化学桌游的设计与应用

设计并实践了一款能结合常规化学作业的桌面游戏,介绍了游戏的道具、基本规则和三种游戏模式,通过过程性观察、问卷数据处理与师生的访谈分析对该桌面游戏进行了评析,丰富了游戏化学习的相关内容。同时提出了两种实施渠道,三点实施建议,旨在让更多的教师将教育游戏应用到教学中去。

微管结合蛋白Tau磷酸化位点突变体的构建及鉴定

目的:构建带有Myc标签的Thr-213、Thr-235、Ser-404磷酸化位点突变为Ala的Tau蛋白真核表达质粒,并在真核细胞中表达Myc-Tau3m蛋白。方法:利用重组PCR方法得到Thr-213、Thr-235、Ser-404磷酸化位点突变为Ala的编码序列,将其插入经Bam HⅠ和KpnⅠ酶切的p XJ40-Myc表达载体,在人293T细胞中转入空载体和重组质粒,利用Western印迹检测其表达及功能。结果:测序和酶切结果证实Myc-Tau3m真核表达质粒构建成功,转染293T细胞后获得表达,表达产物可促进微管的乙酰化。结论:构建了Thr-213、Thr-235、Ser-404磷酸化位点突变的Myc-Tau3m真核表达载体,为进一步研究Tau蛋白磷酸化的生理机能奠定了基础。

核输入蛋白α/β真核表达载体的构建及细胞内定位

目的:构建带有myc标签的核输入蛋白(importin)α/β的真核表达载体,转染人胚肾293T细胞并分析其表达。方法:以乳腺癌文库为模板PCR扩增核输入蛋白α/β基因,扩增产物插入真核表达载体p XJ-40-myc,经双酶切和测序鉴定;将空载体与重组质粒分别转染人胚肾293T细胞,通过Western印迹和免疫荧光技术检测核输入蛋白α/β的表达。结果:酶切鉴定与测序结果表明构建的myc-Importinα/β真核表达载体正确;Western印迹检测到重组质粒在293T细胞中的表达;免疫荧光检测到核输入蛋白α定位于细胞质和细胞核,而核输入蛋白β定位于细胞核。结论:构建了核输入蛋白α/β的真核表达载体,并确定了其在细胞中的表达定位。

带Myc标签的人B55α真核表达载体的构建及其生物学功能

目的:构建带有Myc标签的人B55α真核表达载体,获得Myc-B55α融合蛋白,并初步检测其生物学功能。方法:以本实验室保存的乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出B55α编码序列,将其插入p XJ-40-myc载体,Western印迹检测其表达情况;将重组质粒与空载体分别转染人胚肾293T细胞,通过Western印迹检测B55α蛋白表达水平及其对AKT磷酸化的影响;免疫共沉淀实验检测B55α与AKT是否存在相互作用。结果:双酶切和测序结果表明Myc-B55α真核表达质粒构建成功;Western印迹证实转染293T细胞后Myc-B55α融合蛋白获得表达,并可抑制AKT308的磷酸化;免疫共沉淀结果表明B55α与AKT存在相互作用。结论:构建了带Myc标签的人B55α真核表达载体,为进一步研究B55α在蛋白磷酸化修饰功能中的作用奠定了基础。

Snail真核表达载体的构建及功能鉴定

目的:构建Snail的慢病毒真核表达载体,并研究Snail在肿瘤发生和发展过程中对上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增Snail的全长编码序列,将其克隆到p CDH表达载体上,构建成p CDH-Snail真核表达载体,转染293T细胞,Western印迹检测p CDH载体介导的Snail的表达;与包装质粒共转染293T细胞,包装病毒后感染ZR75-1细胞,经嘌呤霉素筛选2周,得到稳定表达Snail的ZR75-1细胞株,检测ZR75-1细胞对EMT的影响,同时用倒置荧光显微镜观察ZR75-1稳定细胞株中上皮钙粘蛋白分布的变化。结果:Bam HⅠ、XbaⅠ双酶切及测序证实得到p CDH-Snail表达载体,Western印迹表明Snail在293T细胞内得到成功;经嘌呤霉素筛选,获得稳定表达Snail的ZR75-1细胞株;在倒置荧光显微镜下观察,ZR75-1稳定细胞株中的上皮钙粘蛋白绿色荧光明显减弱。结论:构建了p CDH-Snail的慢病毒真核表达载体,建立了稳定表达Snail的ZR75-1细胞,为进一步研究Snail在EMT过程中的机制奠定了基础。

穆贾沃-饶方法计算水平混输管路压降条件分析

介绍了穆贾沃-饶方法计算水平混输管路压降的基本理论,给出了含水率、生产油气比和产液量对误差影响的统计结果。通过分析得出含水率较大,液体的流变特性呈非牛顿特性,穆贾沃-饶方法的计算误差较小。本方法适用于含水率较高,液相流体为非牛顿流体的多相流动。

Twist1稳定表达细胞株的建立及对乳腺癌细胞上皮-间充质转变的影响

目的:构建Twist1的慢病毒真核表达载体,并建立稳定表达Twist1的乳腺癌细胞株,研究Twist1在乳腺癌中对上皮-间充质转变(EMT)的影响。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增Twist1编码序列,克隆到慢病毒p CDH载体,构建成p CDH-Twist1,转染293T细胞,Western印迹鉴定p CDH载体介导的Twist1的表达;包装病毒载体,感染ZR75-1细胞,用嘌呤霉素筛选得到稳定表达Twist1的细胞株,检测ZR75-1细胞对EMT的影响。结果:经Bam HⅠ、Eco RⅠ双酶切及测序证实得到p CDH-Twist1表达载体,Western印迹实验发现Twist1在293T细胞内表达;嘌呤霉素筛选得到稳定表达Twist1的ZR75-1细胞株。结论:构建了p CDH-Twist1的真核表达载体并建立了稳定表达Twist1的ZR75-1细胞,为进一步研究Twist1在EMT过程中的机制奠定了基础。

磷酸化Akt1(Thr308)位点突变真核表达载体的构建及其生物学功能研究

目的:构建磷酸化Akt1(Thr308)位点突变真核表达载体,并瞬时转染胃癌耐药细胞,对其生物学功能进行初步检测。方法:以带有pc DNA3.0-Flag标签的Akt1质粒为模板,采用重组PCR技术扩增得到Akt1(T308A)(苏氨酸突变成丙氨酸)、Akt1(T308E)(苏氨酸突变成谷氨酸)位点突变编码区序列,将其插入pc DNA3.0-Flag载体,双酶切和测序验证后瞬时转染人胚肾293T细胞,Western印迹检测其表达情况;将突变质粒与空载体分别转染人胃癌耐药细胞BGC-823/c DDP,通过Western印迹和实时定量PCR检测Notch1蛋白和m RNA水平的变化,通过CCK-8法检测对耐药细胞生长曲线的影响。结果:双酶切和测序结果表明Akt1(T308A)、Akt1(T308E)的真核表达质粒构建成功,转染293T细胞后获得表达;转染人胃癌耐药细胞BGC-823/c DDP后,利用实时定量PCR和Western印迹证明去磷酸化Akt1(T308A)可抑制Notch1的转录和蛋白水平,模拟持续磷酸化Akt1(T308E)升高Notch1的转录和蛋白表达;细胞生长曲线结果显示,转染Akt1(T308A)较空载体耐药细胞生长慢,而Akt1(T308E)促进耐药细胞生长。结论:PI3K/Akt与Notch1信号通路的激活在胃癌耐药的发生、发展过程中发挥重要作用。

高中化学新旧教材的目录对比研究——以人教版必修教材为例

依据2017年底颁布的高中化学新课程标准编写的人教版高中化学必修教材于2019年出版,为了熟悉新版教材,特别是理解并领会新版教材的创新思想,与新课标的对应性进行深入讨论,笔者对新版教材与旧版教材的内容组织编排顺序和名称的不同之处进行了对比研究,总结了新版教材与旧版教材不同的三大特性。基于此研究,笔者还为新版教材合理利用目录进行教学提出三条建议,帮助学生建构知识框架,养成化学学科核心素养。

“探究苯酚的性质”实验仪器改进

结合关于苯酚实验改进的文献分析,对高中化学中“苯酚的实验探究”的相关仪器进行改进,改进后的“瓢虫”装置趣味性突出,能集合多种实验于一个器皿中,实验现象明显,有对比、有递进,达到“一个装置、三个探究、多个关联现象”的目的,不仅能推进课堂,更能培育学生的证据推理与模型认知、实验探究与创新意识等核心素养。

个体化医学营养治疗对早中期糖尿病肾病患者营养状况的影响

目的探讨个体化医学营养治疗对改善早中期糖尿病肾病患者的营养状况、肾功能和血糖水平的影响。方法选取2020年1月—2021年12月在潍坊医学院附属医院就诊的早中期糖尿病肾病患者共120例,随机分成对照组和观察组各60例。对照组采用传统营养治疗方案,观察组采用个体化医学营养治疗方案,比较两种方案对糖尿病肾病患者营养状况、肾功能和血糖水平的影响。结果治疗前,两组患者的体质指数、白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、血红蛋白、血肌酐、血尿酸、血尿素氮、空腹血糖、糖化血红蛋白差异无统计学意义。治疗后,两组患者体质指数、白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白和血红蛋白均有升高,而观察组升幅高于对照组(P<0.05);两组患者血肌酐、血尿酸、血尿素氮、空腹血糖和糖化血红蛋白均有降低,而观察组降幅高于对照组(P<0.05)。结论个体化医学营养治疗可改善早中期糖尿病肾病患者的营养状况、肾功能和血糖水平,且效果优于传统营养治疗。

运动配合营养干预对青少年肥胖患者体质量指数及血糖血脂的影响分析

分析运动联合营养干预在青少年肥胖患者中的作用。方法 纳入100例青少年肥胖患者,2022年5月至2023年5月为潍坊医学院附属医院临床营养科及内分泌科收治,对所有患者进行运动配合营养干预,比较患者干预前后血糖指标、血脂指标和炎症因子水平,并分析患者体重和身体成分变化。结果 与干预前比较,患者干预后血糖、血脂(高密度脂蛋白胆固醇除外)、肿瘤坏死因子-α和超敏C反应蛋白、脂肪组织、体脂百分比、内脏脂肪面积下降,去脂体重、骨骼肌量和上臂肌围上升,对比有差异(P<0.05)。结论 予以青少年肥胖患者运动配合营养干预方案,可降低血糖血脂和炎症因子水平,也可控制体重,改善身体结构,利于维持健康状态。

老年2型糖尿病患者认知障碍与人体成分相关性的研究

目的探讨老年T2DM患者认知障碍(CI)与人体成分的相关性。方法选取2021年4月至2022年4月于潍坊医学院附属医院内分泌科住院治疗的255例老年T2DM患者。根据简易精神状态量表(MMSE)评分分为单纯T2DM组(T2DM,n=129)和T2DM合并CI组(CI,n=126)。比较两组一般资料及生化指标,分析CI与人体成分的相关性。结果CI组年龄、BMI、体脂百分比(PBF)、WHR、内脏脂肪面积(VFA)高于T2DM组,MMSE评分、受教育年限、去脂体重(FFM)低于T2DM组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,MMSE评分与FFM呈正相关(P<0.05),与BMI、PBF、WHR、VFA呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,年龄、BMI、WHR、FFM是老年T2DM患者CI的影响因素。结论老年T2DM患者CI与人体成分相关,BMI、WHR升高与FFM降低可增加CI风险。

不同营养状况对乳腺癌术后化疗患者副反应和治疗费用的影响

目的比较不同营养状态下乳腺癌患者副反应的发生率,探讨营养不良对患者治疗费用的影响。方法选取某三甲医院2021年6月至2022年5月肿瘤科及甲状腺乳腺外科乳腺癌术后化疗患者。采用患者总体主观评分法(Patient-generated Subjective Global Assessment,PG-SGA)将患者的营养状态分为营养良好(A)109例、可疑或中度营养不良(B)58例、重度营养不良(C)31例三组,记录患者的血生化指标和就诊营养科的次数及费用,观察患者恶心呕吐、便秘、骨髓抑制、感染的发生率,进行不同营养状态下的住院费用及贫血分析。结果营养良好、可疑或中度营养不良和重度营养不良三组骨髓抑制发生率分别为9.2%、32.8%和61.3%,骨髓抑制治疗费用平均为256.60、251.46和719.31元,单位评分治疗成本为95.63、108.72和152.43元,上述结果两两比较均具有统计学意义(P<0.01)。营养良好组、可疑或中度营养不良组和重度营养不良组的止吐平均费用分别为839.66、786.15和904.98元,三组的止吐费用差异没有统计学意义,但人均费用仍较高。乳腺肿瘤分期为II期中三组患者贫血率差异有统计学意义(P=0.025)。结论乳腺癌术后患者存在较高比例的营养异常,重度营养不良组的骨髓抑制治疗费用及单位治疗费用成本相比其他两组更高。

肾康注射液联合羟苯磺酸钙胶囊对PNS并发AKI患者肾功能、凝血功能及炎性因子的影响

目的:探讨肾康注射液联合羟苯磺酸钙胶囊对原发性肾病综合征(PNS)并发急性肾损伤(AKI)患者肾功能、凝血功能及炎性因子的影响。方法:选取2018年4月~2019年11月期间我院收治的134例PNS合并AKI患者,随机分为对照组(常规治疗基础上予以羟苯磺酸钙胶囊治疗)和联合组(对照组基础上予以肾康注射液治疗),各67例。治疗14 d后,对比两组患者疗效、肾功能指标[尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、白蛋白(Alb)]、凝血功能指标[凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)]及炎性因子[白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)],记录两组不良反应情况。结果:联合组治疗14d后的临床总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗14 d后,两组PT、APTT、TT、FIB、Scr、BUN、IL-6、TNF-α、CRP均较治疗前下降,且联合组低于对照组(P<0.05)。治疗14 d后,两组Alb升高,且联合组高于对照组(P<0.05)。对照组、联合组的不良反应总发生率对比未见统计学差异(P>0.05)。结论:相较于羟苯磺酸钙胶囊单药治疗,PNS合并AKI患者在羟苯磺酸钙胶囊的基础上联合肾康注射液治疗,可有效减轻肾功能损害,改善凝血功能,降低炎性因子水平,疗效明显,且未增加严重不良反应。

利用游戏化教学促进“微粒观”建构——以“原子的结构”第一课时为例

分析了初中化学微粒观的教学内容和"原子的结构"的相关教学设计,针对学生"微粒观"建构存在的难题,提出利用反馈机制,采用"寓教于乐"的游戏化教学设计,并进行实践效果访谈。不仅完成了本课时的教学目标,也让学生对化学的兴趣更加浓厚。

Slug真核表达载体构建及功能鉴定

目的在肿瘤发生和发展过程中,上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮来源恶性肿瘤细胞获得侵袭、转移能力的重要生物学过程,并且与乳腺癌干细胞的生物学特性密切相关。本研究通过构建Slug的慢病毒真核表达载体,探讨Slug基因与EMT之间的关系及对乳腺癌干细胞生物学特性的影响。方法以军事医学科学院(生物工程研究所)保存的乳腺cDNA文库为模板,通过PCR扩增出Slug的全长编码序列,将其克隆到经BamHⅠ和EcoRⅠ酶切的PCDH表达载体上,构建成PCDH-Slug真核表达载体,在人293T细胞中转入空载体和重组质粒,利用蛋白质印迹法检测PCDH载体介导的Slug的表达。后将包装质粒共转染293T细胞,包装病毒,感染ZR75-1细胞,经Puro(嘌呤霉素)筛选2周后,得到稳定表达Slug的ZR75-1细胞株,检测ZR75-1细胞对EMT的影响。并将稳定表达Slug的ZR75-1稳定细胞接种于的Matrigel基质胶,倒置显微镜观察ZR75-1稳定细胞株的成管特性。结果从乳腺文库中获得Slug的全长编码序列,经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切及DNA测序证实得到PCDH-Slug表达载体,PCDH-Slug真核表达载体和PCDH分别转染293T细胞后,经过蛋白质印迹法检测Slug在293T细胞内有显影,对照组明显减弱,表明Slug-PCDH载体携带的Slug编码序列能够在293T细胞中成功;通过增加puro的含量进行筛选,得到稳定表达的混合克隆即能表达Slug的ZR75-1细胞株,经蛋白质印迹法检测PCDH-Slug对E-cadherin的影响,以GAPDH为内参,结果比对照组的表达减弱,与预期相符,表明PCDH-Slug载体可以使细胞中E-cadherin的表达减弱;倒置显微镜下ZR75-1稳定细胞株成管明显,表明Slug可以通过调节EMT使乳腺癌细胞具有某些干性特征。结论调节Slug基因表达可以影响EMT相关蛋白的表达,并以此影响乳腺癌干细胞的生物学特性。

慢病毒介导的敲低E6AP表达抑制胃癌细胞增殖和迁移

目的构建稳定敲低E6AP表达的胃癌细胞BGC-823,并检测对胃癌细胞增殖和迁移等恶性生物学行为的影响。方法采用Western印迹方法检测E6AP在不同胃癌细胞系及胃正常黏膜上皮细胞系中的表达情况;将含有E6AP的慢病毒短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的干扰载体与慢病毒包装辅助质粒共转染人胚肾293T细胞后,收集病毒上清感染胃癌细胞BGC-823,经嘌罗霉素(puromycin)筛选后,获得慢病毒介导的E6AP shRNA的稳定表达细胞,用实时(real-time)PCR和Western印迹方法检测E6AP干扰效果;并利用细胞生长曲线实验、划痕愈合(wound healing)和Transwell实验检测E6AP shRNA对胃癌细胞增殖和迁移的影响。结果 E6AP在不同胃癌细胞系及胃正常黏膜上皮细胞系中均有表达;建立了稳定敲低E6AP的胃癌细胞BGC-823;E6AP shRNA可有效抑制胃癌细胞增殖和迁移。结论 E6AP的生物学功能在胃癌恶性转化过程中发挥重要作用。

营养干预对非小细胞肺癌患者化疗期间营养状况的影响

目的探索营养干预对非小细胞肺癌患者化疗期间营养状况的影响。方法选取2020年11月—2021年10月在医院肿瘤科及呼吸科就诊的首次进行化疗的108例肺癌患者为研究对象,随机分为口服营养补充组和对照组,口服营养补充组给予个体化营养教育和口服补充营养素,对照组给予常规治疗和饮食指导,评估营养干预对非小细胞肺癌患者的患者主观整体评分、部分生化指标和人体成分指标的影响。结果在4个化疗周期期间,患者主观整体评分呈不断上升趋势且从第2周期开始口服营养补充组评分均低于对照组,差异无统计学意义;化疗第2周期开始至第4周期结束,口服营养补充组白细胞、总淋巴细胞、血红蛋白、总蛋白、白蛋白均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);第2周期开始至第4周期结束口服营养补充组的体重、体质指数、蛋白质、骨骼肌含量、去脂体重均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论非小细胞肺癌患者在4个化疗周期营养状况明显下降,及时给予营养干预可以改善或维持身体成分的正常水平,提升综合治疗效果。

学前儿童分享行为培养策略研究

分享行为是最常见的亲社会行为之一,促进幼儿分享行为的发展,有助于幼儿更好地与人交往,有利于幼儿今后更好地融入社会,也能为幼儿今后的发展奠定坚实基础。分享行为作为亲社会行为中的一种,在个体的社会性发展中起着重要作用。