硅酸钙类盖髓剂生物学性能的研究进展

随着牙髓生物学和生物材料学研究的进步,微创诊疗理念的普及,活髓保存治疗已成为牙髓病学的研究热点之一。盖髓剂的生物学性能是决定活髓保存治疗效果的关键因素,硅酸钙类水门汀是一类具有良好的理化性能和生物相容性的新型盖髓剂,能诱导牙髓组织中具有分化潜能的细胞分化为成牙本质样细胞,促进修复性牙本质的形成,已广泛应用于活髓保存治疗,取得了良好的治疗效果。但其种类相对较多,且有大量相关基础和临床应用研究报道,因此本文将对目前常用的硅酸钙类盖髓剂的生物学性能进行综述,以期为临床合理应用提供参考。

粪肠球菌脂磷壁酸对巨噬细胞自噬的影响

目的通过研究粪肠球菌脂磷壁酸(LTA)对巨噬细胞自噬功能的影响,为后续进一步深入探讨顽固性根尖周炎的发病机制提供实验依据。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW 264.7,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测LTA的细胞毒性作用;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LTA作用下巨噬细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值、Beclin1的表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测自噬相关基因LC3、Beclin1 m RNA表达水平的变化;构建稳定表达自噬双荧光慢病毒载体HBLVm RFP-GFP-LC3-PURO的巨噬细胞系,激光共聚焦显微镜观察自噬情况;SPSS 20.0统计软件进行数据分析。结果 CCK-8结果表明,选用20μg/m L LTA及其以下浓度处理巨噬细胞24 h均未见明显毒性作用(t=2.102,P=0.1106);Western blot结果表明,LTA刺激巨噬细胞后:LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值表达量(0.42±0.04)与对照组(0.04±0.02)相比显著提高,差异有统计学意义(F=14.25,P<0.001),Beclin1蛋白表达量(0.56±0.11)与对照组(0.28±0.08)相比呈上升趋势(F=3.459,P=0.0258),均存在剂量依赖效应;实时荧光定量PCR结果表明,LTA刺激巨噬细胞后,LC3基因表达水平(5.94±0.85)与对照组(1.03±0.28)相比显著提高(F=12.93,P<0.001);Beclin1基因表达水平(2.22±0.21)与对照组(1.02±0.28)相比呈上升趋势(F=6.036,P<0.001),存在剂量依赖效应;成功构建稳定表达HBLV-m RFP-GFP-LC3-PURO的巨噬细胞系,激光共聚焦显微镜下观察显示,LTA作用组自噬体形成量(58±6)与对照组(18±8)相比差异有统计学意义(F=12.36,P=0.0021)。结论粪肠球菌LTA可诱导巨噬细胞产生自噬,且存在剂量依赖效应。