九叶青花椒叶绿体基因组结构及系统进化分析

[目的]揭示九叶青花椒叶绿体基因组的结构特征及其与其他物种的系统进化关系,为花椒属种质资源的鉴定、新品种的培育及品种间的遗传分析提供参考。[方法]使用改良CTAB法提取九叶青花椒叶片总DNA。利用BGISeq-500平台进行高通量测序,SPAdes v3.13.0软件组装叶绿体基因组,通过GeSeq注释九叶青花椒的全叶绿体基因组信息,对其叶绿体基因组序列的结构特征、重复序列、密码子偏好性及系统进化关系进行分析。[结果]九叶青花椒叶绿体基因组为典型的四分体组成结构,全长序列为158579 bp,编码133个基因;测到19个串联重复序列,49个长片段重复,70个简单重复序列;九叶青花椒叶绿体基因组中的蛋白编码基因共有26398个密码子(不包括终止密码子),在密码子第三位碱基上有较强的A/T碱基偏好性。[结论]本研究首次组装了九叶青花椒叶绿体基因组全序列,明确了花椒属为单系类群,九叶青花椒与野花椒(Z.simulans)关系密切,这将为花椒的遗传信息、花椒种质资源评价、分子育种、cpSSR分子标记的开发及遗传多样性等研究提供了重要参考。

基于“阳化气,阴成形”理论的肝硬化发病与治疗探讨

“阳化气,阴成形”的理论源自《黄帝内经·素问》。“阳化气,阴成形”中的阳和阴是指物质的动与静、气化与凝聚、分化与合成等相对运动,进而说明物质和能量的存在形式是相互依存、相互转化的关系。中医认为,生命就是生物体的气化运动,气化运动的本质就是化气与成形相互作用。阳性热,可以化阴为气;阴性冷,阴性凝敛,所以可以凝聚而成形。肝硬化是由各种病因长期作用下对肝脏造成损害,导致肝组织纤维化、假小叶及再生结节形成的慢性进行性肝病,而进行性的肝纤维化是肝硬化的重要病理基础。肝硬化等病可引起腹部肿大,水肿,其原因是中焦阳虚,阳气不能化水,水湿泛滥成病。文章基于“阳化气,阴成形”理论探讨肝硬化的发病机制,探讨肝硬化“体阴而用阳”的辨证论治方法,以期为临床提供参考。

扶正解毒法对肝癌患者TACE术后临床作用的研究

目的:探讨扶正解毒法复方中药对TACE术后肝癌患者的作用。方法:将45例行TACE术的肝癌患者作为治疗组,予常规护肝对症处理加扶正解毒复方中药,观察1月内患者临床症状积分与肝功能、AFP的变化,并与用同样常规护肝对症处理的对照组37例比较。结果:治疗组患者除纳差在术后1周改善不明显外,恶心、腹胀、疲乏在术后1周和1月时皆较治疗前改善(P<0.01或P<0.05);对照组患者术后1周时除恶心较治疗前有改善外(P<0.05),纳差、腹胀、疲乏改善不明显,但治疗1月后恶心、纳差、疲乏均得到改善(P<0.01或P<0.05);治疗组1周和1月时的总症状积分减少较对照组明显(P<0.05)。术后1月,治疗组和对照组除ALB外,ALT,TB IL,AFP均较术前好转(P<0.01或P<0.05),治疗组TB IL改善较对照组明显(P<0.05)。结论:扶正解毒法复方中药能减轻肝癌患者TACE术后的反应,促进肝功能的恢复,提高患者的生存质量。

和解汤对慢性乙型肝炎T细胞受体Vβ7基因表达的影响

目的:探讨和解汤对慢性乙型肝炎（简称慢乙肝）临床疗效与T细胞受体Vβ7（TCRVβ7）基因表达特征的相关性。方法:将慢乙肝患者45例随机分为两组,治疗组（30例）采用和解汤治疗,对照组（15例）采用常规西药治疗,观察治疗后TCRVβ7,基因表达变化。结果:经过6个月治疗,两组ALT水平均显著下降（P<0.01）,治疗组5例测出TCRVβ7,基因表达,并均出现HBV-DNA、HBeAg阴转;对照组无一例测出TCRVβ7基因表达,无一例出现HBV-DNA、HBeAg阴转。HBV-DNA、HBeAg未阴转的患者,虽肝功能恢复正常,但无一例测出TCRVβ7基因表达。两组总有效率比较差异无显著性,但两组显效率比较差异有显著性（P<0.01）。结论:和解汤对TCRVβ7基因表达有调节作用,可能是抑制病毒复制、清除病毒的重要途径。

强肝胶囊治疗非酒精性脂肪肝的临床观察

目的:探讨中药强肝胶囊对非酒精性脂肪肝的治疗作用。方法:将符合非酒精性脂肪肝诊断标准的122例患者随机分为治疗组和对照组,治疗组64例用强肝胶囊,每次5粒,每天2次,对照组用凯西菜,每次0.2 g,每天3次,2组疗程为3个月。结果:治疗组治疗后ALT和γ-GT分别为(43.3±11.7),(50.0±13.4)U.L-1,较治疗前(87.6±15.2),(77.8±16.5)U.L-1有明显改善(P<0.05),甘油三酯(TG)为(1.84±1.28)mmol.L-1,虽较治疗前(2.92±1.63)mmol.L-1有改善,但无统计学意义。对照组治疗后ALT为(40.l±12.4)U.L-1,较治疗前(91.5±14.2)U.L-1明显改善(P<0.05),γ-GT和TG分别为(58.2±16.5),(2.02±1.27)mmol.L-1,较治疗前的(82.6±18.2),(2.78±1.76)mmol.L-1虽有一定的下降,但无统计学意义。治疗组总有效率为79.69%,优于对照组的62.07%(P<0.05)。结论:强肝胶囊对非酒精性脂肪肝有较好的治疗作用。

中药预防慢性乙型肝炎YMDD变异的临床观察

目的:探讨中药对慢性乙型肝炎YMDD变异株产生的预防作用。方法:对104例慢性乙型肝炎患者用拉米夫定治疗半年后随机分为治疗组和对照组,治疗组联用中药,对照组则继续单用拉米夫定,第52周时观察并比较两组患者血清YMDD、HBVDNA、e系统、ALT等指标。结果:治疗组患者YMDD检出率为9.6%,较对照组25%低(P<0.05);治疗组HBVDNA阴转率为86.5%,高于对照组的69.2%(P<0.05);治疗组HBeAg阴转率为46.2%、HBeAb阳转率为28.9%;ALT正常率为82.7%,高于对照组的71.6%(P>0.05)。结论:中药与拉米夫定联用对提高慢性乙型肝炎的疗效、减少YMDD变异的产生有一定的作用。

卡特兰叶片原生质体分离条件的研究

试验以卡特兰叶片组织为材料,研究了预处理时间、酶液组合、酶解时间、酶液中甘露醇含量等不同因素对其原生质体分离的影响.结果表明,以1%的纤维素酶+0.3%的果胶酶为混合酶液,11%的甘露醇为渗透压稳定剂,在25±1℃的条件下,pH为5.8的酶液组合中酶解8 h,获得的原生质体产量最高,可达8.9×106/g鲜重,存活率高达91.2%.

小柴胡汤加减抗慢性活动性乙型肝炎免疫异常及肝损害的观察

用小柴胡汤加减治疗48例慢性活动性乙型肝炎(CAH)患者,并观察治疗前后外周血肿瘤坏死因子(TNF)、T淋巴细胞亚群及肝功能的变化。结果表明,治疗前治疗组TNF、细胞毒性T细胞(CD_8)较正常人升高(p<0.01),总T细胞(CD_3)、辅助性T细胞(CD_4)、CD_4/CD_8较正常人低(p<0.01)。治疗后,TNF、CD_8有所下降(p<0.05),CD_3、CD_4、CD_4/CD_8有所上升(p<0.05或P<0.01),肝功能指标谷丙转氨酶、白蛋白、球蛋白、总胆红素(ALT、ALB、GLB、TBIL)均较治疗前有改善,且优于乙肝宁冲剂对照组。说明小柴胡汤能调整CAH患者的免疫功能及改善肝损害,是治疗CAH的有效方剂。

‘渝茶1号’离体培养及植株再生研究

以腋芽茎段为外植体进行‘渝茶1号’离体培养与植株再生研究.结果表明,起始培养基以改良MS+2mg/LBA+0.1mg/LNAA较为适宜,平均诱导率达71.1%;继代增殖培养基以改良MS+1.5mg/LBA+0.2mg/LNAA+0.5～1mg/LGA3为宜,增殖系数达3.37;生根培养基以1/2MS+5mg/LIBA为宜,生根率达55.6%.

中药复方对人肿瘤细胞凋亡及增殖影响的实验研究

为了解中药复方对人肿瘤细胞株的影响，用ＭＴＴ试验、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验、流式细胞仪观察Ｌ７４０２、ＨＣ８６９３、Ａ５４９细胞株的细胞毒作用、细胞增殖率、亚Ｇ１峰的百分率，并与空白对照组比较。结果中药复方抗襄方对上述三种细胞株的ＬＤ５０分别为１６．２％、２５．４％、２７．８％。在５％、１０％、２０％药物深度时，该方对靶细胞株的细胞增殖有一定的抑制作用；

利用柑橘茎段诱导不定芽改进微芽嫁接技术的研究

试验以成年态纽荷尔脐橙茎段为外植体,诱导产生不定芽改进微芽嫁接成活率与脱毒率．结果表明:半木质化茎段作为培养外植体污染率最低,不定芽诱导的最佳培养基为MT++6-BA 1．0 mg/L+NAA 0．2 mg/L+GA_3 0．2 mg/L．将诱导的嫩芽进行微芽嫁接,成活率超过80．8%,对照成活率为61．3%,聚合酶链式反应(PCR)检测脱毒率达100%．

成年态柑橘茎段离体培养污染率控制方法的研究

通过对红肉脐橙成年态茎段进行离体培养,研究了不同条件对茎段培养污染率的影响。结果表明:在炎热干燥的夏季午后取长0.8cm左右半木质化茎段,用浓度为0.1%HgCl2消毒20min,间隔24h后再用浓度为2%NaClO处理15 min之后进行培养,污染率最低,可控制在10%以内。

大黄■虫丸合辨证方药抗慢性病毒性肝损害及肝纤维化的临床观察

运用大黄虫丸配合中医辨证论治方药治疗慢性病毒性乙型丙型重叠感染性肝炎６２例，观察其抗肝损害及肝纤维化的作用。结果表明，治疗后患者的肝功能ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＴＢＩＬ、ＡＬＢ、ＧＬＢ、γ－球蛋白及纤维化指标ＨＡ有不同程度的改善，提示该法有较好地抗肝损害及肝纤维化的作用。

抗癌方抑制人结肠癌细胞增殖及端粒酶活性

端粒酶(Telomerase)是一种由蛋白质和 RNA 组成的反转录酶,日渐增多的资料表明,肿瘤细胞及组织中端粒酶阳性率较高,通过抑制端粒酶活性筛选抗肿瘤药物的研究是当今的热点之一。为研究中药复方抗癌方(简称抗癌方)对人结肠癌细胞的作用机制,我们观察了抗癌方对 HC 8693细胞株细胞增殖及端粒酶活性的影响。现将结果报道如下。材料与方法1 药物与试剂抗癌方由莪术、半枝莲、柴胡、黄芩、党参、法半夏、大枣、甘草组成,按工艺制成每毫升含1g 生药的汤剂。实验时用生理盐水配成合适浓度。四甲基偶氮唑盐(3-[4,5-dimethylthiazol-21y]-2,5-diphenyl terazolium bromide,MTT)

产业化背景下植物组织培养课程教学改革探索

针对传统植物组织培养教学中存在的弊端和培养现代化、复合型人才的迫切需求,笔者结合自身实践经验,对教学方法、教学内容、教学手段进行了一系列的改革,以期为产业化人才培养奠定良好的基础.

花叶姜离体再生体系的建立

以花叶姜茎块为外植体进行离体培养与植株再生研究。结果表明:花叶姜的启动培养基以改良MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L较适宜,继代增殖以改良MS+BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L为宜,增殖系数可达3.8,生根培养基以1/2MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.1 mg/L为适,生根率达96%,试管苗移栽成活率达97%以上。

红叶石楠‘红罗宾’离体再生技术研究

以红叶石楠‘红罗宾’的茎段为外植体建立再生体系。结果表明:适宜的诱导培养基为MS+BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖系数可达3.0;红叶石楠瓶外生根适宜的方案为:以草炭土为基质,插条在500 mg/L的生长素中浸泡10 s,生根率可达94.2%。

杜鹃红山茶离体快繁的研究

以杜鹃红山茶(Camellia azalea)的幼嫩茎尖为试材进行组织培养研究,建立其快繁体系。结果表明,杜鹃红山茶芽诱导的最适培养基为SH+1.0 mg/L ZT+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA,其芽萌发率为64.4%;最适增殖培养基为1.0 mg/L ZT+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,增殖系数高达2.36;最佳生根培养基为1/2 SH+2.0 mg/L IBA+0.1 mg/L IAA+100 mg/L活性炭,其生根率可达61.7%。

影响柑橘温室嫩芽嫁接成活率因素的探讨

通过柑橘温室嫩芽嫁接试验,研究了不同芽龄、不同管理条件、砧木木质化程度、不同季节对其嫁接成活率的影响。结果表明,不同芽龄的接穗、嫁接苗不同的生长条件、砧木嫁接部位木质化程度以及不同季节的接穗对嫁接成活率都有较大的影响。综合考虑,取芽龄约为10 d的春梢作为接穗,在实生苗的未木质化部位进行嫁接,嫁接苗在光照培养室中生长,成活率可达80%以上。

柑橘温室嫩芽嫁接技术初探

柑橘是童期较长的木本果树，生产中人们常利用嫁接来缩短生产和育种周期。目前常用的柑橘嫁接方法有茎尖微芽嫁接、试管嫁接、田间芽接、高接换种等，其中茎尖微芽嫁接常用于脱毒苗的生产，试管嫁接常用来繁殖组培苗；田间芽接是柑橘苗木最常见的快速繁殖方法，绝大多数的柑橘苗木都是通过这种方法生产的；高接换种则是品种更新的一种嫁接方法。目前关于温室嫩芽嫁接的报道较少，本试验对温室嫩芽嫁接技术进行了初步探讨。结果表明该方法切实可行，嫁接苗木生长速度快，成活率较高。