3D培养人脐带间充质干细胞来源的外泌体对成骨细胞分化的作用

目的比较三维立体(3D)培养与传统贴壁培养(2D)人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源的外泌体促进成骨细胞分化能力的差异,探索前者在促进骨形成相关治疗中应用的可能性。方法将hUC-MSCs分为2D组与3D组分别进行培养,在普通光学显微镜下观察细胞的形态特征,同时应用钙黄绿素-AM/PI活死细胞双染法检测3D组细胞的活性;通过转录组测序筛选两组差异表达基因并进行GO富集分析。提取2D组与3D组细胞分泌的外泌体并分为2D外泌体(2D-Exo)组与3D外泌体(3D-Exo)组,通过透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析及Western blotting对外泌体进行表征。在体外应用2D-Exo及3D-Exo干预乳鼠颅骨成骨细胞并进行成骨诱导分化,通过茜素红染色、碱性磷酸酶染色及RT-qPCR鉴定2D-Exo、3D-Exo对成骨分化能力的影响。结果与2D组比较,3D组细胞大小均等,聚拢成球形生长;钙黄绿素-AM/PI活死细胞双染可见3D培养的hUC-MSCs具有较高活性;转录组测序结果显示,与2D组比较,3D组上调基因富集于骨矿化、软骨发育、细胞外基质的组成、成骨细胞分化、血管生成、细胞增殖的正向调控及基因表达的正向调控等通路,下调基因富集于细胞增殖的负向调控、细胞迁移的负向调控、细胞凋亡等通路。透射电子显微镜观察可见两组外泌体的直径均为100 nm左右,呈现外泌体典型的杯状形貌特征,且均表达外泌体相关标志蛋白CD9、CD63和CD81。乳鼠颅骨成骨细胞染色结果显示,与2D-Exo组比较,3D-Exo组茜素红着色的钙结节数量及碱性磷酸酶染色强度均明显升高;RT-qPCR检测结果显示,与2D-Exo组比较,3D-Exo组成骨分化相关基因Bglap、Runx2、Alp、Col1a1、Spp1 mRNA相对表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论3D培养的hUC-MSCs来源的外泌体可上调成骨相关基因Bglap、Runx2、Alp、Col1a1、Spp1的表达,相较于2D培养来源的外泌体具有更强的促成骨细胞分化的能力。

应用光学相干断层扫描仪定量检测50岁以上老年人视盘周围视网膜神经纤维层厚度的研究

目的通过光学相干断层扫描仪（OCT）定量测量50岁以上老年人视盘周围视网膜神经纤维层（RNFL）厚度,研究老年人盘周RNFL厚度特点。方法应用OCT分别定量测量观察组（50岁以上老年人120例,196只眼）和对照组（20~50岁中青年人108例,193只眼）视盘全周、上方、下方、鼻侧、颞侧5个区域的RNFL厚度,应用独立样本t检验比较两组视盘全周和各象限RNFL厚度的差异性。结果观察组视盘全周、上方、下方、鼻侧、颞侧象限RNFL厚度分别为（98.68±14.25）、（125.56±13.87）、（128.04±12.63）、（73.61±13.36）和（67.53±13.87）μm,对照组视盘全周、上方、下方、鼻侧、颞侧象限RNFL厚度分别为（109.02±14.17）、（143.89±13.41）、（133.04±11.72）、（86.61±14.33）和（72.53±12.03）μm,观察组视盘全周、上方象限、鼻侧象限RNFL厚度较对照组差异有统计学意义上的变薄（P〈0.05）,两组下方象限、颞侧象限RNFL厚度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 50岁以上老年人较低年龄人群盘周RNFL厚度变薄,主要表现为上方和鼻侧象限RNFL厚度变薄。

Wilson截骨手术对功能性拇僵硬的临床疗效分析

目的分析Wilson截骨对功能性拇趾僵硬的临床疗效。方法选取2017年8月至2019年4月解放军总医院第七医学中心收治的功能性拇趾僵硬并行Wilson截骨的34例患者,术前、术后末次随访时分别记录美国矫形足踝协会(American Orthopedic Foot and Ankle Society,AOFAS)评分、视觉模拟评分(visual analogue score,VAS),负重时拇趾背伸角度、拇外翻角。结果本组34例患者(56足),均为军人、男性;年龄19~35岁,平均(22.5±2.1)岁。其中双足22例(64.7%),单足12例(35.3%)。术后末次随访时VAS评分由3.9±1.0降至0.4±0.3、负重时拇趾背伸角度由(18.7±6.4)°增至(60.9±11.3)°、AOFAS评分由61.3±6.9增至83.2±4.7、拇外翻角由(20.0±4.1)°降至(10.0±2.4)°,均较术前明显改善,差异有统计学意义(P<0.001)。结论Wilson截骨通过短缩、下沉、外移第1跖骨远端可以很好地缓解第1跖趾关节腔压力,恢复正常的关节运动轨迹,对于功能性拇僵硬治疗效果显著。

跖骨经Weil截骨治疗跖间神经炎的临床疗效分析

目的:分析跖骨Weil截骨扩大跖骨头间隙对跖间神经炎的疗效;方法:选取2015-02-01~2019-03-31来本院就诊且确诊为跖间神经炎(或趾总神经炎)的病人,采用随机的方法分为手术组和对照组,手术组行Weil截骨扩大跖骨头间隙,对照组仅做临床观察,在术前、术后分别确定各足趾麻木范围,将术前和末次随访时足趾麻木范围进行对比。结果:本次入选病人共31例(共43足),平均年龄为21岁,左足共14例,右足共15例,双足共7例,其中36足为第3、4趾麻木,7足为第2、3趾麻木。手术组和对照组病人均完成随访,随访12~24个月,平均随访时间为18.5个月。手术组共23例,其中治疗有效者20例,其有效率为86.7%;对照组共20例,其中治疗有效者为3例,其有效率15.0%;P值小于0.05,差异有统计学意义。结论:经Weil截骨扩大跖骨头间距可有效缓解趾总神经卡压引起的神经炎症状,因在研究期间未能收集到Morton神经瘤患者,故无法证实该术式在Morton神经瘤治疗中的有效性。