茯苓多糖对癫痫大鼠海马神经细胞凋亡及Nrf2ARE信号通路的影响

目的 探讨茯苓多糖(PPC)对癫痫大鼠海马神经细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法 将SD大鼠分为NC组、Model组、茯苓多糖、中、高低剂量组(PPC-L组,50 mg/kg;PPC-M组,100 mg/kg;PPC-H组,200 mg/kg),每组12只。除NC组外,其他组均需构建癫痫大鼠模型。建模成功后,给药处理,1次/d,连续14 d。比较5组大鼠癫痫发作潜伏期的差异;通过Morris水迷宫实验检测各组大鼠逃避潜伏期、穿越平台次数;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒分别检测海马组织中CAT、SOD、GSH水平;TUNEL染色检测神经细胞凋亡;western blot检测大鼠海马组织中活化的Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)、Bax、核因子E2相关因子2 (Nrf2)、血红素氧化酶(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO-1)蛋白表达。结果 与NC组比较,Model组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马组织中SOD、CAT、GSH水平及Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达水平显著降低,神经细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与Model组比较,PPC-L组、PPC-M组、PPC-H组大鼠癫痫发作潜伏期延长,逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,海马组织中SOD、CAT、GSH水平及Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达明显升高,神经细胞凋亡率、Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 PPC可抑制氧化应激,减少神经细胞凋亡,发挥抗癫痫作用,该机制可能与激活Nrf2/ARE信号通路有关。

lncRNA-BC200调控Aβ_(25-35)诱导的神经细胞PC12炎症因子表达和细胞凋亡

目的探讨lncRNA-BC200对Aβ_(25-35)诱导的神经细胞炎症和细胞凋亡的影响及可能机制。方法将神经细胞PC12分为正常对照组(细胞常规培养)和10、20、40μmol/L Aβ_(25-35)组(分别用10、20、40μmol/L Aβ_(25-35)干预细胞24 h),流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法检测细胞中lncRNA-BC200表达。将PC12细胞分为正常对照组、Aβ_(25-35)组(用20μmol/L Aβ_(25-35)干预PC12细胞24 h)、si-NC+Aβ_(25-35)组(用20μmol/L Aβ_(25-35)干预转染si-NC的PC12细胞24 h)、si-lncRNA-BC200+Aβ_(25-35)组(用20μmol/L Aβ_(25-35)干预转染si-lncRNA-BC200的PC12细胞24 h)和TNF-α+si-lncRNA-BC200+Aβ_(25-35)组[用20μmol/L Aβ_(25-35)和20μg/L肿瘤坏死因子α(TNF-α)共同干预转染si-lncRNA-BC200的PC12细胞24 h],流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中TNF-α、白细胞介素6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)表达,Western blot检测细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达。结果10、20、40μmol/L Aβ_(25-35)组PC12细胞凋亡率和lncRNA-BC200表达均高于正常对照组。Aβ_(25-35)组细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达,以及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均高于正常对照组。si-lncRNABC200+Aβ_(25-35)组PC12细胞凋亡率和细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均低于Aβ_(25-35)组。TNF-α+si-lncRNA-BC200+Aβ_(25-35)组PC12细胞凋亡率和细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均高于si-lncRNA-BC200+Aβ_(25-35)组。结论敲减lncRNA-BC200可能通过抑制NF-κB信号通路的激活减少Aβ_(25-35)诱导的神经细胞PC12分泌炎症因子及细胞凋亡。

超微氧化铁纳米粒子通过强化自噬机制抑制人肝细胞癌HepG2细胞的迁移和侵袭

目的:探讨超微氧化铁纳米粒子(ultrasmall iron oxide nanoparticle,USIONP)对人肝细胞癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:采用粒径分析仪和透射电镜分别分析USIONP的水合粒径和核心粒径,Zeta电位和胶体稳定性实验分析USIONP的分散性及其稳定性以鉴定USIONP的成功制备;用不同质量浓度USIONP(0、50、100、200μg/ml)或200μg/ml USIONP+5 mmol/L 3-MA(自噬抑制剂)联合处理HepG2细胞,CCK-8法检测HepG2细胞的增殖活力,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力,WB实验检测自噬标志物Beclin1、LC3、p62的表达,2’,7’-二氯二氢荧光素二醋酸(DCFH-DA)法测定细胞内活性氧(ROS)水平,铁离子比色法检测细胞内铁离子水平。结果:USIONP的平均水合粒径为(37.86±12.90)nm、核心粒径约10 nm,Zeta电位为–23.8 mV,有良好的水溶分散性,证实了USIONP的成功制备。随USIONP质量浓度升高和处理时间延长,HepG2细胞的增殖活力明显降低(均P<0.05);与对照组相比,200μg/ml USIONP处理HepG2细胞24 h后,迁移、侵袭细胞数量均显著减少(均P<0.05),而3-MA能够部分抵消上述影响(均P<0.05)。与对照组相比,100、200μg/ml USIONP处理组的HepG2细胞中Beclin1和LC3Ⅱ蛋白相对表达水平均显著升高(均P<0.05),而p62蛋白表达水平下降(均P<0.05);200μg/ml USIONP可显著提高细胞内ROS水平与铁离子水平,而加入3-MA可阻断其作用(均P<0.05)。结论:USIONP能促进HepG2细胞发生自噬,而自噬通路激活后降解USIONP释放铁离子和导致细胞ROS水平升高,从而抑制HepG2细胞的迁移和侵袭。

民主理财要做到名实相符

目前，大多数村集体经济组织民主理财小组在日常财务活动监督工作中，能够严守岗位职责，并按照财会制度的有关规定操作，对违法乱纪现象的发生起到了有效的遏制作用，收到了较好的社会效果。但还有少数村民主理财小组平时工作中走过场，形同虚设，未发挥应有的职能作用，给集体资产的安全完整造成了危害。究其成因主要缘于—

四氧化三铁纳米粒子增强二氢卟吩e6对胶质瘤U251细胞的声动力治疗效果

目的:探讨四氧化三铁(Fe_(3)O_(4))纳米粒子(PION)作为药物载体增强二氢卟吩e6(chlorin e6,Ce6)在胶质瘤中的增效作用。方法:采用高温降解法和相转移法制备PEG-Fe_(3)O_(4)@Ce6复合纳米粒子(PION@E6),用水合粒径分析、透射电镜、胶体稳定性分析、紫外可见光吸收光谱等方法对PION@E6进行鉴定。CCK-8法检测胶质瘤U251细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞的凋亡水平,DCFH-DA探针法检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平。构建BALB/c-nu裸鼠胶质瘤U251细胞移植瘤模型,动物活体荧光成像术及磁共振成像(MRI)观察PION@E6及Ce6在移植瘤中的潴留时间,比较PION@E6声动力治疗组及Ce6声动力治疗组的第28天生存情况及肿瘤体积。结果:PION@E6的核心粒径为10 nm、水合粒径为(37.86±12.90)nm,具有良好的水溶性和稳定性;吸收光谱及XRD图谱显示Ce6已经负载到Fe_(3)O_(4)纳米粒子上。与Ce6声动力组比较,PION@E6声动力组U251细胞的增殖活性显著下降(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(均P<0.05),细胞中ROS水平显著升高(P<0.05)。荷瘤裸鼠胶质瘤U251细胞移植瘤治疗实验结果显示,与Ce6声动力治疗组比较,PION@E6声动力治疗组裸鼠移植瘤组织中潴留时间显著延长(P<0.05),存活的裸鼠数显著增多,移植瘤体积显著缩小(P<0.01)。结论:Fe_(3)O_(4)纳米粒子对Ce6介导的胶质瘤U251细胞声动力治疗具有明显的增效作用。