苜蓿皂苷研究进展

苜蓿是当今世界分布最广泛的栽培牧草,其富含皂苷、叶蛋白、多糖和类黄酮等多种生物活性成分,在生物制药及畜牧业生产中有着广泛的应用,具有重要的研究价值。其中皂苷是苜蓿中重要的生物及药理活性物质,也是苜蓿的主要次生代谢产物之一,具有抑菌、抗氧化、降低胆固醇以及调节脂类代谢等多种功能。介绍了不同地区不同苜蓿品种植株在各部位和不同生长期皂苷含量的变化情况及现阶段苜蓿皂苷的主要提取技术,并对其生物学功能和应用的研究进展作了综述,为苜蓿皂苷的进一步研究、开发和利用提供参考。

超声波辅助农杆菌介导SeNHX1基因转化紫花苜蓿的研究

为建立高效快速的紫花苜蓿遗传转化体系,以紫花苜蓿6个栽培品种为材料,采用超声波辅助农杆菌介导法,对影响紫花苜蓿遗传转化体系的若干因素进行了研究。结果显示,6个栽培品种对卡那霉素敏感性不同,维多利亚为40 mg/L,而其他5个品种为50 mg/L;通过梯度实验表明：根癌农杆菌侵染浓度OD600为0.4-0.5,侵染时间为10-15 min,超声波处理时间为10 min是实现紫花苜蓿子叶转化及抗性愈伤组织形成较为有利的组合。卡那霉素抗性愈伤组织DNA的PCR扩增显示,转化体和质粒DNA分别扩增出长度大约为546bp的清晰条带,初步表明耐盐SeNHX1基因已整合至紫花苜蓿愈伤组织中。

玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及其表达载体构建

为了克隆磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)的编码基因以用于表达载体的构建,本研究根据已公开的序列信息设计特异性引物,以玉米自交系ZD410的叶片DNA为模板,通过PCR技术成功克隆了pepc基因的全长序列。生物信息学分析发现,该基因完整ORF长度为2 913 bp,编码蛋白质分子质量约为108.179 ku,等电点(PI)为5.73;对其氨基酸序列进行同源性检索分析显示,该蛋白质与其他C4植物的PEPC蛋白具有极高的同源性;利用Gateway技术构建含pepc目的基因的表达载体,并通过农杆菌介导的花序浸染法将该基因导入野生型拟南芥。