3-E1成骨细胞,下室接种相同数量的MDA-MB-231细胞。对照组上、下室均采用相同数量及密度的MDA-MB-231细胞。实时荧光定量PCR、Western blot法检测实验组及对照组骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的基因及蛋白的表达差异,采用CCK-8法检测各组增殖的差异,结晶紫染色法检测细胞集落形成差异。结果与对照组相比,实验组OCN、OPN、OPG的基因及蛋白表达均有明显的上调(P<0.05),MDA-MB-231细胞的增殖能力明显增高(P<0.01);实验组MDA-MB-231细胞集落形成数量及大小均优于对照组。结论短期共培养后MC3T3-E1成骨细胞可促进乳腺癌MDA-MB-231细胞表达骨拟态特性,并可促进其增殖及细胞集落形成。 展开更多
关键词 成骨前体细胞 乳腺癌 骨拟态 MDA-MB-231
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退行性脊柱侧凸长节段固定融合手术早期并发症的危险因素分析 被引量:7
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作者 牛晓健 张莹 +4 位作者 杨思振 邱浩 陈武桂 周驰雨 初同伟 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期206-212,共7页
目的:探讨成人退行性脊柱侧凸(ADS)后路长节段固定融合手术早期并发症的危险因素。方法:回顾性分析2011年12月~2018年12月我院收治的行后路长节段固定融合手术ADS患者的临床资料,按术中和术后6周内是否出现早期并发症(肺部感染、泌尿... 目的:探讨成人退行性脊柱侧凸(ADS)后路长节段固定融合手术早期并发症的危险因素。方法:回顾性分析2011年12月~2018年12月我院收治的行后路长节段固定融合手术ADS患者的临床资料,按术中和术后6周内是否出现早期并发症(肺部感染、泌尿系感染、切口感染、胃肠道反应或不完全性肠梗阻、硬脊膜破裂、胸腔积液、心律失常、肝功能损害和休克)分为早期并发症组和无早期并发症组。收集患者基本资料,包括性别、年龄、骨密度、合并症;术前风险评估指标,包括麻醉风险分级、营养风险筛查、深静脉血栓风险分级、手术风险评估;术前影像学测量指标,包括主弯冠状面Cobb角、冠状面平衡距离、脊柱失状位轴;术中相关指标,包括患者手术时间、手术固定节段数、手术椎间融合节段数、减压节段数、术中截骨分级、术中失血量和输血量;术后相关指标,包括患者住院输血总量、住院输血次数、术后血红蛋白最低值、术后白蛋白最低值、住院时间。比较两组间各指标差异和单因素Logistic回归分析来发现潜在危险因素,多因素Logistic回归分析筛选发生早期并发症的独立危险因素。结果:纳入研究的64例患者,男性23例,女性41例,平均年龄60.8±7.9(50~78)岁,早期并发症发生率32.8%(21/64)。有合并症(57.1%vs 25.6%)、术前营养风险筛查≥1分(42.9%vs16.3%)、手术风险评估≥2分(52.4%vs 25.6%)和手术时间(279.3±97.8min vs 238.8±59.3min)、手术固定节段数(8.1±1.6 vs 6.9±2.1)两组间比较存在统计学差异(P<0.05);性别、年龄、骨密度、冠状面Cobb角、CBD、SVA、术前麻醉风险分级、深静脉血栓风险分级和术中失血量、术中输血量、椎间融合节段个数、减压节段个数、截骨等级以及术后血红蛋白最低值、术后白蛋白最低值、住院时间、住院输血总量、住院输血两组间比较无统计学差异(P>0.05)。将有统计学差异的参数进行单因素Logistic回归分析显示术前营养风险筛查分值、术前手术风险评估分值、手术时间、手术固定节段数是早期并发症的潜在危险因素,多因素Logistic回归分析显示,术前营养风险筛查分值和手术时间是ADS长节段固定融合手术早期并发症的独立危险因素。术前营养风险筛查分值每增加1分(OR=3.114,P=0.032)、手术时间每增加1min(OR=1.010,P=0.033),发生手术早期并发症的风险分别增加2.11倍和0.01倍。结论:改善患者营养状况,降低术前营养风险筛查分值、缩短手术时间,对降低退行性脊柱侧凸患者长节段固定融合手术相关早期并发症有益。 展开更多
关键词 退行性脊柱侧凸 手术 并发症 危险因素
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缺氧通过HIF-1α介导NRP-1上调抑制破骨细胞分化 被引量:4
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作者 李松涛 孙靖 +5 位作者 陈武桂 马敏 张莹 牛晓健 周驰雨 初同伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1052-1058,共7页
目的研究低氧/HIF-1α通路对RAW264.7细胞向成熟破骨细胞分化的调控作用,并初步探讨其可能的分子机制。方法采用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒感染法,分别建立HIF-1α和NRP-1稳定低表达的RAW264.7细胞系。将RAW264.7细胞分... 目的研究低氧/HIF-1α通路对RAW264.7细胞向成熟破骨细胞分化的调控作用,并初步探讨其可能的分子机制。方法采用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒感染法,分别建立HIF-1α和NRP-1稳定低表达的RAW264.7细胞系。将RAW264.7细胞分组培养:对照组,分化组(RANKL 100 ng/mL+50%成骨细胞CM),缺氧组(RANKL 100 ng/mL+50%成骨细胞CM+100μmol/L CoCl_2氯化钴),缺氧+HIF-1α-NC组,缺氧+HIF-1α-shRNA干扰组,缺氧+NRP-1-NC组及缺氧+NRP-1-shRNA干扰组。TRAP染色观察破骨细胞的分化情况;RT-PCR检测Cath K、MMP-9、TRAP、HIF-1α和NRP-1 mRNA的表达;Western blot检测HIF-1α和NRP-1蛋白的表达。结果①缺氧组破骨细胞分化相关基因Cath K、MMP-9、TRAP mRNA的表达量及TRAP染色阳性细胞数均明显低于分化组(P<0.05)。②缺氧组细胞中HIF-1α和NRP-1的表达均明显高于分化组(P<0.05)。③与缺氧组相比,缺氧+HIF-1α-shRNA干扰组TRAP染色阳性细胞数及破骨细胞分化相关基因的表达均明显增加(P<0.05);且HIF-1α和NRP-1表达均明显减少(P<0.05)。④与缺氧组相比,缺氧+NRP-1-shRNA干扰组TRAP染色阳性细胞数及破骨细胞分化相关基因的表达均明显增加(P<0.05);且NRP-1表达明显减少(P<0.05)。结论在RAW264.7细胞中,CoCl_2诱导的缺氧能够通过上调HIF-1α增强NRP-1的表达,从而抑制其向成熟破骨细胞分化。 展开更多
关键词 HIF-1Α NRP-1 缺氧 破骨细胞分化 RAW 264.7细胞
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杂交分离手术治疗伴有脊髓压迫症状的胸腰椎转移瘤的疗效观察 被引量:1
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作者 邱奕云 杨思振 +6 位作者 张莹 蔡晨晖 陈武桂 温轩 胡旭 邱浩 初同伟 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期120-126,共7页
目的:评估杂交分离手术治疗伴有脊髓压迫症状的胸腰椎转移瘤的临床疗效。方法:回顾性分析2013年6月~2018年6月我院收治的28例因伴有脊髓压迫症状的胸腰椎转移瘤行手术治疗患者的临床资料,其中男18例,女10例,年龄57.0±10.8岁(41~77... 目的:评估杂交分离手术治疗伴有脊髓压迫症状的胸腰椎转移瘤的临床疗效。方法:回顾性分析2013年6月~2018年6月我院收治的28例因伴有脊髓压迫症状的胸腰椎转移瘤行手术治疗患者的临床资料,其中男18例,女10例,年龄57.0±10.8岁(41~77岁)。原发肿瘤类型:肺腺癌12例,肺鳞癌2例,肺神经内分泌癌1例,直肠腺癌6例,肾透明细胞癌3例,乳腺癌2例,肝细胞癌1例,前列腺癌1例。肿瘤侵犯脊柱部位:单发胸椎转移13例、腰椎转移11例,多发胸椎转移2例、腰椎转移1例,胸腰椎转移1例。术前Frankel分级A级1例,B级5例,C级6例,D级16例;疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)为7.3±0.8分;Tomita评分5.9±0.9分(4~7分);硬膜外脊髓压迫(epidural spinal cord compression,ESCC)评分1b级3例,1c级9例,2级8例,3级8例。均行杂交分离手术,具体方法包括后入路椎体肿瘤部分切除减压、骨水泥钛网支撑、骨水泥填充封闭、椎弓根螺钉内固定术。统计手术时间、术中出血量、术后住院天数,术后即刻及术后3个月时的Frankel分级,术后7d及术后3个月时的VAS评分,美国东部肿瘤协作组(Eastern Cooperative Oncology Group,ECOG)体力状况评分,术中和术后相关并发症情况以及患者生存期。结果:手术时间为202.0±34.7min(140~285min),术中出血量为819.6±150.0ml(500~1100ml),术后住院日为13.2±3.9d(7~22d)。术中及术后并发症:脑脊液漏3例,切口感染3例,尿路感染1例,肺部感染1例,术后急性神经根刺激症状3例,随访至12个月时发生钛网移位1例。术后7d、3个月VAS评分及ECOG评分与术前比较均有显著性改善(P<0.05)。中位随访时间为20.5个月(6~42个月),平均随访时间为21.3±10.0个月,至末次随访有6例存活,其中1例于术后30个月时出现椎体新发转移,行二次手术后仍带瘤生存,至末次随访时存活时间为38个月。结论:杂交分离手术治疗伴有脊髓压迫症状的胸腰椎转移瘤能够明显减轻脊髓压迫,改善患者神经功能,缓解疼痛,提高生活质量。 展开更多
关键词 脊柱转移性肿瘤 杂交分离手术 脊髓压迫 临床疗效
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芒针透刺法治疗膝关节骨性关节炎临床观察 被引量:2
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作者 胡凤军 叶勇光 陈武桂 《中医外治杂志》 2022年第2期100-102,共3页
目的:观察芒针透刺法对于治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法:用随机数字表法将70例膝关节骨性关节炎患者分为治疗组和对照组,每组35例,治疗组使用芒针透刺法治疗,每周2次,连续4周;对照组采用关节腔注射玻璃酸钠治疗,每周1次,连续4... 目的:观察芒针透刺法对于治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法:用随机数字表法将70例膝关节骨性关节炎患者分为治疗组和对照组,每组35例,治疗组使用芒针透刺法治疗,每周2次,连续4周;对照组采用关节腔注射玻璃酸钠治疗,每周1次,连续4周。治疗后观测比较两组疼痛、关节运动功能及中医症状积分改变情况。结果:治疗组总有效率94.29%,对照组总有效率88.57%。结论:芒针透刺法和关节腔注射玻璃酸钠均能明显改善膝关节骨性关节炎患者的临床症状,缓解疼痛,增加关节活动度,提高患者生活质量,且芒针透刺法优于关节腔注射玻璃酸钠。 展开更多
关键词 膝关节骨性关节炎 芒针 透刺
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RNA干扰Semaphorin 4D表达对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响 被引量:2
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作者 陈武桂 沈伟伟 +3 位作者 胡旭 卓云云 毛德举 初同伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期283-291,共9页
目的 :研究Semaphorin 4D(Sema 4D)表达沉默对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响,初步探讨该蛋白在乳腺癌发生和发展中的作用。方法 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Sema 4D在不同转移潜能的乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7中的表达... 目的 :研究Semaphorin 4D(Sema 4D)表达沉默对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响,初步探讨该蛋白在乳腺癌发生和发展中的作用。方法 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Sema 4D在不同转移潜能的乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7中的表达水平。采用短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)慢病毒感染法,建立Sema 4D稳定低表达的MDA-MB-231细胞系,然后采用CCK-8法、FCM法、划痕愈合实验及Transwell迁移实验检测细胞增殖、周期分布及迁移能力的变化。结果 :Sema 4D在MDA-MB-231细胞中表达水平明显高于MCF-7细胞(P<0.05);sh RNA慢病毒感染可明显下调MDA-MB-231细胞中Sema4D的表达;与空白对照组比较,Sema 4D干扰组的MDA-MB-231细胞增殖明显被抑制(P<0.05),G0/G1期细胞所占比例明显增高(P<0.05),而细胞迁移能力明显降低(P<0.05)。结论:Sema 4D在高转移潜能的乳腺癌MDA-MB-231细胞中高表达,sh RNA干扰Sema 4D表达可抑制该细胞的增殖和迁移,并阻滞细胞周期于G1期。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 信号素4D 细胞增殖 细胞周期 细胞迁移分析
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有限稀释法分选人骨肉瘤143-B干细胞及鉴定
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作者 毛德举 胡旭 +7 位作者 张莹 沈伟伟 陈武桂 陈培 何建荣 卓云云 张超 初同伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期16-23,共8页
目的:探索人骨肉瘤143-B干细胞的分选及鉴定方法。方法:采用有限稀释法对143-B细胞进行干细胞的分选,并检测所获取细胞表面干细胞标志物Nanog和OCT4的表达水平;对所获取的细胞进行成骨及成脂诱导分化,以检测其是否具有多向分化的潜能;... 目的:探索人骨肉瘤143-B干细胞的分选及鉴定方法。方法:采用有限稀释法对143-B细胞进行干细胞的分选,并检测所获取细胞表面干细胞标志物Nanog和OCT4的表达水平;对所获取的细胞进行成骨及成脂诱导分化,以检测其是否具有多向分化的潜能;动物成瘤实验鉴定细胞的成瘤能力,耐药实验检测顺铂对细胞半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)的影响。结果:分选获得的单克隆143-L细胞具有较高的成球能力;143-L细胞表面Nanog和OCT4 m RNA和蛋白的表达水平均明显高于亲代143-B细胞;对其进行成骨及成脂多向诱导分化成功。143-L细胞的成瘤能力及耐药能力(顺铂对143-B及143-L细胞的IC50值分别为0.83和2.51μg/m L)均明显高于143-B细胞。结论:有限稀释法可以用于143-B细胞干细胞的分选。 展开更多
关键词 骨肉瘤 肿瘤干细胞 肿瘤干细胞测定 143-B细胞
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肺癌细胞来源的Sema4D通过抑制成骨细胞分化介导肺癌溶骨性骨破坏 被引量:1
11
作者 陈武桂 孙靖 +7 位作者 杨思振 张莹 胡旭 李松涛 沈伟伟 廖通权 周跃 初同伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期701-711,共11页
目的 :探讨肺癌来源的信号素4D(semaphorin 4D,Sema4D)在肺癌骨转移溶骨性骨破坏中的作用及机制。方法 :采用免疫组织化学法检测肺癌骨转移灶及正常骨组织中Sema4D的表达情况。分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测4种肺癌细胞... 目的 :探讨肺癌来源的信号素4D(semaphorin 4D,Sema4D)在肺癌骨转移溶骨性骨破坏中的作用及机制。方法 :采用免疫组织化学法检测肺癌骨转移灶及正常骨组织中Sema4D的表达情况。分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测4种肺癌细胞株中Sema4D蛋白及mRNA表达水平。收集4种肺癌细胞条件培养液,采用ELISA法检测其中Sema4D的分泌水平。收集Sema4D高表达(PC9细胞)及低表达(A549细胞)肺癌细胞的条件培养液,与成骨前体细胞MC3T3-E1共培养后,采用碱性磷酸酶染色法检测成骨细胞分化水平,采用茜素红染色法检测成骨细胞矿化能力,采用实时荧光定量PCR法检测成骨细胞分化基因如肝/肾/骨型碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, liver/bone/kidney,ALPL)、Oxterix和Ⅰ型胶原α1(collagen typeⅠalpha 1,Col1α1)的表达水平。将Sema4D shRNA转染肺癌PC9细胞后,采用蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR及ELISA法分别检测肺癌细胞中Sema4D表达与分泌水平的变化;收集肺癌条件培养液与成骨前体细胞共培养,再次采用碱性磷酸酶染色法、茜素红染色法和实时荧光定量PCR法检测干扰Sema4D表达后肺癌条件培养液对成骨细胞分化的影响。结果:与正常骨组织相比,Sema4D在肺癌溶骨性骨转移灶中高表达。Sema4D在不同肺癌细胞株中呈不同程度的表达与分泌,其中肺癌PC9细胞中表达与分泌水平最高,而肺癌A549细胞中表达与分泌水平最低(P <0.05)。肺癌条件培养液可明显抑制成骨前体细胞在成骨诱导剂诱导下的成骨分化,表现为碱性磷酸酶染色及茜素红染色的相对染色面积减小(P值均<0.05),成骨分化基因ALPL、Oxterix和Col1α1的mRNA表达水平均明显降低(P值均<0.05);并且Sema4D高表达细胞株PC9的条件培养液抑制成骨细胞分化的能力明显强于Sema4D低表达细胞株A549(P <0.05)。shRNA转染可显著降低肺癌细胞中Sema4D的表达与分泌水平(P值均<0.05),并且使肺癌细胞条件培养液对成骨细胞分化的抑制作用明显减弱(P值均<0.05)。结论 :肺癌来源的Sema4D通过抑制成骨细胞分化在肺癌溶骨性骨破坏中发挥重要作用,提示其有望成为治疗肺癌骨转移的一个重要靶点。 展开更多
关键词 肺肿瘤 肿瘤转移 信号素4D 成骨细胞 细胞分化
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CD147对肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:2
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作者 卓云云 王洪凯 +5 位作者 沈伟伟 陈武桂 毛德举 胡旭 张超 初同伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期168-175,共8页
目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,EMP,又称CD147)对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:将CD147过表达慢病毒、短发夹RNA(short hairpin RNA,... 目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,EMP,又称CD147)对肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:将CD147过表达慢病毒、短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)干扰CD147表达的慢病毒及阴性对照(negative control,NC)慢病毒分别感染肺癌A549细胞,获得CD147稳定过表达的A549EMP细胞、稳定干扰CD147表达的A549sh EMP细胞和阴性对照A549NC细胞。应用CCK-8(cell counting kit-8)法、细胞划痕实验和Transwell小室法分别检测A549EMP、A549sh EMP和A549NC细胞的增殖、迁移及侵袭能力;蛋白质印迹法检测A549EMP、A549sh EMP和A549NC细胞中β-catenin的核表达情况。结果:A549EMP细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显高于未进行慢病毒感染的空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05),而A549sh EMP细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显低于空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05)。A549EMP细胞β-catenin的核表达水平明显高于空白对照组A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05),而A549sh EMP细胞β-catenin的核表达水平明显低于空白对照A549细胞和阴性对照组A549NC细胞(P<0.05)。结论:CD147可增强肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与β-catenin的激活有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 细胞增殖 细胞运动 肿瘤浸润 CD147 BETA-CATENIN
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低氧抑制乳腺癌细胞中信号素3A表达并调控成骨前体细胞分化 被引量:3
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作者 徐峥 陈武桂 +2 位作者 孙靖 陈培 初同伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1298-1306,共9页
目的 :通过低氧刺激乳腺癌MCF-7细胞,比较常氧与低氧条件下获取的MCF-7细胞条件培养液对成骨前体细胞MC3T3-E1分化能力的影响,并初步探讨信号素3A(semaphorin 3A,Sema3A)表达对低氧调控乳腺癌骨转移中成骨细胞分化的作用。方法 :收集乳... 目的 :通过低氧刺激乳腺癌MCF-7细胞,比较常氧与低氧条件下获取的MCF-7细胞条件培养液对成骨前体细胞MC3T3-E1分化能力的影响,并初步探讨信号素3A(semaphorin 3A,Sema3A)表达对低氧调控乳腺癌骨转移中成骨细胞分化的作用。方法 :收集乳腺癌MCF-7细胞在常氧和低氧条件下培养48 h后的条件培养液,用其培养成骨前体细胞MC3T3-E1。采用BCIP/NBT碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)显色试剂盒和ALP活性检测试剂盒检测MC3T3-E1细胞中ALP的含量及活性,茜素红S(alizarin red S,ARS)染色法检测MC3T3-E1细胞的矿化情况。同时,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测常氧和低氧条件培养0、12、24和48 h后MCF-7细胞中Sema3A的表达变化。将重组人Sema3A蛋白加入到MCF-7低氧条件培养液处理的MC3T3-E1细胞中,实时荧光定量PCR法检测各组细胞中成骨分化相关蛋白ALP、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和转录因子Osterix(Osx)的m RNA表达水平。结果 :相比于常氧条件培养获得的MCF-7条件培养液组,低氧条件培养获得的MCF-7条件培养液可以使MC3T3-E1细胞中ALP的活性明显减弱(P<0.05),且ARS染色钙化面积明显减小(P<0.05)。低氧处理24和48 h后,MCF-7细胞中Sema3A的表达水平明显低于常氧条件下相同时间点的表达水平(P值均<0.05)。向低氧条件培养液培养的MC3T3-E1细胞中加入重组人Sema3A蛋白处理后,MC3T3-E1细胞中ALP、RUNX2、OCN和Osx m RNA的表达水平均较未加重组人Sema3A处理组明显升高(P值均<0.05)。结论 :体外低氧环境可下调乳腺癌MCF-7细胞中Sema3A的表达,进而抑制成骨细胞的分化。提示Sema3A可能是低氧环境下乳腺癌条件培养液抑制成骨细胞分化的重要因素之一。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 细胞低氧 信号素3A 成骨分化
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退变性腰椎侧凸后路长节段固定融合术后冠状面失平衡的危险因素分析 被引量:9
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作者 牛晓健 杨思振 +4 位作者 张莹 邱浩 陈武桂 周驰雨 初同伟 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期430-435,共6页
目的探讨退变性腰椎侧凸后路长节段固定融合术后发生冠状面失平衡的危险因素。方法回顾研究2011年8月—2016年7月行后路选择性经腰椎间孔椎体间融合术(transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF)结合Ponte截骨矫形长节段固定手术的4... 目的探讨退变性腰椎侧凸后路长节段固定融合术后发生冠状面失平衡的危险因素。方法回顾研究2011年8月—2016年7月行后路选择性经腰椎间孔椎体间融合术(transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF)结合Ponte截骨矫形长节段固定手术的41例退变性腰椎侧凸患者临床资料,按末次随访时是否出现冠状面失平衡分为失平衡组(A组,11例)和平衡组(B组,30例)。术前及末次随访时测量以下影像学参数:冠状面Cobb角、冠状面平衡距离(coronal balance distance,CBD)、顶椎偏距(apical vertebra translation,AVT)、顶椎旋转(apical vertebra rotation,AVR)、腰骶弯(lumbar sacral curve,LSC)Cobb角和L5倾斜角(L5 tilt angle,L5TA),计算术前与末次随访时上述影像学参数变化值。对两组患者性别、年龄、术前骨密度T值、固定椎体数、上端固定椎、下端固定椎、TLIF椎间融合器植入节段数、减压节段数、Ponte截骨节段数,以及将有统计学意义的术前影像学参数连续变量转换为二分类变量,进行单因素分析,初步筛选术后冠状面失平衡的影响因素。再将上述初步筛选的影响因素和组间有统计学意义的影像学参数变化值采用多因素logistic回归分析,筛选危险因素。结果 A、B组随访时间分别为(3.76±1.02)年和(3.56±1.03)年,比较差异无统计学意义(t=0.547,P=0.587)。A组患者术前冠状面Cobb角、AVT、LSC Cobb角、L5TA显著大于B组(P<0.05);末次随访时,A组各影像学参数均显著大于B组(P<0.05)。手术前后冠状面Cobb角、AVT、LSC Cobb角变化值两组间比较差异无统计学意义(P>0.05),CBD、L5TA和AVR变化值两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析显示,术前L5TA是术后冠状面失平衡的影响因素(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,术前L5TA≥15°是术后冠状面失平衡发生的独立危险因素,手术前后AVR变化值是冠状面失平衡的保护因素。结论术前L5TA≥15°是退变性腰椎侧凸后路长节段固定融合术后发生冠状面失平衡的独立危险因素。 展开更多
关键词 退变性腰椎侧凸 经腰椎间孔椎体间融合术 冠状面失平衡 危险因素 并发症
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完全性脊髓损伤后脊髓组织病理学变化及其意义 被引量:10
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作者 刘伟 陈武桂 +6 位作者 孙靖 杨思振 李松涛 张莹 邱浩 周跃 初同伟 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期138-144,共7页
目的探讨完全性脊髓损伤后脊髓组织的病理学变化及其对临床诊治的意义。方法选取完全性脊髓损伤患者,行损伤段脊髓及坏死组织清除、功能生物材料联合自体干细胞移植术。对术中所收集损伤脊髓标本,根据损伤时间分为急性损伤期(≤3d)... 目的探讨完全性脊髓损伤后脊髓组织的病理学变化及其对临床诊治的意义。方法选取完全性脊髓损伤患者,行损伤段脊髓及坏死组织清除、功能生物材料联合自体干细胞移植术。对术中所收集损伤脊髓标本,根据损伤时间分为急性损伤期(≤3d)3例、亚急性损伤期(4~14d)3例和慢性损伤期(〉14d)1例。HE染色观察损伤脊髓组织病理变化;免疫荧光检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子-α(TNF—α)、微管相关蛋白2(MAP2)表达情况。结果(1)完全性脊髓急性损伤期主要表现为弥漫充血、液化,亚急性损伤期表现为炎症细胞浸润、脊髓液化,慢性损伤期主要为瘢痕修复。(2)HIF-1α慢性损伤期表达水平(24.67±0.51)高于急性损伤期(3.17±0.40)和亚急性损伤期(4.62±0.48)(P〈0.05),且亚急性损伤期表达水平高于急性损伤期(P〈0.05)。(3)TNF-α亚急性损伤期表达水平(17.60±1.17)高于急性损伤期(5.35±0.33)和慢性损伤期(1.81±0.17)(P〈0.05),且急性损伤期表达水平高于慢性损伤期(P〈0.05)。(4)MAP2急性损伤期表达水平(9.46±0.41)高于亚急性损伤期(3.25±0.42)和慢性损伤期(1.16±0.08)(P〈0.05),且亚急性损伤期表达水平高于慢性损伤期(P〈0.05)。结论完全性脊髓损伤后脊髓出现充血、液化、坏死并逐渐瘢痕修复等病理变化,损伤期间存在低氧、炎症、神经元凋亡和修复等多种现象,脊髓损伤后炎症因子主要表达于亚急性损伤期的微环境变化过程,缺氧主要参与了慢性损伤期病理变化过程。这可为临床完全性脊髓损伤的药物治疗和手术治疗时机提供新的理论参考依据。 展开更多
关键词 脊髓损伤 病理学 外科 免疫组织化学
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一期后路全脊椎整块切除术治疗下腰椎转移性肿瘤 被引量:1
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作者 邱奕云 杨思振 +6 位作者 张莹 蔡晨晖 陈武桂 温轩 胡旭 邱浩 初同伟 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第19期1309-1317,共9页
目的探讨一期后路全脊椎整块切除术治疗下腰椎(L4、L5)转移性肿瘤的可行性和临床效果。方法回顾性分析自2012年1月至2018年6月23例行手术治疗的下腰椎转移性肿瘤患者资料,其中男14例,女9例;年龄(57.9±10.8)岁(范围37~74岁)。所有... 目的探讨一期后路全脊椎整块切除术治疗下腰椎(L4、L5)转移性肿瘤的可行性和临床效果。方法回顾性分析自2012年1月至2018年6月23例行手术治疗的下腰椎转移性肿瘤患者资料,其中男14例,女9例;年龄(57.9±10.8)岁(范围37~74岁)。所有患者均行一期后路全脊椎整块切除、钛网植入、后路椎弓根钉棒系统内固定术治疗。统计的临床指标包括手术时间,术中失血量,术后住院时间,患者术前、术后1个月及术后6个月的疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、美国东部肿瘤协作组(Eastern Cooperative Oncology Group,ECOG)体力状况评分,患者术前、术后的美国脊柱损伤协会(American spinal injury association,ASIA)脊髓损伤分级,围手术期并发症,局部复发情况及患者生存期。结果本组23例中位随访时间为20个月(6~56个月),至末次随访仍有3例存活,其平均随访时间为(37.3±11.7)个月,其中1例出现局部复发,但仍带瘤生存。手术时间(258±96)min(范围155~510 min);术中出血量(1258.7±528.6)ml(范围750~2500 ml);术后住院时间(18.4±4.6)d(范围10~30 d)。VAS评分由术前(7.4±0.8)分改善至术后1个月(2.6±0.6)分,ECOG评分由术前(1.6±0.9)分改善至术后6个月(0.9±0.7)分,与术前相比差异均具有统计学意义(P<0.05)。6例出现术后急性神经根刺激症状,3例出现术后脑脊液漏,3例出现术后切口感染,1例肺部感染,3例随访期间出现钛网移位。结论一期后路全脊椎整块切除术治疗下腰椎转移性肿瘤是可行的,虽然因为特殊的解剖结构和生物力学特性,该术式具有相当的挑战性,但远期随访效果满意。 展开更多
关键词 腰椎 转移瘤切除术 功能恢复 内固定器 随访研究
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