胃肠道透明细胞肉瘤样肿瘤/恶性胃肠道神经外胚层肿瘤2例临床病理学特征

目的探讨胃肠道透明细胞肉瘤样肿瘤/恶性胃肠道神经外胚层肿瘤(clear cell sarcoma-like tumor of the gastrointestinal tract,CCSLTGT/malignant gastrointestinal neuroectodermal tumor,MGNET)的临床病理学特征。[HTH]方法收集2例CCSLTGT/MGNET的临床资料,采用HE、免疫组化、FISH及二代测序法进行检测,并复习相关文献。[HTH]结果临床表现为腹痛(2/2)、腹部肿块(2/2)、血便(2/2),发热(1/2),肿瘤细胞呈实性、片状排列,部分区域呈菊形团样结构,细胞卵圆形、短梭形或上皮样,胞质嗜酸性或透明样,核分裂象8~10个/10 HPF,可见散在分布的破骨样多核巨细胞,未见肿瘤性坏死。免疫表型:肿瘤细胞表达SOX10(2/2)、S-100(2/2)、Syn(1/2)、CD56(2/2)和CD99(1/2),Ki67增殖指数为30%~70%。FISH检测均显示EWSR1基因重排(2/2)。1例二代测序检测到EWSR1-CREB1基因融合和FANCL基因Exon10-11缺失突变。[HTH]结论CCSLTGT/MGNET属于非常罕见的恶性间叶源性肿瘤,具有独特的形态学、免疫表型和分子遗传学特征,需与其他胃肠道恶性肿瘤鉴别。

四种技术平台检测甲状腺癌NTRK融合变异的比较

目的探讨免疫组化、DNA-based NGS、FISH和qRT-PCR四种技术平台检测甲状腺癌NTRK融合变异的一致性。方法对40例临床组织样本(其中31例为甲状腺癌样本)同时行FISH、免疫组化、DNA-based NGS和qRT-PCR法检测NTRK融合基因。结果四种技术平台均检测的31例甲状腺癌样本中,与FISH技术相比,免疫组化的敏感性、特异性、阳性预测值(positive predictive value,PPV)、阴性预测值(negative predictive value,NPV)和总符合率(total coincidence rate,TCR)分别为100%(9/9)、90.9%(20/22)、81.8%(9/11)、100%(20/20)、93.5%(29/31),其PPV较差;DNA-based NGS的敏感性、特异性、PPV、NPV和TCR分别为44.4%(4/9)、100%(22/22)、100%(4/4)、81.5%(22/27)、83.9%(26/31),其敏感性较差;qRT-PCR和FISH技术检测的一致性为100%(31/31)。与FISH技术相比,免疫组化、DNA-based NGS和qRT-PCR的Kappa值分别为0.853、0.532和1.000。在40例临床组织样本中,39例与FISH结果一致,仅1例(脂肪纤维瘤病样神经肿瘤)因检测范围未覆盖NTRK的少见融合类型(LMNA:exon4-NTRK1:exon10)qRT-PCR法未检出,基于RNA检测融合的qRT-PCR与FISH技术的符合率最高。结论基于RNA的qRT-PCR技术具有敏感性高、特异性高,操作便捷、判读简易的特性,可能是适用于病理科常规临床检测甲状腺癌NTRK融合变异的优选方案。

介绍一种简单易行的石蜡包埋组织富集肿瘤细胞方法

目前常用的分子病理方法主要有实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR)、直接测序法、二代测序(Next-generation sequencing,NGS)等,标本的质量会显著影响这些方法检测结果的准确性,不但要求足够肿瘤细胞数量还要一定的肿瘤细胞比例,对于肿瘤细胞比例低的不达标的标本需要进行肿瘤细胞的富集。

乳腺癌HER2状态、临床病理特征及预后分析

目的探讨乳腺癌患者的HER2状态、临床病理特征及预后之间的关系。方法选取福州大学附属省立医院629例同时做过HER2 IHC及FISH检测的浸润性乳腺癌手术病例,应用2019版乳腺癌HER2检测指南分析HER2状态、临床病理特征及预后。结果IHC结果:0~1+、2+、3+分别占53.10%、22.26%、24.64%;FISH结果:阴性和阳性病例分别占66.77%和33.23%。导管癌、小叶癌及特殊类型肿瘤之间FISH检测结果差异具有统计学意义(P=0.001),而IHC检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。不同性别、发病年龄、肿瘤最大径、组织学分级、淋巴结转移与否两种方法检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。针对女性病例,IHC与FISH两种检测方法比较差异具有统计学意义(P<0.001);明确阴性跟阳性病例中,一致性检验,Kappa=0.925,P=0.000;相关性分析,r=0.696,P=0.000。随访病例生存曲线可见赫赛汀治疗组DFS高于非治疗组,IHC阴性FISH阳性病例组有无赫赛汀治疗患者差异具有统计学意义(P<0.05);一致病例与不一致病例DFS比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论基于2019版乳腺癌HER2检测指南,FISH检测结果与肿瘤类型有关;IHC与FISH检测结果具有很好的一致性,二者结果呈正相关;FISH法的检出率高于IHC法,条件允许时,建议做FISH检测确认;结果不一致时,FISH结果对临床制定治疗决策可能更具指导意义。

伴有极向反转的乳头状肾肿瘤临床病理特征及文献复习

伴有极向反转的乳头状肾肿瘤(papillary renal neoplasm with reverse polarity,PRNRP)是近年新定义的肿瘤,较为罕见,且形态特殊,易误诊。本研究回顾性分析5例PRNRP的临床病理特点,并复习相关文献,以提高对该肿瘤的认识。1材料与方法1.1材料收集2010-01—2021-12福建医科大学省立临床医学院/福建省立医院病理科确诊的乳头状肾肿瘤病例共107例.

非小细胞肺癌驱动基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中驱动基因突变并分析其与临床病理特征的关系。方法选取病理资料完整的550例原发性NSCLC作为研究对象,采用蝎形探针扩增阻滞突变系统(scorpion ARMS)荧光定量PCR法对184例NSCLC进行9种驱动基因检测,对另外366例NSCLC患者采用Illumina测序法进行10种驱动基因检测,并回顾性分析患者的临床病理特征。结果550例NSCLC中有405例检测到基因突变(73.6%),分别为EGFR(57.3%)、KRAS(5.8%)、PIK3CA(2.2%)、ALK(3.8%)、RET(2.0%)、ROS1(1.1%)、NRAS(0.2%)、BRAF(1.5%)、HER-2(2.0%)和MET(0.3%),检出驱动基因联合突变12例(2.2%),EGFR双位点突变8例(1.5%)。在NSCLC中,腺癌、女性、无吸烟史、周围型和以腺泡型为主的腺癌患者更易发生驱动基因突变(P<0.05)。EGFR基因突变人群特征为女性、无吸烟史、腺癌、周围型,多发于以腺泡型为主型的腺癌中,少见于以实体型和黏液型的腺癌患者中(P<0.05)。KRAS基因突变率在男性、有吸烟史和以浸润性黏液型为主的腺癌中更高,不易发生在贴壁型腺癌中(P<0.05)。PIK3CA基因突变在男性中发病率较高(P<0.05)。ALK基因突变率在以实体型为主的腺癌和伴有淋巴结转移的患者中更高且不易发生在贴壁型腺癌中(P<0.05)。RET基因在以实体型为主的腺癌中突变率较高(P<0.05)。EGFR双位点突变多发于有淋巴结转移和以乳头型为主的肺腺癌中(P<0.05)。结论NSCLC中EGFR、KRAS、ALK基因存在较高的突变率,其他驱动基因改变以及联合突变的突变率虽低,但意义重大不容忽视,其中EGFR合并PIK3CA突变提示患者有较高的临床分期。多基因联合检测在临床上对加快筛选有效治疗目标人群具有重要意义。

MicroRNA靶基因的高通量鉴定方法

MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小RNA,可在转录后水平调节基因的表达,在细胞生长、发育、疾病发生等过程中发挥着重要作用.明确miRNAs所调控的靶基因对阐明miRNAs的功能及在各种生命过程和疾病发生机制的角色非常关键.目前,鉴定miRNAs的靶基因的方法主要计算机预测方法和生物学实验方法.前者对miRNA靶基因的寻找作出巨大贡献,但常存在很多假阳性,必须通过生物学实验方法加以验证.后者涉及单靶基因鉴定技术和高通量多靶基因鉴定技术,高通量技术又包括基因芯片分析技术、蛋白质组学分析技术、RNA连接酶介导的cDNA末端扩增技术和生物化学法等.本文主要对这些高通量技术的应用、优劣进行归纳,并对其改进方向予以讨论.

自噬相关基因Beclin1和LC3在卵巢浆液性癌中的表达及临床意义

目的检测Beclin1和LC3在卵巢浆液性癌(ovarian serous carcinoma,OSC)中的表达,探讨两者与OSC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化Max Vision两步法检测63例OSC和20卵巢浆液性囊腺瘤组织中Beclin1和LC3蛋白的表达,分析两者与OSC临床病理特征及预后的关系。应用RT-PCR和Western blot法检测10例新鲜OSC组织和相应癌旁组织中Beclin1和LC3 mRNA和蛋白的表达。结果在OSC组织中Beclin1和LC3蛋白阳性率(36.51%、33.33%)均低于卵巢浆液性囊腺瘤组织(65.00%、60.00%),差异有统计学意义(P=0.025,P=0.034)。Beclin1蛋白表达与临床FIGO分期和病理分级有关(P=0.001,P=0.001),与患者年龄、发病部位、肿瘤大小及有无盆腔淋巴结转移无关(P>0.05)。LC3蛋白表达与临床FIGO分期和盆腔淋巴结转移有关(P=0.013,P=0.041),与患者年龄、发病部位、肿瘤大小和病理分级均无关(P>0.05)。Beclin1和LC3在OSC中的表达呈显著正相关(r_s=0.373,P=0.03)。10例新鲜OSC组织中Beclin1和LC3 mRNA的相对表达量(0.581±0.091、0.650±0.090)低于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义(t=8.083,t=6.614;P=0.016,P=0.022)。新鲜OSC组织中Beclin1和LC3蛋白的相对表达量明显低于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,Beclin1和LC3表达与OSC患者预后相关(P=0.028 3,P=0.018 5)。结论自噬相关基因Beclin1和LC3在OSC组织中的表达下降,导致自噬功能减弱,可能与OSC的发生、发展和预后不良相关。

非典型性脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤MDM2蛋白表达和基因扩增检测及临床意义

目的探讨非典型性脂肪瘤性肿瘤/高分化脂肪肉瘤(atypical lipomatous tumour/well-differentiated liposarcoma,ALT/WDL)中MDM2蛋白表达和基因扩增,分析MDM2蛋白表达和基因扩增在ALT/WDL中的意义。方法采用免疫组化Eli Vision两步法及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测58例ALT/WDL中MDM2蛋白表达及基因扩增状态。结果免疫组化检测显示58例ALT/WDL中MDM2蛋白阳性率为79.3%;FISH法检测MDM2基因扩增率为96.5%。免疫组化和FISH检测结果阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MDM2蛋白表达和MDM2基因扩增为ALT/WDL的诊断提供依据;由于免疫组化检测阳性率接近80%,故在多数没有FISH条件的单位予以开展免疫组化MDM2蛋白检测,可以帮助诊断大多数ALT/WDL病例。

qPCR检测结核杆菌在肺和胸膜上皮样肉芽肿性疾病诊断中的意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,q PCR)法在诊断及鉴别诊断肺和胸膜结核病和其他肉芽肿性疾病中的意义。方法收集经病理学检查发现上皮样肉芽肿性病变的肺和胸膜活检的石蜡包埋组织142例,应用q PCR法检测结核分枝杆菌DNA,同时行抗酸染色,并与临床资料对比进行回顾性分析。结果在142例肺胸膜活检标本中,60例临床诊断确诊为结核病。采用q PCR法检测结核分枝杆菌DNA阳性者58例,敏感性为96.67%,特异性为100%;抗酸染色阳性者17例,敏感性为28.33%,特异性为97.56%,差异有统计学意义(χ~2=21.47,P<0.001)。结论结核分枝杆菌核酸检测有助于在石蜡包埋的肺和胸膜小活检组织中快速、准确的诊断结核病,可用于疑似结核的肉芽肿性病变的鉴别诊断。

采用Illumina测序技术检测非小细胞肺癌驱动基因关键位点突变

肺癌尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)是许多国家常见且病死率位于首位的恶性肿瘤[1]。目前认为NSCLC是由一系列驱动基因突变形成的恶性肿瘤,包括EGFR、ALK、KRAS、NRAS、BRAF、HER-2、ROS1、RET、MET和PIK3CA等基因。现阶段手术、化疗、放疗等治疗手段效果均不理想[2],针对以上10个基因突变的分子靶向治疗的出现给患者带来了新曙光,但前提是必须有精确的分子学信息,这就要求有合适的分子检测方法。Illumina测序技术已应用于多种常见肿瘤基因的检测,如乳腺癌、胰腺癌等。本文现介绍采用Illumina测序技术在检测和分析NSCLC以上10个驱动基因关键位点突变的应用。

DOG1抗体新克隆MX067在胃肠间质瘤病理诊断应用中的初步评价

目的对DOG1抗体新克隆MX067在胃肠间质瘤(GIST)病理诊断应用进行初步评价。方法收集71例GIST组织和79例非GIST肿瘤组织(乳腺癌、胃癌、神经鞘瘤和结肠癌等),制成组织芯片分别进行DOG1鼠单抗MX067、K9及兔单抗SP31免疫组化染色及分析对比。结果 DOG1 MX067、K9和SP31抗体在GIST中的阳性检出率分别为90. 14%(64/71)、88. 73%(63/71)及88. 73%(63/71),DOG1 MX067抗体在GIST中的阳性检出率与K9、SP31抗体无显著性差异(P>0. 05)。DOG1 SP31在神经鞘瘤组织中出现8. 82%(3/34)的阳性反应,而DOG1MX067和DOG1 K9为阴性。DOG1 MX067抗体检测诊断GIST的敏感性高于DOG1 K9、SP31,DOG1 MX067特异性等于K9,高于DOG1 SP31,DOG1 MX067 ROC曲线下面积0. 926大于DOG1K9、SP31。结论克隆号为MX067的DOG1抗体特异性强,敏感性高,对于GIST的诊断有较高的临床应用价值,建议推广和应用于GIST的病理诊断。

幽门螺旋杆菌感染与胃癌Ki-67表达、Her-2基因状态及临床病理特征的关系

目的探讨幽门螺旋杆菌(H.pylori,Hp)感染与胃癌Ki-67表达水平、Her-2基因状态及临床病理特征的关系。方法收集113例2014年6月至2018年6月于福建省立医院术后诊断为胃癌的标本,分别采用硼酸亚甲蓝染色法检测Hp,免疫组化Elivision法检测Ki-67蛋白表达,荧光原位杂交法(FISH)检测Her-2基因状态,并对其临床病理特征进行分析。结果Hp感染80例(70.8%),Ki-67蛋白阴性表达3例(2.7%),弱阳性4例(3.5%),中度阳性51例(45.1%),强阳性55例(48.7%),Hp感染与Ki-67蛋白表达无关(P=0.346);Her-2基因扩增48例(42.5%),胃癌Hp感染与Her-2基因扩增有关(P=0.000);在临床病理特征方面,检测出胃上段癌Hp感染32例,下段癌48例,肿瘤不同发生部位Hp阳性率差异有统计学意义(P=0.046)。结论Hp感染可促进胃癌Her-2基因扩增,Her-2基因的活化可能是导致胃癌发病的机制之一。Hp感染与胃癌发生的部位有关,胃下段癌Hp阳性比例较高,及时完全根除HP可能对预防胃下段癌更有临床价值,这对诊断及判断胃癌预后也有重要的提示作用。

甲状腺乳头状癌MC蛋白表达和BRAF(V600E)突变检测分析

目的通过甲状腺乳头状癌间皮表面微绒毛抗原(MC蛋白)表达和BRAF(V600E)基因突变的分析,探讨MC蛋白表达和BRAF(V600E)突变在甲状腺乳头状癌中的意义。方法对452例甲状腺乳头状癌,采用免疫组织化学技术检测MC表达情况,荧光PCR检测BRAF基因突变,并进行比较分析。结果免疫组织化学染色显示MC阳性率91.8%,荧光PCR检测BRAF基因突变率为85.0%,免疫组织化学染色和荧光PCR两法检测结果阳性率的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MC蛋白的表达和BRAF(V600E)的突变为甲状腺乳头状癌的诊断提供依据,联合MC蛋白表达和BRAF(V600E)突变检测可提高甲状腺乳头状癌诊断的阳性率。

MMR蛋白免疫组化和微卫星不稳定性检测在Lynch综合征筛查中的研究

目的观察符合临床诊断标准的Lynch综合征患者MMR蛋白缺失和微卫星不稳定性(MSI)的情况,探讨免疫组化和MSI检测在筛选Lynch综合征中的临床指导意义。方法选取经过临床病史和病理诊断证实符合Amsterdam标准和Bethesda指南的结直肠癌26例为研究组,另取15例散发性结直肠癌为对照组,免疫组化方法检测4种MMR蛋白(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)表达情况,同时行多重荧光PCR-毛细管电泳技术进行MSI检测。结果 MMR蛋白在研究组中表达缺失率为88.5%(23/26);15例散发性结直肠癌中未发现MMR蛋白缺失;MSI在研究组中检测到MSI-H 24例,MSS 2例,15例散发性结直肠癌中检测到MSI-H 1例,MSI-L 3例,MSS 11例。结论应用免疫组化和MSI检测都可以筛查Lynch综合征。免疫组化检测筛查敏感性和特异性较强,并且能有效的检测出突变蛋白的类型,使用方法简便、经济、快捷并且相对稳定,可以广泛应用于临床。

结直肠癌KRAS突变与临床病理特征的关系

目的检测结直肠患者KRAS的突变情况,分析KRAS突变与临床病理特征的关系。方法应用蝎形探针扩增阻滞突变系统(ARMS)荧光定量PCR技术,检测结直肠癌患者KRAS第12和13位密码子的突变情况并分析其与临床病理特征的关系。结果 1 207例结直肠癌KRAS突变率为42.92%(518/1 207)。第12号密码子6种突变类型,其中G12D突变率16.32%(197/1 207);G12V突变率10.36%(125/1 207);G12C突变率3.31%(40/1 207);G12S突变率2.40%(29/1 207);G12A突变率1.74%(21/1 207);G12R突变率0.58%(7/1 207)。第13号密码子G13D突变率为9.69%(117/1 207)。还检测出8种同时存在两种突变类型及一种同时存在3种突变类型。女性患者KRAS突变率(46.21%)高于男性(40.46%,P<0.05)。KRAS在右半结肠突变率(46.45%)和直肠突变率(44.50%)均高于左半结肠(37.50%,P<0.05)。结论结直肠癌KRAS突变有多种类型,并且多种突变类型可同时存在。女性患者突变率高于男性患者,右半结肠和直肠突变率均高于左半结肠。

胃肠道间质瘤靶向药物治疗相关基因突变临床分析

目的探讨靶向药物治疗相关基因(C-KIT和PDGFRA)在治疗胃肠道间质瘤中的作用.方法收集福建省立医院确诊的胃肠道间质瘤240例,采用Sanger测序法检测基因突变情况(C-KIT基因9、11、13、17、18号外显子,PDGFRA基因12、18号外显子),分析其与临床特征的关系.结果1)C-KIT基因突变率为79.2%,其11、9及13号外显子的突变率分别为80.5%、10%、4.2%,11号外显子以缺失突变及点突变多见.2)PDGFRA基因突变率为6.7%,其18号外显子突变率93.75%,D842V点突变多见.3)C-KIT基因11号外显子突变在胃部发生率高,以中高危级别多见,组织学以梭形细胞型多见.PDGFRA基因18号外显子突变在胃部发生率高,以极低危、低危级别多见,组织学以上皮细胞型为主.结论胃肠道间质瘤患者发生C-KIT/PDGFRA基因突变的频率很高,突变位点及形式多样,建议临床治疗前进行C-KIT/PDGFRA基因联合检测,为靶向药物治疗提供依据.

不同免疫检验在抗HIV检测中的结果对比

目的研究不同免疫检验在抗HIV检测中的结果。方法将我院2015年10月至2018年4月确诊为艾滋病的患者50例随机分为两组各25例,对患者的血清标本进行检测,其中对照组采用金免疫层析试验,研究组采用ELISA法检测,对比两组患者的检测准确率、敏感度及特异性。结果研究组的检测准确率96.00%,明显高于对照组68.00%(P <0.05)。研究组的特异性与敏感度分别为100.00%、 100.00%,明显高于对照组的18.18%、 21.43%(P <0.05)。结论在临床疑似艾滋病血清HIV检测中,ELISA法的临床检测准确率、特异性、敏感度较高,且操作较为简单,值得临床进一步应用。

心肌酶谱、高敏肌钙蛋白在小儿手足口并发心肌炎的诊断

目的探讨心肌酶谱、高敏肌钙蛋白(hs-cTnl)在小儿手足口并发心肌炎的诊断意义。方法将我院2016年1月～2018年6月收治的124例小儿手足口病作为研究对象,其中62例为并发心肌炎患儿,62例为未并发心肌炎患儿。对患者均进行心肌酶谱、高敏肌钙蛋白检测。比较两组患儿心肌酶谱、高敏肌钙蛋白水平间的差异与异常率。结果手足口病并发心肌炎组患者hs-cTnl[(426.9±32.6)pg/mL]、CK[(321.5±32.9)U/L]、AST[(65.2±7.3)U/L]、LDH[(187.3±43.8)U/L]水平显著高于手足口病未并发心肌炎hs-c Tnl[(89.6±23.8)pg/m L]、CK[(123.7±15.0)U/L]、AST[(21.6±3.9)U/L]、LDH[(90.6±21.9)U/L],比较差异有统计学意义(P <0.05);手足口病并发心肌炎组在hs-cTnl(67.74%)、CK(62.90%)、AST(64.52%)、LDH(66.13%)异常率上均比手足口病未并发心肌炎组高(P <0.05)。结论心肌酶谱、高敏肌钙蛋白在小儿手足口并发心肌炎具有较高的诊断价值,有利于指导疾病诊断及治疗,值得临床选择。

肝功与血清学指标水平检验在脂肪肝诊断中的应用

目的:针对肝功与血清学指标水平检验在脂肪肝诊断中的应用进行研究和分析。方法:选取入某院进行身体检查的患者70例,根据是否患有脂肪肝均等分为试验组和对照组,其中试验组的患者为脂肪肝患者,而对照组的患者则是为身体健康的患者。比较两组患者肝功与血清学指标水平的检测。结果:经过检查,可通过结果判断是否患有疾病,其中试验组患者谷丙转氨酶及谷草转氨酶的值都明显高于对照组;试验组患者总胆固醇及甘油三脂的值明显高于对照组,在统计学上有意义(P<0.05)。结论:在检测中脂肪肝患者较健康患者肝功与血清学水平高,根据其检测结果可以清晰明了的判断是否患有脂肪肝,方法简单,结果准确,安全性高,值得在临床上普及。