灰树花多糖对人外周血单个核细胞白细胞介素-2及干扰素-γ表达的影响

目的探讨灰树花多糖(GRN)对人外周血单个核细胞(PBMCs)白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响。方法使用不同浓度GRN与人PBMCs共培养,对照组以不加GRN的PBMCs培养相同时间。RT-PCR检测人PBMCs中IL-2 mRNA的表达,应用流式细胞术检测Th1细胞中IFN-γ的表达。结果经GRN处理的人PBMCs中,IL-2 mRNA的表达较对照组呈显著增高(P<0.01);Th1细胞中IFN-γ的表达与对照组相比也显著增高(P<0.01)。结论 GRN可提高PBMCs中IL-2 mRNA及IFN-γ的表达,提高细胞免疫功能。

冰冻切片免疫组化检测大鼠脊髓组织NSE、NF的表达

目的观察冰冻切片免疫组化染色检测大鼠脊髓组织神经丝蛋白(NF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达情况。方法采用改良Allen重物打击法制作大鼠脊髓损伤模型,大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs)静脉移植后对其脊髓组织行冰冻切片,免疫组化检测NSE、NF的表达情况。结果脊髓组织NSE、NF均表达,且与常规石蜡切片免疫组化染色结果基本相同。结论冰冻切片行免疫组化染色可有效检测神经元特异标志分子NSE、NF的表达。

人血浆Nav1.5通道蛋白ELISA检测方法的建立

目的建立一种高效特异、灵敏度高的ELISA方法检测人血浆Nav1.5(心脏电压门控性钠通道)通道蛋白。方法设计并合成Nav1.5蛋白质的部分肽链作抗原免疫新西兰大耳白兔,制备抗体。经亲和层析提取纯化并生物素化,分别作为包被或检测抗体使用。建立检测人血浆Nav1.5通道蛋白的ELISA方法并优化条件。结果获得抗人血浆Nav1.5通道蛋白的抗体,并成功建立ELISA检测人血浆Nav1.5通道蛋白的方法。用该方法检测Brugada 1型患者血浆中Nav1.5钠通道蛋白的表达水平,与正常人的比较差异显著。结论建立高效特异检测人血浆Nav1.5通道蛋白的ELISA方法,为临床研究Nav1.5通道蛋白提供一个可行的方案。

姬松茸多糖的抗肿瘤活性

通过构建小鼠S180荷瘤模型,对姬松茸多糖含量最高的品种AB01的多糖(AB01-P)和含量最低的品种AB03的多糖(AB03-P)的抗肿瘤效果进行了研究.结果表明:AB01-P有极显著的抗肿瘤活性,并与剂量呈正相关,高剂量组(2.0 mg.mL-1)的抑瘤率为45.36%;AB03-P的抑瘤率最高为25.14%.与对照组相比,AB01-P可极显著地提高S180荷瘤小鼠的胸腺指数和脾脏指数.采用Annexin V/PI双染色流式细胞仪研究了AB01-P对人骨肉瘤细胞株MG/63早期凋亡的影响,发现AB01-P对诱导MG/63细胞凋亡有一定的作用,且具有量效关系,2.0 mg.mL-1剂量组的凋亡率为30.98%.

糖尿病性白内障发病机制的研究进展

糖尿病性白内障是一类重要的代谢型白内障。长期的临床试验和实验室研究对其发病机制提出了多种不同的学说,不同的时期偏向于不同的学说。系统地了解糖尿病性白内障的发病机制及研究进展有利于新药的开发和及时针对性地对本病进行防治,以减轻患者的精神、心理和经济负担。

表皮生长因子及睾酮对尿道下裂尿道板成纤维细胞雄激素受体活化水平的影响

目的:探讨尿道下裂尿道板成纤维细胞雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达情况及表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和睾酮(testosterone,T)对AR活化水平的影响。方法:原代培养尿道下裂患儿的尿道板成纤维细胞,分别采用EGF和不同浓度睾酮干预,通过免疫细胞化学技术及图形分析技术检测成纤维细胞中AR活化水平的变化。结果:在生理浓度睾酮(3×10^(-8)mol/L)的作用下,中远端型尿道下裂组与对照组AR的活化水平差异无统计学意义(P>0.05),近端型尿道下裂组的成纤维细胞AR的活化水平与其他两组比较有明显的差异(P<0.001)。在睾酮浓度为3×10^(-6)mol/L时,3个组AR活化有明显差异(对照组>中远端型组>近端型组,P<0.001)。在EGF与生理浓度睾酮干预下,近端型尿道下裂组的成纤维细胞AR的活化程度升高最为明显,与对照组及中远端型组有明显差异(P<0.001),中远端型组AR的活化升高的水平与对照组相比也有提高(P=0.02)。结论:尿道下裂尿道板成纤维细胞AR的表达与活化均存在异常,EGF可提升不同类型尿道下裂尿道板成纤维细胞AR的活化水平,尤以近端型明显。

脱落细胞线粒体基因A1555G突变在诊断线粒体耳聋中的应用

目的用PCR-RFLP技术检测脱落细胞(尿液沉渣细胞和颊黏膜细胞)线粒体基因A1555G突变,探讨脱落细胞用于诊断线粒体基因突变相关耳聋的可行性。方法收集福建省某特殊教育学校126名聋哑学生和1个线粒体基因A1555G突变的遗传性耳聋家系6例患者外周血及尿液沉渣细胞和颊黏膜细胞,用PCR-RFLP技术筛查患者是否携带线粒体DNA A1555G突变,并与测序法进行比较。结果尿液沉渣细胞检测线粒体DNA A1555G突变的检出率最高(9/132),颊黏膜细胞和外周血细胞均为7/132。PCR-RFLP筛查结果与直接测序法基本相符。结论脱落细胞适用于耳聋相关线粒体DNA A1555G突变检测。

骨肉瘤程序性死亡因子配体1的表达及临床意义

目的通过检测程序性死亡因子配体1(PD-L1)在骨肉瘤组织中的表达,探讨其与骨肉瘤患者临床特征及预后的相关性。方法选取2006年1月至2012年12月,福建医科大学附属第一医院初诊为骨肉瘤并接受手术切除术的72例患者为研究对象,收集经病理确诊的患者骨肉瘤石蜡标本,采用免疫组织化学(IHC)方法检测组织中PD-L1的表达,以PD-L1肿瘤细胞表达超过5%为阳性。同时收集患者的临床资料,进行统计学分析。结果在72例骨肉瘤组织样本中,22例(30.6%)呈PD-L1阳性。PD-L1的表达与患者年龄、性别、肿瘤位置以及肿瘤大小无相关性(P均>0.05)。单因素分析结果表明,患者的年龄、性别、肿瘤位置和肿瘤大小均与无进展生存(PFS)和总生存(OS)中位时间无关(P均>0.05);接受新辅助化疗患者的PFS中位时间(68.0个月,95%CI33.8~102.2个月)和OS中位时间(68.0个月,95%CI 34.6~101.4个月)均长于未接受新辅助化疗患者(22.0个月,95%CI 16.8~27.2个月;30.0个月,95%CI 20.6~39.4个月)(P均<0.05);PD-L1阳性骨肉瘤患者PFS中位时间(10.0个月,95%CI0.0~20.7个月)和OS中位时间(28.0个月,95%CI 11.1~45.0个月)均短于PD-L1阴性患者(44.0个月,95%CI21.0~67.0个月;52.0个月,95%CI31.4~72.6个月)(P均<0.05)。多因素分析结果显示:肿瘤大小是骨肉瘤患者PFS期的独立影响因子(P<0.05);是否接受新辅助化疗以及肿瘤是否为PD-L1阳性均是骨肉瘤患者PFS期和OS期的独立影响因子(P均<0.05)。结论骨肉瘤患者中部分肿瘤呈PD-L1阳性,是否接受新辅助化疗以及PD-L1是否阳性均是骨肉瘤患者预后不良的独立影响因子。阻断程序性死亡因子(PD-1)/PD-L1的免疫疗法可能是PD-L1阳性骨肉瘤患者可选择的新型治疗方式。

肿瘤坏死因子-α5旁侧基因多态性与强直性脊柱炎相关性

目的探讨肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎(AS)发生的易感关系。方法采用序列特异引物PCR方法(SSP-PCR)检测了136例AS患者和127例正常人的TNF-α5旁侧-857C/T,-863C/A和-1031T/C三个基因多态性位点,并比较了部分不同地区人群之间的基因型与等位基因频率。结果AS患者TNF-α-857基因型(CC,TC和TT)分布频率分别是64.0%,35.3%和0.7%;TNF-α-863基因型(CC,CA和AA)分布频率分别是68.4%,30.0%和1.5%;TNF-α-1031基因型(TT,TC和CC)分布频率分别是66.2%,32.4%和1.5%;TNF-α-857等位基因频率C和T分别是81.6%和18.8%;TNF-α-863等位基因频率C和A分别是83.5%和16.5%;TNF-α-1031等位基因频率T和C分别是:82.4%和17.6%;正常对照者TNF-α-857基因型(CC,TC和TT)分布频率分别是70.9%,27.6%和1.6%;TNF-α-863基因型(CC,CA和AA)分布频率分别是68.5%,29.9%和1.6%;TNF-α-1031基因型(TT,TC和CC)分布频率分别是69.3%,29.1%和1.6%;TNF-α-857等位基因频率C和T分别是84.6%和15.4%;TNF-α-863等位基因频率C和A分别是83.5%和16.5%;TNF-α-1031等位基因频率T和C分别是:83.9%和16.1%;AS患者和正常对照者之间的基因型分布和等位基因频率比较差异无显著性,(P>0.05);本文中国汉族人TNF-α-857(C/T),-863(C/A),-1031(T/C)位点基因多态性分布同亚洲的日本、韩国人群基本一致,差异无显著性;-863(C/A),-1031(T/C)位点基因多态性分布同欧洲的英国、荷兰、瑞典人群比较差异也无显著性,但欧洲人群的TNF-α-857T的等位基因频率明显高于亚洲人群,差异有显著性(P<0.05)。结论TNF-α-857,-863和-1031三个基因多态性位点可能不是中国人患AS的主要易感位点基因。

福建橄榄18S-26S rRNA及其ITS片段的克隆与序列分析

利用18S-26S rRNA基因及其ITS片段的PCR扩增、克隆及测序分析,对福建14个橄榄品种进行分子标记及遗传分类。序列分析结果表明:14个品种可分为4个类别,以1号品种为参照,3、4、6、7、8、9、11号品种的ITS1、ITS2和5.8S共634个碱基序列完全一致,与1号仅ITS2上有1个碱基差异,2号和1号品种的ITS1和5.8S序列完全一致,仅ITS2上有2个碱基差异,归为第一类;5号和14号的序列完全一致,与1号在ITS1和ITS2上各有1个碱基差异,归为第二类;10号和12号序列完全一致,与1号在ITS1上有2个碱基差异,归为第三类;13号品种5.8S的序列与1号相同,但在ITS1上有1个碱基差异,在ITS2上有24个碱基差异,归为第四类。使用DNAMAN软件建立的同源关系树说明了不同橄榄品种的变异程度。将橄榄18S-26S rRNA基因及其ITS序列登陆GenBank,登陆号:DQ517524。关键词:橄榄;ITS序列;克隆;

胰蛋白酶原基因缺失突变导致早发型自身免疫性相关的多器官多发囊肿的研究

目的探讨由胰蛋白酶原基因(cationic trypsinogen,PRSS1)突变引发的早发型自身免疫性相关的多器官多发囊肿及其致病机制。方法采用DNA全长测序技术分析PRSS1、囊性纤维化跨膜通道调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)、丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型(setine protease inhibitor Kazal type 1,SPINK1)、蛋白激酶D(protein kinase D,PKD)1和PKD2等胰腺炎和多囊性病变相关基因的所有外显子及其侧翼内含子剪切区域,确定DNA和cDNA序列的变异,通过与家系内部和正常对照的比较分析,对检测到的变异是否与疾病相关进行探讨,并构建突变体表达体系进行功能学验证,同时对患者的肺、肝、胰腺等穿刺样本进行免疫组织化学和特殊染色。结果在2例年轻的自身免疫性胰腺炎患者中首次发现PRSS1基因2号外显子缺失突变生成激活肽缺失型的胰蛋白酶原,并具有生物学活性;肝脏、肺穿刺病理均可见不同程度的淋巴细胞和浆细胞浸润,肺组织病理显示弹力纤维、网状纤维明显减少;患者表现为多脏器多囊性病变,血清胰蛋白酶、弹力蛋白酶、AAT显著增高。使用糖皮质激素治疗有效。结论 PRSS1:c.300_1304 del CCCAG是引发早发型自身免疫性胰腺炎的新突变形式,并与多器官囊肿关系密切。

常减压蒸馏装置换热流程优化技术

通过调整常减压蒸馏装置换热流程及回流取热比、合理利用高温位热源、提高湍流程度、强化传热过程,提高传热系数等,从而达到提高效利用率和提高换热终温的目的,换热后终温达300～307℃。

基层医院采用国产尿激酶静脉溶栓治疗急性心肌梗死72例观察

目的探讨国产尿激酶治疗急性心肌梗死的临床疗效。方法对72例急性心肌梗死患者采用国产尿激酶150万u静脉溶栓治疗,并与同期未进行溶栓治疗的80例急性心肌梗死患者做比较,观察两组患者胸痛缓解情况、心电图ST-T改变、心律失常发生率及CK-MB、CK峰值前移情况,计算冠状动脉再通率,从而评价溶栓疗效。结果观察组ST-T段下降>50%及CK-MB峰值提前至<14 h内的患者明显多于对照组(P<0.01),观察组总再通率(73.61%)明显高于对照组(8.75%),(P<0.01)。观察组治疗前后胸痛缓解和心律失常发生率与对照组比较明显改善(P<0.01)。结论国产尿激酶静脉溶栓治疗急性心肌梗死患者安全有效,价格低廉,可在基层医院推广使用。

2012年北海市福成镇132例农药中毒情况分析

目的分析北海市福成镇农村农药中毒基本情况,了解中毒发生的特点,为农村农药中毒预防控制提供依据。方法所有数据来自2012年1月1日～2012年12月31日北海市福成卫生院各科室上报的农药中毒报告卡,对所有数据进行回顾性分析统计。结果 2012年我院共收治132例农村农药中毒患者,其中生产性中毒和非生产性中毒占总数的比例分别为12.1%和87.88%;农药中毒有明显的时间特点,以夏、秋两季为主;杀虫剂是引起农药中毒的主要类别,占81.81%,而有机磷农药中毒占75.00%,以氧化乐果、一六零五、甲胺磷为主。结论北海市福成镇农村农药中毒以非生产性农药中毒为主,应加强从业人群安全操作和防护知识的培训;加强农药各环节的监管力度,作好农药中毒防治工作。

试论我国普通高校音乐美育教学

在全面推进素质教育的今天,音乐教育作为素质教育的重要组成部分有着不客忽视的作用。就目前的形武看,我国普通高校音乐教育虽取得了可喜的成就,但仍然就不同地区而言区别还是相当大的。大家对我国普通高校的音乐教育要有一个正确、客观的认识,从而把我国普通高校音乐教育这一特殊、重要的教育门类提升到一个新的高度。

穴位埋珍珠治疗支气管哮喘23例

穴位埋线治疗支气管哮喘有一定的疗效,但效果不够满意。根据穴位埋线的原理,笔者1992年2月～1994年12月采用膻中、定喘、肺俞等穴位埋珍珠治疗支气管哮喘23例,取得较为满意的效果。现介绍如下。 1 临床资料 23例支气管哮喘患者均符合中华医学会内科呼吸学会制定的诊断标准。其中男13例,女10例;年龄最大70岁,最小24岁,平均38.2岁;病程最短3年,最长40年,平均25.4年。属轻度8例,中度14例,重度1例。属外源性哮喘16例,内源性哮喘5例,混合型哮喘2例。中医辨证属冷哮17例,热哮6例。合并症:过敏性鼻炎3例,肺气肿5例,肺心病2例,肺部感染3例。治疗史:做过兔脑穴位埋藏治疗2例,穴位埋线治疗1例。

关于开征社会保险税的思考

一、我国开征社会保险税的必要性 首先,开征社会保险税是发展社会主义市场经济的客观要求。要建立社会主义市场经济体制,就必须建立统一、开放、竞争、有序的市场体系。在整个市场中,当供求关系失去平衡时,反映在劳动力上,必然产生一定数量的失业人员。如果经济不能尽快发展,社会对劳动力的吸纳能力就难于提高。若要既保证效率,又不使人丧失生存、发展的来源,就必须建立并开征社会保险税,作为建立市场经济体制的一个组成部份。

深圳船舶行业协会成立

深圳船舶行业协会成立大会,于1994年12月28日,在深圳市科学馆国际会议厅隆重举行。出席会议的有深圳船舶行业协会发起单位的领导、深圳市经济发展局、市科协的领导、香港及省内的应邀贵宾以及深圳造船工程学会的代表共50多人。 会议由深圳船舶行业协会筹备组付组长、深圳海安船舶工程有限公司总经理温仕浩主持。筹备组付组长、友联船厂（蛇口）有限公司总经理凌哲民致开幕词,筹备组秘书长、深圳造船工程学会常务副理事长兼秘书长张建民作深圳船舶行业协会筹建工作报告。大会宣读了中国船舶工业行业协会（筹）及广东造船工程学会、江门市造船工程学会等单位发来的贺电和贺信。接着,大会通过了深圳船舶行业协会章程,并选举产生了十一位常务理事。大会以热烈的掌声,欢迎深圳市经济发展局邱锦华副局长作指示。深圳船舶行业协会筹备组组长、深圳船舶工业贸易公司总经理黄浩代表当选常务理事讲话。最后由筹备组副组长、南海石油构件机械工程有限公司副总经理程良猷致闭幕词,会议在一片掌声中胜利结束。 成立大会结束后,召开了深圳船舶行业协会第一届第一次常务理事会,选举产生了第一届行业协会领导机构,由黄浩任会长,凌哲民、温仕浩、程良猷、王容敬任副会长,张建民任常务副会长兼秘书长。接着对今年的?

miR-223通过抑制NLRP3防护小鼠急性放射性肺损伤

目的研究miR-223通过抑制NLRP3对小鼠急性放射性肺损伤的防护。方法将40只雌性C57BL/6 J小鼠,按随机数表法将小鼠分成4个组:健康对照组、单纯照射组、照射+miR-223组和照射+阴性对照(NC)组,每组10只。其中3个照射组给予15 Gy X射线全肺单次照射,照射+miR-223组和照射+NC组自照射前1 d开始至照射后14 d,隔天尾静脉注射10 nmol miR-223 agomir或agomir-NC。照射后第14 d取肺组织标本,HE染色观察病理变化,免疫组织化学法观察IL-1β和IL-18的定位和表达,实时荧光定量PCR检测miR-223和NLRP3的表达,Western blot检测NLRP3和Caspase-1的表达,ELISA检测肺组织中IL-1β和IL-18的表达。结果辐射导致小鼠肺组织内miR-223表达下降和NLRP3的表达升高,给予miR-223 agomir可以抑制NLRP3的升高,同时减轻肺部炎症。实验结果显示,与单纯照射组相比,miR-223可以减轻小鼠肺组织的急性炎症反应。使得肺组织中IL-1β和IL-18表达下降(t=10.16、6.00,P<0.05)。肺组织NLRP3 mRNA表达下降(t=3.22,P<0.05)。Western blot结果显示,与单纯照射组相比,照射+miR-223组的NLRP3,Caspase-1蛋白表达下降(t=12.47、4.95,P<0.05)。Elisa结果也表明,在照射+miR-223组中炎症因子IL-1β和IL-18表达下降(t=8.22、8.47,P<0.05)。结论miR-223通过抑制NLRP3的表达,抑制炎症因子IL-1β和IL-18的分泌,减轻炎症反应,对急性放射性肺损伤具有保护作用。

RNAi沉默PDCD4基因对人喉癌Hep-2细胞增殖及β-catenin表达的影响

目的应用RNAi技术下调人喉癌Hep-2细胞中PDCD4基因的表达,探讨其对Hep-2细胞增殖及β-catenin表达的影响。方法设计并合成针对PDCD4基因的shRNA质粒与阴性对照质粒,分别转染Hep-2细胞。实时定量RT-PCR和Western blotting检测转染前后阴性对照组与干扰组PDCD4、β-catenin基因mRNA和蛋白的表达。克隆形成实验观察Hep-2细胞增殖能力的变化。结果与对照组相比,PDCD4干扰组的Hep-2细胞克隆形成率显著升高(P=0.01),PDCD4干扰组PDCD4mRNA和蛋白均显著减低(P<0.01)、β-catenin mRNA和蛋白均较对照组显著增加(P<0.01)。结论成功应用RNAi技术下调人喉癌Hep-2细胞中PDCD4基因的表达,Hep-2细胞克隆形成能力增强,β-catenin mRNA和蛋白表达显著升高。