食品过敏原巴西坚果环介导等温扩增检测方法的建立与应用

根据巴西坚果2S白蛋白基因序列,利用设计软件Primer Explorer Version 4设计并筛选了食品过敏原巴西坚果的环介导等温扩增引物,对反应体系和反应条件进行了优化,建立了巴西坚果的环介导等温扩增检测方法,结果判断可采用实时荧光法和荧光染料终点显色法。以澳洲坚果、开心果、碧根果等17种常见坚果来验证方法的特异性;将巴西坚果DNA进行梯度稀释后验证方法的灵敏度;将0.5%、1%和1.5%3个浓度梯度的巴西坚果DNA重复检测20次来验证方法的稳定性。结果表明,本方法能够特异、灵敏、稳定地检测食品中的巴西坚果成分,检测低限为0.5%。此外,对7种市售食品样品的检测结果表明,该方法与食品标签标示的过敏原成分结果吻合率为100%,假阳性率和假阴性率均为0%。

乳制品中牛IgG含量间接竞争性ELISA检测方法的研究

建立了牛初乳制品和添加了牛初乳成分的乳制品中牛IgG含量间接竞争性酶联免疫吸附测定方法,主要研究步骤包括:制备牛IgG保守区(Fc段),以Fc段为免疫原免疫Balb/C小鼠,取其脾细胞进行细胞融合,制备特异性单克隆抗体及合成适合实际测定用途的ELISA试剂盒。应用本研究建立的方法对标准品和实际样品进行牛IgG含量检测的结果表明,该方法回收率在78.9%～117.5%,批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,检测结果稳定可靠,可满足目前国内牛初乳制品和添加了牛初乳成分的乳制品品质监控的需要。

进口玉米酒糟粕中转基因品系检测方法的比较研究

以美国进口玉米酒糟粕(DDGS)中转基因玉米品系MIR162的实时荧光PCR检测方法为研究内容,分别采用3种常见商业化试剂盒提取基因组DNA,采用3个检测标准中规定的实时荧光PCR方法进行MIR162定性检测,比较了9种方法组合在检测玉米酒糟粕中转基因成分的检测技术性能。结果表明,使用TIANGEN?植物基因组DNA提取试剂盒和《SN/T 1196—2012转基因成分检测玉米检测方法》规定的荧光PCR方法,检测灵敏度最高,符合现行检验监管法规要求。考虑到大宗农产品及其加工产品的国际贸易普遍存在转基因成分低水平混杂的情况,进一步探讨了进口农产品转基因成分检验监管分类管理的必要性,提出针对不同风险级别的进口农产品采用灵敏度相适宜的检测方法。

检测三聚氰胺胶体金免疫层析试验的建立

采用混合酸酐法制备三聚氰胺-OVA偶联抗原,胶体金标记三聚氰胺单克隆抗体,建立了检测三聚氰胺的胶体金免疫层析试验。该试验具有较好的敏感性,最低可检测50μg/L的三聚氰胺。胶体金免疫层析试验对原料奶和奶粉样品中三聚氰胺的最低检测量分别为250μg/L和1000μg/L,可初步应用于基层实验室快速筛查检测。

转基因蛋白质GB检测方法在玉米酒糟粕转基因成分检测中的应用性研究

根据GB/T 19495.8—2004《转基因产品检测蛋白质检测方法》对免疫层析试纸条检测玉米酒糟粕中转基因蛋白质进行了应用性研究,评价了Romer试纸条对玉米酒糟粕中CP4-EPSPS抗除草剂转基因蛋白的检测低限,比较分析了不同称样量下使用超纯水和样品提取缓冲液进行样品中转基因蛋白质提取对检测结果的影响,优化了试纸条检测方法。研究表明,超纯水和试剂盒中配套的样品提取缓冲液均可用作玉米酒糟粕中转基因蛋白质检测的提取试剂;超纯水处理样品的最佳称样量为2.0g;样品提取缓冲液处理样品的最佳称样量为5.0g。从实验操作便捷上考虑,推荐采用35ml超纯水提取2.0g玉米酒糟粕的方案。

广东市售芝麻酱中多种植物源性成分鉴定情况分析

芝麻酱是一种生活中常见的营养而美味的调味品,广泛应用于火锅蘸料、凉拌菜、面食和糕点等,深受消费者喜爱。芝麻酱中是否含有或者仅含有芝麻成分一直是消费者关心的问题。本文应用实时荧光聚合酶链式反应法对广东地区市售的44份芝麻酱样品进行了多种植物源性成分(芝麻、花生、大豆、玉米)检测。结果显示,44份芝麻酱样品均检出芝麻源性成分,符合率为100%;多种植物源性成分检测结果与产品标称信息相符的数量为36份,符合率为81.82%。