多对沙眼衣原体引物敏感度的比较

沙眼衣原体(CT)检测方法很多,有Moccy细胞培养方法、直接涂片荧光抗体法、酶免疫法、探针杂交和PCR技术等.临床实验证明PCR技术敏感、特异,但敏感度也受标本收集、引物选择等多种因素的影响,本研究主要比较设计不同引物序列对PCR检测敏感度的影响.

人中期胚胎、新生儿脐血及成人骨髓间质干细胞基本生物学特性的比较

【目的】比较人中期胚胎脐血、新生儿脐血以及成人骨髓3种来源的间质干细胞(MSC)生物学特性,为临床治疗选择细胞来源提供实验依据。【方法】采用L-DMEM培养液分离培养3种来源MSC,流式细胞仪进行细胞表型、细胞周期、细胞凋亡分析,成骨、成脂诱导液分别诱导细胞分化,携带绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒转染MSC,荧光显微镜和流式细胞仪检测3种细胞表达外源基因特性。【结果】3种来源标本中均可分离培养出MSC,但新生儿脐血中阳性获得率最低,为29.17%(7/24);3者细胞形态、表面抗原表达、体外分化特性相似,但2种脐血MSC原代培养时间长达30d左右,处于G0/G1期细胞百分比大于成人骨髓;3者均能转染表达外源基因,但胚胎脐血MSC中表达率最高,达(56.32±3.28)%。【结论】胚胎、新生儿脐血以及成人骨髓中均可分离培养出MSC;中期胚胎脐血MSC适用于胎儿自体宫内基因转移/治疗(IUGT)靶细胞;成人骨髓MSC在组织工程、细胞治疗、基因治疗等领域具有广阔的临床应用前景;而新生儿脐血MSC的临床应用有待进一步研究。

HCCR重组蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

目的:克隆人宫颈癌基因(human cervical cancer oncogene,HCCR)的C末端截短序列(膜外区序列),重组表达并纯化HCCR-C端蛋白,制备和初步鉴定针对HCCR-C端蛋白的单克隆抗体。方法:从人肝癌细胞株HepG2中提取总RNA,RT-PCR扩增出HCCR-C端,构建其原核表达质粒,表达HCCR-C融合蛋白,以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,常规细胞融合和选择性培养,亚克隆筛选出分泌特异抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水,Western blot、细胞组化初步鉴定抗HCCR-C端单克隆抗体。结果:成功克隆了HCCR-C末端截短序列,原核表达并纯化了HCCR-C端重组蛋白;经ELISA双筛,获得3株能稳定分泌抗HCCR-C端单克隆抗体的杂交瘤细胞株;Western blot及细胞免疫荧光结果显示,其分泌抗体效价高且均能特异识别HCCR蛋白。结论:成功制备并初步鉴定了针对HCCR-C端的单克隆抗体,为深入研究HCCR蛋白的生物学功能和建立新的肝细胞癌早期诊断方法奠定了可靠基础。

某医院药品收入下降影响因素分析

目的:分析医院药品收入下降的原因。方法:应用可比价格比较及增量因素分析法对某医院门诊及住院药品收入下降的影响因素进行分析。结果:该院门诊药品收入下降的主要原因是人均药费下降;住院药品收入下降的主要原因是日均药费下降。医院实施的药品调控措施及药品集中招标采购导致的药品价格下降是药品费用下降的根本原因。在药品收入下降的同时医院的医疗收入明显上升。结论:医院的经济效益提高的同时病人的负担没有减轻。

统计指标在控制药品费用中的作用

目的:探讨统计指标在控制药品费用中的作用。方法:采用门诊人均药费、门诊人均医疗费、住院日均药费、住院日均医疗费等4个指标,制定调控值,并辅以相应的奖惩措施对药品费用进行控制。结果:门诊人均药费同比下降38％,住院日均药费下降46％,全院药费占医疗费比例由43．4％下降到27％。结论:统计指标在控制药品费用中有实用价值。

健全教育法规体系的若干思考

分析和指出了目前我国教育法规体系在严密性和规划性方面存在的问题.教育法规体系是否严密、是否具有可操作性,直接关系到教育法规能否贯彻落实.建设严密的教育法律法规体系、完善教育法规纵横结构、建立有关教育管理评估法规制度是当务之急,也是在教育立法工作中值得探讨的一个重要课题.

走适宜的信息化之路 建有效益的数字化医院

结合数字化医院建设的现状,提出数字化医院建设的目标要适宜、过程要规范、条件要具备、创新要适度、安全要保证、绩效要评估。

走规范化数字化医院管理之路——数字化医院IT服务管理探讨

本文介绍了IT服务管理的基本概念及在提高数字化医院IT部门服务效率及效果方面的作用,并介绍了IT服务台的运作方式。

走规范化数字化医院建设之路——数字化医院IT治理探讨

本文介绍了IT治理的基本概念及实施方法。认为数字化医院建设迫切需要解决的问题是完善的IT治理机制与IT管理理念特别是责权利明确并且具有IT领导力的CIO机制的建立、规范的数字化医院建设流程、建设完成后的管理流程。同时数字化医院建设的目标要适度,建设的内外条件要具备。IT与管理及业务融合是数字化医院建设的生命力所在。而建立IT治理机制是一个动态的过程,观念的改变是前提,组织保障是关键。

社区健康服务中心绩效考核

目的考核社区健康服务中心的绩效。方法采用KPI关键指标法选择了8个指标:人均就诊医疗费、人均就诊药费、人日均医疗收入、人日均诊疗人次、双向转诊比例、病人满意度、投诉次数、医疗事故次数作为考核指标对三类社区健康服务中心及社康科按月进行绩效考核。结果所考核的月份绩效考核得分不高;药品控制较好,病人负担较轻;由于社康站化验及辅助检查设备少导致每患者人均医疗费偏低;双向转诊比例偏低;部分社康站人均工作量及业务收入都偏低。结论对社区健康服务中心进行绩效考核是必须的而且可行的。

利用数字化平台 构建医院中层文化

医院的中层文化包括医院管理体制的建立、健全,管理系统的运行状况、效果、效率等内容,基于数字化平台,某医院初步建立了适度人均效益的绩效文化、事前控制的质量文化。

ALT异常献血者中TT病毒感染的检测及序列分析

ＡＬＴ异常献血者中ＴＴ病毒感染的检测及序列分析５１８１０１深圳市宝安血站陈汝光黄呈辉军事医学科学院微生物流行病学研究所周育森王海涛ＴＴ病毒（Ｔ．Ｔｖｉｒｕｓ）［１］是在非甲－庚型肝炎病人中发现一种新的肝炎病毒，研究表明它与输血后肝炎有密切关系。为了解...

B7-PE40新型重组融合外毒素的分子生物学特性预测

为探讨构建的重组外毒素融合蛋白B7 1 Linker PE4 0和B7 2 Linker PE4 0及其接头设计的合理性 ,应用核酸和蛋白质序列分析软件系统GOLDKEY ,对上述重组外毒素融合蛋白的柔性、抗原性、亲水性、表位和二级结构等分子生物学特性进行了计算机模拟预测。结果发现它们分别保留了B7 1,B7 2和PE4 0的表位特征 ,没有出现新的表位 ,其柔性接头处的抗原性也极低。与B7 1,B7 2和PE4 0的一、二级结构比较发现 ,这两种融合蛋白各有数个氨基酸残基改变 ,有的氨基酸改变可轻微影响融合蛋白的二级结构。原核表达的两个融合蛋白经Western印迹分析显示 ,它们能分别与B7 1,B7 2和PE4 0单克隆抗体发生特异性结合 ,表明它们较好地保留了B7和PE4 0的抗原性和空间结构 ,与预测的结果一致。提示预测结果会有助于我们研究该系列融合蛋白的体内、外生物学效应 ,以及设计构建新的其他融合蛋白。

人胎盘血间质干细胞分离培养

目的分离培养人胎盘血间质干细胞(hMSC),为hMSC探寻新来源。方法采用羟乙基淀粉(HES)方法分离、富集胎盘血有核细胞;DMEM培养液体外培养、纯化、扩增hMSC;流式细胞仪检测细胞表面标记;地塞米松、IBMX、胰岛素和吲哚美辛定向诱导hMSC样细胞向脂肪细胞分化。结果胎盘血来源有核细胞,在DMEM体外培养条件下,生长出具有塑料粘附特性的梭形细胞,阳性获得率2917%(7/24),该细胞传代培养达6个月以上;流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166表达阳性,CD14、CD34、CD45、CD80、CD86表达阴性;加入脂肪细胞诱导剂,细胞在形态上向脂肪细胞转化,胞内出现脂滴、脂泡,油红O阳性。结论人胎盘血可以分离培养出hMSC,是hMSC的重要来源。

献血者中SEN病毒部分基因的克隆和序列分析

目的 了解我国献血者中是否存在SEN病毒 (SENV)感染 ,并分析SENV国内分离株的部分基因序列。方法 根据SENVORF1区保守序列设计引物 ,采用套式PCR方法 ,从献血者血浆标本中分离SENV基因片段 ,对分离的DNA片段进行基因重组和核苷酸序列分析。结果 从 32 9名献血者中分离出 6株SENV基因片段 ,其核苷酸推导氨基酸序列与SENVA～H基因型序列比较 ,同源性在 5 2 %～ 10 0 % ;系统进化树分析发现 ,分离的 6株SENV属SENV H基因型。结论 国内献血者中存在SENV H基因型感染 ,输血可能成为传播SENV途径之一。

人B7-1和B7-2cDNA的克隆及鉴定

目的 :为探索性构建全新型重组人B7 PE40绿脓杆菌外毒素融合蛋白以长期诱导免疫耐受 ,本研究从急性B淋巴细胞白血病细胞株Raji中克隆N 末端分别缺失 34和 1 6个氨基酸的人B7 l和B7 2基因胞外区 ,并构建含此基因的重组质粒。方法 :根据B7 1和B7 2基因序列设计合成可扩增B7 1和B7 2cDNA的特异性引物 ,用RT PCR的方法从Raji细胞总RNA中扩增B7 1和B7 2cDNA ,并克隆至 pGEM T载体中 ,经酶切鉴定后再进行序列分析。结果和结论 :从Raji细胞中扩增出预期的 6 2 4和 6 75bp的B7 1和B7 2cDNA ,将其克隆至 pGEM T载体中 ,分别经EcoRI/HindⅢ和BamHI/Sphl双酶切电泳和序列分析确证 ,为进一步构建人B7

斑点杂交法检测TTV DNA

用ＴＴＶ基因组ＯＲＦ１区段的引物进行ＰＣＲ扩增， 扩增产物用地高辛标记的特异性探针进行斑点杂交检测。结果检测了５４３ 例肝炎病人和献血员血清标本中ＴＴＶＤＮＡ， 阳性检出率为１８．４％ （１００／５４３）， 其中甲型肝炎阳性率为６．０％ （２／３３），乙型肝炎为７．８％ （５／６４）， 丙型肝炎为２．３％ （１／４３）， 非甲－戊型肝炎为３９．６％ （４０／１０１）， 输血后肝炎为１２．５％ （５／４０），献血员为１７．９％ （４７／２６２）。对斑点杂交与套式ＰＣＲ方法进行了比较， 两种方法之间的符合率为９６．２％ 。

阴道加德纳菌致病株的检测

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测阴道加德纳菌（Ｇ．Ｖａｇ）致病株，探讨其临床诊断价值。在ＩＴＳ－２３ｓｒＲＮＡ基因上设计一对特异性引物Ｐ１／Ｐ２，建立ＰＣＲ反应体系，特异地扩增Ｇ．Ｖａｇ致病株。结果Ｇ．Ｖａｇ扩增片段４３３ｂｐ，１４１例有临床症状者检出３６例阳性，阳性率２５５％，１２９例无症状对照组检出６例阳性，阳性率４６％，两者比较差异有显著性。该ＰＣＲ反应体系特异地检测Ｇ．Ｖａｇ致病株。