鼠抗人ANKRD13C单克隆抗体的制备与鉴定

为制备针对锚蛋白重复结构域蛋白13C(ankyrin repeat domain-containing protein 13C,ANKRD13C)的单克隆抗体,利用PCR扩增人源ANKRD13C基因,并与原核表达载体pET-32a(+)和pGEX-6P-1连接构建重组质粒,通过诱导表达纯化ANKRD13C重组蛋白、免疫小鼠、PEG法融合细胞和单克隆化,获得9株分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,包括7株IgG1类抗体和2株IgM类抗体。经免疫印迹法鉴定,其中1株IgG1类抗体8E3能特异性识别细胞内源性表达的ANKRD13C,将该杂交瘤细胞注射入小鼠腹腔内生产腹水,纯化后经ELISA检测其效价为1:2.51×10^(5),亲和常数达(9.78±0.55)×10^(9) L·mol^(-1)。这一研究表明,该抗体可应用于ELISA、Western blot和IFA等试验,为深入研究ANKRD13C生物学功能奠定基础。

二氢槲皮素生物合成研究进展

二氢槲皮素(dihydroquercetin,DHQ),又名花旗松素,是一种天然二氢黄酮类化合物,因其具有高效抗氧化活性而受到密切关注,被广泛应用于医药、食品和保健品等领域。DHQ的传统生产方式是从植物组织中提取,但受制于原材料来源、生产工艺等因素,传统方法在制备DHQ上面临挑战。而以生物合成法为代表的新生产方式将是解决这一问题的关键。有鉴于此,全面总结了DHQ的主要生物合成途径,综述了近年来有关DHQ生物合成研究进展,以期为DHQ的应用开发以及其他类似天然产物的生物合成提供参考。