小鼠神经管发生中抑凋亡基因bcl-2的表达及其对细胞生长的作用

目的:研究小鼠神经管形成过程中原癌基因bcl-2表达及与程序性细胞死亡(programedcelldeath,PCD)的关系。方法:分别取交配后7.5,8.5,9.0,9.5,10.5d鼠胚做全胚胎交实验。结果:交配后7.5d鼠胚,Bcl-2mRNA杂交信号弥散分布于整个胚体,但胚体前1/2的杂交信号较弱,后1/2则相对较强。交配后8.5d鼠胚Bcl-2mRNA有较强的杂交信号沿逐渐升高的神经褶分布(权重为19)。到交配后9.0d,随着神经管的关闭,Bcl-2mRNA在神经褶的表达下降(权重为8)。到交配后9.5dBcl-2mRNA的表达开始回升(权重为14),到交配后10.5dBcl-2mRNA的表达在胚胎颅神经管升高(权重为19)。结论:Bcl-2在早期神经管发生中的作用是多方面的,参与对细胞凋亡的调节和促进细胞的生长和分化。

小鼠脑发育中CDK5 mRNA表达变化的研究

目的 观察周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )mRNA在脑发育中的表达与分布。方法 采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色。结果 ①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5mRNA从胚胎 10 5d(E10 .5 )开始表达 ,主要分布于神经上皮的套层细胞内 ;②脑切片的原位杂交染色观察到从E14到成年期脑内均见CDK5mRNA阳性信号 ,主要定位于神经元的胞浆与核周 ,于新生期前后表达达高峰 ;分布于包括大脑皮层、海马、丘脑、下丘脑、小脑及许多神经核团。在老年期上述区域CDK5表达均有减弱 ,部分区域呈阴性。结论 表明脑内CDK5作用贯穿了整个脑的发育阶段 ,且主要参与了神经系统的早期发育 ;成年后CDK5可能继续保持对某些区域中神经元的功能调节。

正常神经管发育和神经管缺陷中转染重组bcl-2的作用

目的:探讨bcl-2在正常神经管发育和异常神经管缺陷中的作用。方法:构建了重组bcl-2的真核表达载体,建立了维A酸致小鼠神经管缺陷(neuraltubedefects,NTD)模型。用全胚胎培养结合显微注射技术将重组的正义bcl-2表达质粒导入NTD鼠胚后,观察神经管缺陷的改善程度。结果:经转染bcl-2基因后,前脑的关闭率由原来的34%增至80%,中脑的关闭率由原来的17%增至70%,后脑的关闭率也由原来的25%增至增加了70%,脊神经管的关闭率达到100%。结论:RA介导的神经管缺陷可部分被重组的bcl-2基因缓解。

神经管发生与编程性细胞死亡

编程性细胞死亡存在于正常的神经管发育中 ,它作用于神经管形成阶段的器官发生和神经管分化阶段的组织发生过程 ,是维持神经管定型和分化的必要因素。有许多细胞因子如维甲酸、Pax基因、bcl—2基因家族等分别作用于神经管关闭的不同阶段和不同部位 。

小鼠神经管发生中程序性细胞死亡的时空规律

目的:研究小鼠神经管发生中程序性细胞死亡(programmedcelldeath,PCD)的时空规律。方法:分别取交配后9.0d、交配后9.5d、交配后10.5d鼠胚做石蜡包埋连续切片的TUNEL染色。进行神经上皮凋亡细胞的计数分析。结果:观察到交配后9.0d神经上皮的细胞凋亡率(0.1815±0.14)最高,交配后9.5d后细胞凋亡率(0.1377±0.09)降低,交配后10.5d(0.1284±0.07)降至更低。从空间分布看,神经管头端的凋亡细胞明显多于尾端。结论:交配后9.0d神经管的高细胞凋亡率,可能与神经管的关闭有关;神经管颅侧的细胞死亡与脑泡的塑形有关。

猕猴黑质含TH、GABA神经元与老化的关系

采用在种系进化上与人类很接近的猕猴为实验动物，分为青年组和老龄组，通过免疫组织化学技术观察黑质ＴＨ、ＧＡＢＡ神经元与老化相关的变化。结果表明；老龄组黑质致密部和网状部神经元的ＴＨ免疫反应性明显降低，老龄组ＧＡＢＡ神经元数量和免疫反应性均明显低于青年组。提示：中枢神经老化可能与黑质ＴＨ含量和ＧＡＢＡ神经元数目减少有关。

猕猴黑质GABA能神经元的分布

采用进化程度较高的灵长类动物猕猴作为实验材料 ,在光镜下观察黑质的 GABA能神经元。在黑质网状部GABA能神经元数量多 ,以多角形和梭形为主 ,致密部的 GABA能神经元较网状部略稀少 ,胞体形态以多角形、圆形和梭形为主 ;在下丘平面还可见到许多

天花粉蛋白对小鼠胚胎早期发育的影响

本实验利用胚胎培养和动物试验测试天花粉蛋白对胎鼠早期器官形成有致畸作用；头、躯干和四肢可发生畸形，体节数目及轴长减少。母鼠在器官形成期给药，天花粉蛋白可降低胎鼠存活能力、活胎率下降、吸收点数目增加。存活胎鼠顶臀长度较对照组短。畸形胎鼠数目增加。畸形以露脑最为显著。此外有短肢、短尾和矮小。结果显示天花粉蛋白对离体和体内胚胎的发育皆有不良的影响。

人胎儿中枢神经系统发育中的程序性细胞死亡

用流式细胞术结合原位末端标记技术研究了１２～３９周人胎儿神经系统发育中程序性细胞死亡（ＰＣＤ）的发生和变化规律．观察到各胎龄段胎儿的各代表性脑区均有ＰＣＤ发生，可见两次ＰＣＤ峰值分别出现在第１２周和第３９周．推测第１次细胞凋亡高峰可能与清除过多的神经细胞有关，第２次可能与建立精确的神经回路有关．