鸽源ST443肺炎克雷伯菌的分离鉴定和生物学特性分析

为查明引起江苏省某养殖场赛鸽肺炎的病原及其生物学特性,本试验从患有呼吸道疾病的赛鸽肺组织中分离到1株肺炎克雷伯菌,通过形态学、生化鉴定、PCR扩增和16S rRNA基因测序对分离菌株进行鉴定,并采用多位点序列分型(MLST)、毒力基因检测、荚膜血清型分型、wzi基因测序、致病性分析、生物被膜形成能力测定、耐药基因检测、药敏试验和中药体外抑菌试验对分离菌株的生物学特性进行分析。结果显示,分离菌株为革兰阴性杆菌,显微镜下可见两端钝圆、杆状菌体,生化鉴定、khe基因PCR扩增和16S rRNA基因进化发育树分析确定其为肺炎克雷伯菌;MLST分型为ST443型;该菌株携带fimH、uge和wabG三种毒力基因;wzi基因测序鉴定分离菌株荚膜血清型为K16型;该菌株人工感染健康雏鸡可导致雏鸡多个器官出现不同程度的病变,半数致死量(LD_(50))为4.68×10^(9) CFU/mL;分离菌株具有中等生物被膜形成能力,携带bla SHV、bla TEM、tetM和sul 1四种耐药基因,对头孢曲松、头孢美唑、丁胺卡那、复方新诺明和多黏菌素敏感;中药明雄黄在体外对分离菌株有明显抑制作用。本试验为鸽源肺炎克雷伯菌感染的防控提供了参考。

致脑膜炎猪链球菌2型的分子分型鉴定及其生物学特性

旨在了解猪源致脑膜炎猪链球菌2型的分子分型和致病性及其生物学特性。本研究从患病猪的脑组织中分离到1株猪链球菌PX0923,通过电镜观察、16S rRNA基因测序、多重PCR、PCR-RFLP和多位点序列分析(MLST)等方法对其进行血清型和分子分型鉴定,毒力基因、生物被膜形成能力、耐药基因检测、小鼠感染试验、抗生素和中药药敏试验分析分离株PX0923的致病性和药物敏感性。结果表明,分离菌株PX0923为革兰阳性菌,电镜下可见连续排列成链状的卵圆形菌体;PCR和16S rRNA基因系统发育树分析确定其属于猪链球菌2型;序列分型为ST7,与ST1型猪链球菌聚为一支;携带epf+/mrp+/sly+/gapdh+/fbps+/orf2+/sao+7种毒力基因,呈现α型溶血活性;感染小鼠可导致小鼠肺、脾和肝等多个器官不同程度的病变,出现了小鼠脑膜炎等与病猪类似的临床症状;半数致死量(LD50)为1.08×10^(9)CFU/小鼠,提示PX0923可引起小鼠脑膜炎。分离菌株对庆大霉素、卡那霉素、新霉素、阿米卡星等12种药物耐药,携带耐药基因:aadA1和bla-TEM,对中药全蝎和三七敏感。本研究分离到猪源猪链球菌PX0923为血清2型,MLST分型为ST7,其携带多种毒力基因和耐药基因,感染小鼠可引起脑膜炎等多组织损伤;对多种抗生素和中药全蝎、三七敏感。研究结果为猪链球菌的流行和溯源分析提供了分子生物学基础,对致脑膜炎猪链球菌感染的防控提供参考依据。

医教结合语言干预对1~3岁语言发育迟缓儿童语言发育能力的影响观察

目的研究医教结合语言干预对142例1～3岁语言发育迟缓儿童语言发育能力的影响。方法将142例语言发育迟缓患儿随机均分为观察组(医教结合模式语言训练)和对照组(常规语言训练),比较两组干预效果和患儿语言发育水平。结果干预后,两组有效率分别为91.55%和77.46%,比较差异有统计学意义(P <0.05);两组应物能、语言能和应人能发育商(DQ)均明显提升,比较差异有统计学意义(P <0.05),且观察组提升幅度更大,比较差异有统计学意义(P <0.05)。结论医教结合语言干预1～3岁语言发育迟缓患儿可结合医教双方优势,及早发现和干预,为患儿营造良好交流学习环境,全面提高患儿语言发育能力和社会适应能力。

作业疗法干预在脑瘫儿童治疗中的作用分析

目的探究作业疗法干预在脑瘫儿童治疗中的作用。方法选择2014年5月～2017年5月本院收治的120例学龄前儿脑瘫患儿作为本次的研究对象,采用数字表法随机将以上患儿分为观察组和对照组各60例,其中对对照组给予常规治疗方案,对观察组加用作业疗法干预,将两组患儿的治疗效果进行对比。结果观察组与对照组的治疗总有效率分别为93.33%与75.00%,P <0.05;治疗前两组的WPPSI评分无明显的差异,P> 0.05,治疗后两组评分均有所提高,且以观察组的提高程度更加显著,P <0.05。结论对脑瘫患儿给予作业疗法进行干预,便于提高其认知能力,改善预后。

联合环介导等温扩增和横向流动试纸条可视化检测副猪嗜血杆菌

为快速鉴定临床上的副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)感染,本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术结合横向流动试纸条(LFD)测定法进行核酸扩增和结果的可视化判定。选择副猪嗜血杆菌inf B基因中保守序列设计5组环介导等温扩增引物,筛选最适引物组;用生物素和6-FAM标记内引物用于LAMP扩增反应,结合LFD建立了副猪嗜血杆菌LAMP-LFD快速检测方法,并测试该方法的特异性、灵敏度、重复性和临床应用效果。结果表明:1)优化后的LAMP在66℃下运行30 min,LFD可以在5 min内特异性、直观地检测到副猪嗜血杆菌;2)特异性强,与其他5种细菌无交叉反应;3)敏感度高,其最低检测浓度为1.285×10^(-12)ng/μL,较普通PCR方法灵敏度显著提高;4)采用该方法对52份临床样品进行检测,副猪嗜血杆菌阳性率为19.2%(10/52),与LAMP检测结果的符合率为100%。综上,本研究建立的LAMP-LFD方法可特异、灵敏、准确地应用于副猪嗜血杆菌的可视化检测,而且操作简单、仪器设备要求及检测成本低、耗时短,适用于基层养殖场副猪嗜血杆菌感染的临场、即时检测,具有较高的推广价值。