反复自然流产患者淋巴细胞主动免疫的治疗效果及其与HLA相关性研究

目的观察淋巴细胞主动免疫治疗反复自然流产的临床效果,分析封闭抗体转阳与夫妻双方人类白细胞分化抗原(HLA)相容性的关系。方法选取2013年10月至2016年10月在福建省妇幼保健院遗传与优生门诊就诊,临床诊断为封闭抗体缺乏所致的反复自然流产,从而接受丈夫淋巴细胞主动免疫治疗的患者73例,同时检测患者夫妻双方HLA相容性,随访并分析其妊娠结局。结果接受免疫治疗的73例患者中,49例封闭抗体转阳,转阳率为67.12%(49/73),49例封闭抗体转阳患者中成功妊娠45例,24例封闭抗体未转阳患者中成功妊娠6例,因此接受主动免疫治疗总体妊娠成功率为69.86%(51/73)。49例封闭抗体转阳的患者中47例夫妻双方HLA相容性低,24例封闭抗体未转阳的患者中21例夫妻双方HLA相容性高。结论淋巴细胞主动免疫治疗对反复自然流产有效,夫妻双方HLA相容性与封闭抗体转阳有相关性。

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎的基因研究进展

抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)相关性血管炎是一种系统性自身免疫性疾病,主要包括韦格纳肉芽肿、显微镜下多血管炎、变应性肉芽肿病等;靶抗原为丝氨酸蛋白酶3和髓过氧化物酶。近年来,随着全基因组测序技术、CRISP-Cas9等基因编辑技术的迅猛发展,ANCA相关性血管炎相关的基因相继被发现,特别是近年来胰岛素抵抗相关基因-能量平衡基因、脂联素基因等与血管性疾病关系的部分阐明为ANCA相关性血管炎的临床诊断、治疗提供了理论依据。目前发现的ANCA相关性血管炎相关基因主要有蛋白酶3、蛋白酪氨酸磷酸酶非受体22型、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4、α1-抗胰蛋白酶、CD226、Fcγ等,本文对这些基因目前的研究进展做一综述。

福建人群香港型地中海贫血的基因变异检测

目的分析福建省籍人群右向缺失型地中海贫血(-α^3.7)样本中香港型地中海贫血基因(Hong Kongαα,HKαα)检出率,探讨其临床意义。方法对10145份福建省籍人群地贫筛查阳性样本进行常规地贫基因诊断,应用单重PCR及巢式PCR技术对检测到的507例-α3.7/αα样本及2例电泳结果同时出现东南亚缺失型α-地中海贫血(--SEA)、-α^3.7及α2条带样本进行HKαα基因型检测。结果在507例-α3.7/αα样本中,共检出25例HKαα/αα,5例HKαα/-α^3.7,4例HKαα/αα合并CD41/42(HBB:c.126_129delCTTT)杂合变异,1例HKαα/αα合并IVS-Ⅱ-654(HBB:c.316_197C>T)杂合变异,另检出1例-α^3.7/anti4.2,2例电泳结果同时出现--SEA、-α^3.7及α2条带样本均为HKαα/--SEA,HKαα基因型在福建省籍人群中检出率为0.36%,在-α^3.7阳性样本中检出率为7.27%。结论在福建人群中检出一定比例的HKαα基因型,为临床提供更准确的地贫基因诊断结果及遗传咨询。

X-性连锁鱼鳞病两家系基因检测及产前诊断

目的对2个X-I生连锁鱼鳞病（X-linked ichthyosis，XLI）家系进行基因检测及胎儿产前诊断。方法应用染色体核型分析、细菌人工染色体标记一磁珠鉴别／分离技术（bacterial artificial chromosomes-on-Beads^TM，BoBS）、荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技术和微阵列单核苷酸多态性芯片（singlenucleotidepolymorphismarray，SNP—array）技术，对未知鱼鳞病家族史的家系1和已知鱼鳞病家族史的家系2的羊水及外周血标本进行基因检测及胎儿产前分子诊断，并收集相关临床资料。结果（1）家系1：产前BoBs方法检测到家系1胎儿（Ⅳ-12）XCl探针为0．36-0．50，提示存在微缺失。孕妇（Ⅲ-13）SNParray检测结果显示Xp22．31区域存在1．68Mb拷贝数缺失，丢失4个在线人类孟德尔遗传数据库（Online Mendelian Inheritancein Man，OMIM）基因（分别为HDHDl、STS、VCX和PNPLA4）。胎儿SNP-array结果为arr[hgl9]Xp22．31（6455151-8l35644）×0，提示缺失遗传自母亲。FISH分析的结果证实胎儿STS基因缺失，核型结果为46，XY。孕妇表妹（Ⅲ-21）及表外甥（1V-14）同样存在STS基因缺失，缺失大小与孕妇及胎儿一致。结果Ⅳ-12足月剖宫产出生，出生时皮肤未见异常，生后1周腹部出现白色鳞屑广泛附着，天气干燥时症状加重。对该例婴儿随访至8月龄，未发现其他临床症状。（2）家系2：SNParray结果显示，孕妇（Ⅲ-21）、先证者（Ⅳ-16）及胎儿（IV17）在Xp22．31区域存在1．2Mb拷贝数缺失，丢失4个OMIM基因（分别为HDHDl、STS、VCX和PNPLA4）。FISH结果验证家系2胎儿STS基因缺失。胎儿核型结果为46，XY。结果Ⅳ-17足月剖宫产出生，出生时皮肤未见异常；至10日龄时，腹部出现白色鳞屑广泛附着。对该例婴儿随访至4个月，未发现其他临床症状。结论联合运用BoBs、FISH和SNP-array等分子遗传学技术有助于XLI的诊断及遗传咨询。

五例Wolf-Hirschhorn综合征的产前诊断

目的研究产前Wolf-Hirschhorn综合征(Wolf-Hirschhorn syndrome,WHS)胎儿的临床特点,探讨其产前超声特征与诊断方法,为产前遗传咨询提供依据。方法回顾性分析2016年3月至2020年2月确诊的5例WHS胎儿,分析胎儿的染色体核型分析和染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA)结果。结果染色体核型分析检出4例WHS,CMA检出5例。产前超声提示异常4例,其中3例存在胎儿宫内生长受限,仅1例存在颌面部异常。胎儿缺失片段从小到大依次为4p16.3p16.1缺失6.5Mb,4p16.3p15.32缺失15.6 Mb合并2p25.3重复906 kb,4p16.3p15.31缺失20.4 Mb,4p16.3p15.1缺失35 Mb和4p16.3p14缺失37 Mb。结论胎儿生长受限可能是WHS早期表现之一,颌面部超声未见异常不能排除WHS可能。单纯核型分析检测WHS存在漏诊情况,结合CMA技术可以提高诊断的准确性。

福建地区Hb Q-Thailand的血液学表型和基因型分析

目的通过对福建地区地中海贫血筛查中发现的异常血红蛋白Q-Thailand的研究,明确其血液学表型和基因型特征。方法采集来自福建省妇幼保健院门诊的患者外周血标本,通过血红蛋白毛细管电泳/高效液相色谱法和血液学参数分析收集疑似Hb Q-Thailand携带者,应用跨越断裂点聚合酶链反应,反向点杂交聚合酶链反应(polymerse chain reaction-reverse dot blot, PCR-RDB)和DNA测序的方法确诊疑似患者。结果在35例疑似Hb Q-Thailand患者中,共确诊20例Hb Q-Thailand携带者,其中有1例合并βCD41-42杂合突变,1例合并血红蛋白New York(Hb New York)。结论分析福建地区Hb Q-Thailand的血液学表型和基因型特征可为临床遗传咨询提供依据。

22750例福建地区β地中海贫血基因检测结果及频率分析

目的探讨福建地区β地中海贫血(β-地贫)的基因检测结果及分析其基因频率。方法采用反向斑点杂交法(RDB)检测常见的17种β基因点突变,以RDB法检测常见的3种α基因点突变、跨越断裂位点-PCR(Gap-PCR)法检测3种α基因缺失;以多重连接探针扩增技术(MLPA)法检测可疑缺失型β-地贫,以Gap-PCR方法确诊;以DNA测序方法检测可疑罕见突变型β-地贫。结果确诊为常见β-地贫有3 515例,检出率15.45%,共检出了15种常见的基因型。在福建地区β-地贫最常见的基因型为βIVS-2-654(C→T)/βN(41.76%)、βCD41-42(-TCTT)/βN(30.50%)、βCD17(A→T)/βN(12.46%),β-28(A→G)/βN(5.46%)、βCD27-28(+C)/βN(2.93%)和βCD26(G→A)/βN(1.82%)占了94.93%。缺失型β-地贫检出13例,包括6例东南亚型(SEA-HPFH)、6例中国型(中国型Gγ(Aγδβ)0)、1例1.35kb缺失型(NG-000007.3:g.69997-71353 del 1357);罕见β-突变检出13例,包括异常血红蛋白Hb J-Bankok 8例,异常血红蛋白Hb New York 5例。结论福建地区作为地贫高发地区,除检测常见的β-地贫基因检测外,必要时应检测缺失型β-地贫及罕见的β地贫,以明确本地区的β-地贫基因检测结果及其频率,以利于指导遗传咨询,有效减少中、重型β-地贫患儿的出生。

五例7q11.23微缺失/微重复胎儿的产前诊断

目的探讨7q11.23拷贝数变异(copy number variants,CNVs)胎儿的产前超声表现和诊断方法。方法对2016年1月至2020年6月在我院产前诊断中心接受介入性产前诊断,且经单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphism array,SNP芯片)检测诊断为7q11.23微缺失/微重复者的产前诊断指征、胎儿超声检查情况、染色体核型、变异溯源、妊娠结局、出生后的生长发育情况等进行分析和文献回顾。结果5例胎儿存在7q11.23 CNVs,包括3例7q11.23微缺失和2例7q11.23微重复。产前超声指标异常4例,未发现异常1例。所有病例的染色体核型分析均未发现异常。3例7q11.23微缺失中,2例为新发变异,1例未做溯源;2例7q11.23微重复中,1例为新发变异,另1例遗传自表型正常的父亲。3例7q11.23微缺失和1例新发的7q11.23微重复胎儿被终止妊娠。1例携带父源7q11.23微重复的胎儿足月分娩,随访8个月未见异常。结论7q11.23微缺失/微重复的临床表型具有异质性,SNP芯片可准确检测7q11.23 CNVs,为其产前诊断和遗传咨询提供依据。