血小板反应蛋白-1敲除对放射性肺纤维化的影响及其机制

目的探讨血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)对放射性肺纤维化的影响及其可能机制。方法选取6~8周龄雄性野生型C57BL/6小鼠(wild type,WT)和全身性敲除TSP-1小鼠(TSP-1^(-/-)),将小鼠分为野生辐照组(WT+IR)和TSP-1敲除辐照组(TSP-1^(-/-)+IR),每组各6只。采用60 Coγ射线全肺照射16 Gy建立放射性肺纤维化小鼠模型。照射后第16周,HE染色观察小鼠肺组织形态变化,天狼猩红染色观察肺组织胶原表达水平,qRT-PCR法检测小鼠肺组织中TGF-β1和CollagenⅠ的mRNA表达水平,micro-CT评价肺损伤和肺实变情况,FlexiVent系统评价小鼠肺功能水平,免疫荧光染色检测肺组织LC-3和p62的蛋白表达,透射电镜观察肺组织细胞自噬体。结果与野生辐照组相比,TSP-1敲除辐照组小鼠肺损伤减轻,肺组织胶原沉积减少,TGF-β1和CollagenⅠ的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),肺功能水平有所改善。免疫荧光和透射电镜结果显示TSP-1敲除辐照组小鼠肺组织出现细胞自噬。结论TSP-1敲除能够减轻放射性肺纤维化,其机制可能与细胞自噬激活有关。

小鼠肺功能测定及其在放射性肺损伤中的应用

目的使用FlexiVent动物肺功能仪测量放射性肺损伤小鼠的各项肺功能参数,为评估放射性肺损伤模型小鼠肺功能变化情况提供数据支撑。方法170只C57BL/6小鼠随机分为对照组和辐照组,对照组再分为C0W组和C24W组,辐照组小鼠胸部经钴源一次性总剂量为15 Gy的γ射线照射后随机分为F8W组、F16W组和F24W组,测量小鼠体质量和肺功能指标,并对肺组织进行HE染色,观察肺组织病理改变。结果与C0W组相比,C24W组小鼠体质量、深吸气量、呼吸系统阻力、呼吸系统顺应性、中央气道阻力和体积压力环面积明显增加(P<0.05),呼吸系统弹性、组织弹性、静态顺应性显著降低(P<0.05)。与C0W组相比,辐照组小鼠体质量无明显差异(P>0.05),F16W组小鼠深吸气量、呼吸系统阻力、静态顺应性和小气道阻力变化显著(P<0.05)。HE染色显示,辐照组小鼠肺泡间隔增厚和炎症细胞聚集。结论通过FlexiVent动物肺功能仪测定C57BL/6小鼠肺功能指标的参考值,可为呼吸系统疾病研究提供参考依据;其中深吸气量、呼吸系统阻力和静态顺应性等可以作为放射性肺损伤的观察指标。

低氧环境对小鼠急性放射损伤的影响

目的通过建立低氧急性放射损伤动物模型研究低氧对急性放射损伤的影响,为高原急性放射损伤救治提供实验依据。方法模拟高原4000 m海拔低氧环境,建立C57小鼠低氧急性放射损伤模型。将150只8~10周龄C57雄性小鼠随机分配至常氧对照组、常氧放射组、缺氧对照组、预缺氧放射组、持续缺氧放射组,每组30只。进行辐照生存率实验,记录不同时间点小鼠体重和精神状态,辐照后第3、7、14、21天血浆低氧诱导因子-1α(HIF-1α)含量、血常规、骨髓有核细胞计数和骨髓病理;检测辐照后第3、7天血浆促红细胞生成素(EPO)和转化生长因子β(TGF-β)含量。结果辐照后第3、7、14、21天,持续缺氧放射组出现明显骨髓组织损伤,持续缺氧放射组血浆HIF-1α含量较常氧放射组升高(q=4.660、3.346、4.978、6.759,P<0.05),表明低氧急性放射损伤模型建立成功。预缺氧放射组与常氧放射组、持续缺氧放射组相比,小鼠生存率明显提高;辐照后第7、14、21天外周血白细胞、淋巴细胞在恢复期升高更快,骨髓病理损伤更轻,骨髓有核细胞计数更多,同时辐照后小鼠体重增长更快。辐照后第3、7天,持续缺氧放射组血浆EPO含量及TGF-β含量较预缺氧放射组高(q=4.851、4.445,P<0.05;q=5.220、5.824,P<0.05)。结论预缺氧处理可能减轻急性放射损伤,而辐照后继续缺氧处理可能不利于急性放射损伤的恢复。