体外诱导人脐带间充质干细胞定向分化为肝细胞的研究

目的对肝组织勻浆上清液（LHS）体外诱导人脐带间充质干细胞（hUCMSC）定向分化为肝细胞的功能特性进行检测.方法选取第3代hUCMSC,采用LHS作为诱导培养基,实验分为对照组和LHS处理诱导组,每组有3、5、7d三个时间点;诱导后对细胞进行AFP、CK18、TPH2、CYP3A4、Alb、HGF的免疫荧光细胞化学染色;并测定诱导前后CYP3A酶活性、Alb、HGF和尿素的分泌量.结果LHS诱导3d后细胞表达肝特异性蛋白AFP、CK18、TPH2、CYP3A4、Alb和HGF;对照组hUCMSC不同时间点CYP3A酶特异性代谢底物咪达唑仑的代谢量为0.026-0.030ng/mg,LHS诱导3、5和7d后细胞代谢量分别为（30.14±1.19）、（50.20±6.24）和（120.85±15.52）ng/mg,与对照组相比显著升高（P〈0.01）;对照组细胞3、5和7dHGF的分泌量分别为（0.24±0.14）、（0.42±0.20）和（0.18±0.15）ng/mg,LHS诱导后细胞HGF的分泌量分别为（4.06±1.35）、（3.35±0.17）和（3.83±0.42）ng/mg,与对照组相比显著升高（P〈0.01）;LHS诱导后各组细胞尿素分泌量增加14倍以上,与对照组相比显著升高（P〈0.01）;对照组3、5和7dAlb的分泌量分别为（22.66±2.99）、（16.99±2.90）和（15.37±1.86）ng/mg,诱导3、5和7d后Alb的分泌量分别为（36.40±3.53）、（46.66±2.50）和（54.82±4.28）ng/mg,与对照组相比显著升高（P〈0.05或P〈0.01）.结论在体外经LHS诱导后,hUCMSC能够分化为具有成熟肝细胞功能的肝细胞.