发酵条件对毕赤酵母表达重组人干扰素ω糖基化的影响

发酵条件是影响毕赤酵母 (P .pastoris)表达外源重组糖蛋白时糖基化的重要因素。通过菌体浓度、起始pH值、甲醇诱导浓度和周期、装液量等摇瓶发酵实验 ,研究不同发酵条件对毕赤酵母表达分泌型重组人干扰素ω(rhIFNω)过程中糖基化的影响 ;同时 ,在连续培养过程中考察pH值变化对rhIFNω糖基化的影响和分批发酵过程中rhIFNω糖基化的变化。结果表明 ,控制菌体密度 2 5 0g L(WCW)、起始pH值 6 0、装液量小于 30mL、甲醇诱导浓度 15g L、甲醇诱导 3次 (每 2 4h诱导一次 )等发酵条件 ,有利于摇瓶发酵过程中rhIFNω的糖基化 ;控制pH值 7 0～ 7 5可促进rhIFNω的糖基化 ;分批发酵过程中 ,糖基化与非糖基化rhIFNω的含量有同比变化趋势 ,但糖基化rhIFNω所占比例明显低于摇瓶发酵实验的结果 ,其原因有待进一步研究。

不同年份阿胶中5种成分的同时测定

目的同时测定不同年份阿胶中挥发性碱性物质、L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸对照品、L-脯氨酸的含有量。方法阿胶水溶液的分析采用Titank C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,3μL);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长为254 nm;柱温为43℃。结果不同年限熬制的阿胶,其氨基酸含有量没有显著差异;挥发性碱性物质随着时间的增加缓慢下降,到了第5年时阿胶中挥发性碱性物质下降程度超过50%。结论挥发性性碱性物质是评价阿胶品质的一个重要指标,挥发性碱性物质含有量越低,阿胶的品质越好。

高效液相色谱梯度洗脱法测定注射用美洛西林钠-舒巴坦钠中有关物质

目的建立HPLC梯度洗脱法测定注射用美洛西林钠-舒巴坦钠有关物质的方法。方法使用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),以磷酸盐缓冲液(5.44 g L-1磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH至3.8,即得)和乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL min-1,柱温为31℃,检测波长为215 nm。结果样品中有关物质完全洗出,美洛西林和舒巴坦主峰与有关物质峰均达到基线分离,舒巴坦杂质A、B分离度符合要求;舒巴坦杂质A、舒巴坦杂质B、舒巴坦和美洛西林与峰面积线性关系良好,相关系数(r)均>0.997 2;舒巴坦杂质A相对舒巴坦校正因子为0.6,舒巴坦杂质B相对舒巴坦校正因子为0.5;舒巴坦杂质A、B检测限分别为3.11 ng和5.98 ng,定量限分别为10.36 ng和17.93 ng,舒巴坦检测限和定量限分别为8.46 ng和31.01 ng;美洛西林的检测限和定量限分别为12.20和40.25 ng;舒巴坦杂质A、B平均回收率(n=9)分别为100.9%和102.0%。结论该方法对注射用美洛西林钠舒巴坦钠有关物质的测定灵敏、准确、专属性强,适用于产品质量控制。

pH对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其控制

pH对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的产生有很大的影响。通过对不同缓冲体系试验和对摇瓶发酵过程pH变化的分析,了解摇瓶发酵过程中pH对L-天冬酰胺酶合成的影响。采用流加磷酸自控L-天冬酰胺酶发酵过程的pH,可延长发酵周期,有效地防止菌体的过早自溶,大大促进L-天冬酰胺酶的合成,较分批发酵提高产酶 83%,达到 110u/mL。发酵动力学特性分析表明,该发酵方式L-天冬酰胺酶的合成与菌体生长不相关,控制比生长速率μ为 0. 15~0. 30h-1,均有利于L-天冬酰胺酶的合成,可使比产酶速率的最大值Qpmax达到 3 922u/(g·h)。

异烟肼片微生物限度检查法的建立

建立一种适用于异烟肼片的微生物限度检查方法,并对方法进行验证。需氧菌、霉菌和酵母菌总数计数法、控制菌(大肠埃希菌)检查均采用薄膜过滤法,供试液浓度为1∶10。需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数法方法验证各试验菌的回收试验结果均在0.5~2.0之间,大肠埃希菌检查法适用性试验符合要求。该方法可行性强,适用于异烟肼片的微生物限度检查。

原子吸收分光光度法分析注射用头孢替安中钠的含量

目的:测定注射用头孢替安中钠的含量;方法:采用原子吸收分光光度法(AAS)测定钠的含量;结果:该法测定的Na元素浓度在0.87~1.74μg/m L范围内线性关系良好,平均回收率为100.29%(n=9),RSD=0.58%;结论:采用原子吸收分光光度法测定注射用盐酸头孢替安样品中钠的含量,方法简便、准确。

重组人干扰素ω在对数生长期毕赤酵母中的高效表达特性研究

用不同比生长速率μ的毕赤酵母探讨其表达外源重组蛋白的差异性，通过起始pH值、甲醇诱导浓度和周期、菌体浓度、装液量等实验，优化具有较高μ的对数生长期毕赤酵母表达rhlFNω的摇瓶条件。结果表明，μ对毕赤酵母表达rhlFNω有显著影响。μ为0．1612h^-1的毕赤酵母表达rhlFNω最高为558mg／L，较μ为0．1321、0．0505和0．0052h^-1的毕赤酵母分别提高50％、68％和99％。对数生长期的毕赤酵母表达rhlFNω的最适摇瓶表达条件为：250mL摇瓶装入30mL BMMY，控制菌体浓度达到200～300g／L（WCW），起始pH值自然，每24h添加甲醇15g／L一次。诱导表达周期为4d。通过表达条件的优化，rhlFNω的表达量达到1070mg／L。较优化前提高149％。

高职会计专业课程渗透职业核心能力培养的探索——以《财务管理》为例

本文根据科技进步和经济发展对会计人才的要求,分析会计岗位中所需的职业核心能力,并从高职会计专业课程《财务管理》入手,将专业知识和技能的传授与职业核心能力的培养有机结合起来,探索渗透职业核心能力培养的高职会计专业课程教学模式。

90后大学生理财问题分析与思考

我国正处于改革的深化阶段,各种关乎民生的改革措施陆续推出,个人势必要对自己的未来承担更多的责任,学会理财将成为90后大学生未来生存必备的基本技能。文章通过揭示90后大学生存在的理财问题,分析了产生理财问题的原因,并提出相应的对策建议。

辅酶Q_(10)冻干乳剂的研究

目的制备辅酶Q10冻干乳剂,并考察其稳定性及理化性质。方法通过试验优选出辅酶Q10冻干乳剂的处方,用高效液相色谱法测定其含量和有关物质,考察其粒径、pH值及稳定性。结果辅酶Q10冻干乳剂的最佳处方为聚山梨酯80与甘露醇之比为5∶6。该制剂在室温条件下避光贮存稳定性较好。结论所制备的辅酶Q10冻干乳剂满足静脉注射用制剂要求。

第三资料库的开发和“非遗”保护

非物质文化遗产,主要是以民间文化为主的民族文化遗产。"第三资料库"是民间文化的"非遗"宝库。我国保护"非遗"工作成绩很大,但在实践中,对"非遗"的许多根本问题尚有不少模糊的认识,有的不同看法需要讨论研究,而不正之风的干扰和造成的不良影响,更是需要解决的迫切问题。

信阳地区畜牧业大发展

据信阳地区统计局预计,今年全区畜牧业主要生产指标持续增长,大牲畜饲养量达到105万头,其中存栏87万头,出栏18万头,分别比去年增长7.7%和18.4%;家禽饲养量5735万只,其中存栏2531万只,出栏3204万只,分别比去年增长5%和21.7%;山绵羊饲养量190万只,其中存栏80万只,出栏110万只,分别比去年增长21.1%和36.7%;肉类总产量31.6万吨,比去年增长19.4%;禽蛋产量达到12万吨,比去年增长25.1%。全区畜牧业生产的特点:一是养牛生产加快了向商品化发展,出栏肉牛比上年增长23.1%;

信阳地区马鼻疽的防制与消灭

马鼻疽是由鼻疽杆菌引起的马属动物的一种人畜共患传染病。该病的流行与扩散,对人类的健康和畜牧业的发展危害极大。本文较详细地介绍马鼻疽在信阳地区的发生,防制乃至消灭的全过程。

硫酸卡那霉素注射液中有关物质测定方法研究

目的采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法测定硫酸卡那霉素注射液中有关物质。方法采用ZorbaxSB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2 mol/L三氟醋酸溶液-甲醇(95∶5)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为室温,用蒸发光散射检测器检测(漂移管温度为80℃,载气压力为1.0 bar)。结果以对照溶液质量浓度的对数值与相应峰面积的对数值计算回归方程,其相关系数(r)均大于0.999,二者线性关系良好。结论高效液相色谱-蒸发光散射检测器法简便、准确、专属、灵敏。

90后大学生理财问题分析与思考

我国正处于改革的深化阶段，各种民生制度改革陆续推出，个人势必要对自己的未来承担更多的责任，学会理财将成为90后大学生未来生存必备的基本技能。文章通过揭示90后大学生存在的理财问题，分析了产生理财问题的原因，并从内外因双管齐下提出相应的对策建议。

信阳地区家畜魏氏梭菌病的调查报告

魏氏梭菌病(俗称“快死症”),是由魏氏梭菌(又称产气荚膜杆菌)引起的一种发病急、死亡快、死亡率高的家畜传染病。该病在我区最早发生于1989年,呈点散发生,1990年以后,发病数量逐年增多,发病区域也由散发发展为片状散发流行,1993年底已蔓延于我区大部分县市。据调查资料表明,目前全区已累计发生牛魏氏梭菌病1.6万余头、

发酵工艺在保健食品中的应用

我国当前的保健食品领域发酵技术体系逐步发展成熟,并且成为提升保健食品本身应用价值的主要因素。本文通过保健食品发酵工艺的角度展开分析,阐述了发酵工艺在保健食品领域应用的背景,分析了发酵技术菌种的选择情况,并且探讨了发酵技术在保健食品中具体应用。

HPLC法测定枸橼酸咖啡因注射液中枸橼酸的含量

目的建立枸橼酸咖啡因注射液中枸橼酸含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法采用HPLC法,用C_(18)色谱柱(4.6×250 mm,5μmm),以0.018 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(含0.010 mol·L^(-1)四丁基硫酸氢铵和2.69×10^(-5) mol·L^(-1) EDTA,pH值为2.0)为流动相A;甲醇为流动相B;检测波长:210 nm;柱温:30℃;流速:1.0 mL·min^(-1);进样量:20μL。结果枸橼酸进样量在3.00~5.00μg之间线性关系良好(r=0.9992),平均加样回收率为平均回收率为99.55%,RSD=0.75%(n=9)。结论该方法操作简便、灵敏度高、准确,适用于枸橼酸咖啡因注射液中枸橼酸的含量测定。