献血员不完全抗体和直接抗人球蛋白阳性率的研究

目的检测和分析献血员血液的不完全抗体和直接抗人球蛋白试验(DAT)的阳性率。方法采用微柱凝胶抗人球卡(抗IG+C3d)检测不完全抗体和试管法进行DAT。结果4 051名献血员血液样本不完全抗体测定的阳性率为0.20%(8/4 051),DAT阳性率为0.37%(15/4 051),其中3 182例红细胞悬液样本,不完全抗体测定阳性率为0.19%(6/3 182),DAT阳性率为0.38%(12/3 182),869例机采血小板样本,不完全抗体测定阳性率为0.23%(2/869),DAT阳性率为0.35%(3/869);对8例不完全抗体筛查阳性样本进行抗体鉴定,4例为抗E,1例为抗cE,1例为抗c,2例为抗M;对15例DAT阳性样本进行分型鉴定,其中14例为IgG致敏,1例为IG+C3d致敏。结论对献血员进行不完全抗体测定和DAT,可以在一定程度上防范和减少输血不良反应的发生,对保证输血的安全性有重要的意义。

HBsAg阴性献血者HBV-DNA检测的临床意义

目的检测献血者乙型肝炎五项标志物和HBV-DNA,探讨HBV-DNA检测对于输血安全的重要性。方法应用酶联免疫法检测乙型肝炎五项标志物;应用PCR实时定量荧光检测技术检测HBV-DNA。结果1698例HBsAg阴性献血员样本,HBV-DNA检测总阳性率为2.71%,其中HBsAb(+)、HBcAb(+)模式组占5.71%,HBV-DNA阳性率为7.22%;HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)模式组占3.60%,HBV-DNA阳性率为8.20%;HBcAb(+)组占6.60%,HBV-DNA阳性率为4.46%;HBeAb(+)、HBcAb(+)模式组占2.77%,HBV-DNA阳性率为8.51%;HBsAb(+)模式组占38.48%,HBV-DNA阳性率为1.21%;全阴模式组占46.94%,HBV-DNA阳性率为2.26%。结论对于HBsAg阴性的献血者,HBV-DNA检测对于保证输血安全有重要意义,应该探索更为经济、合理、有效的检测方法。

受血者输血前检测IgA含量的临床价值

目的通过检测受血者血液中免疫球蛋白A(IgA)的含量,探讨受血者IgA的含量与输血超敏反应的关系,以说明输血前检测受血者IgA的重要性。方法用速率散射免疫比浊法检测受血者输血前IgA的含量。分析IgA缺乏或低下受血者与IgA的含量正常受血者的输血超敏反应的发生率。结果1 578例受血者输血前IgA含量低于参考范围的有3例,占0.190%(3/1 578),其中1例为IgA完全缺乏,占0.063%(1/1 578);IgA缺乏或低下受血者组输血后均出现严重的输血超敏反应(100%,3/3),其输血超敏反应发生率明显高于IgA含量正常的受血者组(1.14%,18/1 575)(P<0.01)。1 578例血者中出现过敏性休克1例(0.063%,1/1 578)。结论IgA缺乏或低下的受血者输血后易出现严重的输血超敏反应。输血前检测受血者IgA的含量对于防范和减少输血超敏反应的发生,保证受血者的输血安全有重要意义。

玻片凝聚胺法在交叉配血中应用的评价

目的探讨玻片凝聚胺法(SP)的临床应用价值。方法将玻片凝聚胺法与凝聚胺法(MP)、微柱凝胶法(MGT)进行比较。结果用SP检测15例输血患者血清样本中的特异性同种抗体,结果皆为阳性;120例MP交叉配血阴性的样本其检测结果均为阴性;对照用AB型血清,3种方法的滴度均为0。结论SP可以有效地用于特殊环境和条件下的临床交叉配血试验。

血液细菌16S rRNA基因检测的诊断价值

目的探索快速可靠的检测细菌感染的新方法。方法用PCR技术扩增实验室保留株10株的16SrRNA基因,以乙型肝炎病毒-DNA、白假丝酵母菌和人类基因组DNA为对照,检测该方法的特异性;采用10倍比稀释法进行该方法的灵敏度检测。结果对所测细菌株均获得475bp扩增产物,而与乙型肝炎病毒-DNA、白假丝酵母菌和人基因组DNA无交叉反应;PCR最低能检测1.5×104/L大肠埃希氏菌。结论16SrRN基因PCR检测细菌感染的方法具有特异性、快速性和敏感性高等特点。

205例交叉配血试验主侧不相合原因的研究

目的探讨205例交叉配血试验主侧不相合的原因,为临床解决疑难配血提供参考。方法用盐水法、凝聚胺法和微柱凝胶法进行交叉配血等实验,并对其中交叉配血试验主侧不相合的标本和原因进行检测和分析。结果交叉配血试验主侧阳性205例,有自身抗体为21.46%(44/205),仅有自身抗体为15.61%(32/205);有同种抗体为76.59%(157/205),仅有同种抗体为70.73%(145/205);自身抗体合并同种抗体为5.85%(12/205);其他原因引起为7.80%(16/205),其中高粘滞血症引起的为2.44%(5/205),献血员直接抗球蛋白试验强阳性引起为1.46%(3/205),不明原因引起的为5.37%(11/205)。157例含血型系统抗体,其中29例因血型抗体的特异性无法鉴定,未能确定血型系统,占18.47%(29/157),128例血型系统抗体涉及ABO、Rh、MNSs、Lewis、Duffy、Kidd 6个血型系统,其中Rh血型系统抗体占血型系统抗体的75.16%(118/157),Rh血型系统抗体又以抗-E和抗-c为主,分别为85.59%(101/118)、24.58%(29/118)。结论交叉配血试验主侧不合的主要原因是不规则抗体和自身抗体,其中血型系统抗体以Rh血型系统抗体为主,特别是抗-E抗体和抗-c抗体。

血细胞分析仪提示中性粒细胞增高标本指标被忽视及其对策

目的 研究五分类血细胞分析仪提示不同程度中性粒细胞 (NC)增高标本的阳性指标被忽视情况及对策。方法 五分类血细胞分析仪提示NC不同程度增高的标本与手工复片结果比较。结果 2 0 0例标本 ,仪器提示复片为 2 % ,而手工发现2 0 %的病人出现中晚幼粒细胞 ,7%的病人出现有核红细胞 ;仪器提示的粒系成熟度改变 ( 4 8 0 % )明显低于手工复片( 87 0 % ) ,77 5 %的病人有粒系中毒性改变。

盐水法接合柱凝集法在ABO疑难血型检测中的应用

目的解决柱凝集法检测ABO血型抗原减弱或抗体减低所产生的正反定型不一致。方法将疑难血型患者2%红细胞50μl与50μl抗-A、抗-B标准血清反应,或者将患者的血清(血浆)50μl与ABO试剂细胞A1、B各50μl反应,然后把反应液接合到Liss/Coombs(Anti-IgG+C3d)卡上进行测定;同时利用此法进行抗-A、抗-B标准血清最大稀释度的检测。结果盐水法接合柱凝集法检测17例抗原弱化或抗体减低的疑难血型,全部出现明显阳性反应并符合血型鉴定结果,以此法检测抗-A、抗-B标准血清最大稀释度达到1∶4096。结论盐水法接合柱凝集法测定抗原弱化或抗体减低的ABO血型是一种高效、灵敏、简单易行的方法。

不同孕期ABO血型IgG抗体效价预测新生儿溶血病发生的效能比较

目的探讨孕妇孕中期IgG抗-A或抗-B抗体效价预测新生儿溶血病(HDFN)发生的效能。方法选取2018年1月至2019年11月在浙江省人民医院产检的孕妇165例,依据抗体效价检测孕周分为孕中期组76例和孕晚期组89例。分别比较两组IgG抗-A或抗-B抗体效价与新生儿HDFN发生、新生儿网织红细胞计数、TBil等实验室指标、高胆红素血症危险程度分级及治疗方式的相关性,ROC曲线分析两组抗体效价预测HDFN的效能,R语言bootstrap法分析预测效能的差异。结果两组抗体效价与HDFN发病、高胆红素血症危险程度分级均相关(均P<0.05),孕中期组IgG抗体效价还与新生儿网织红细胞计数及比率、丙种球蛋白治疗方式呈正相关(均P<0.05)。孕中期ABO血型IgG抗体效价预测HDFN的AUC为0.81(95%CI:0.71~0.91,P<0.01),最佳预测临界值为64,灵敏度为0.8636,特异度为0.5741;孕晚期以上指标分别为0.77(95%CI:0.64~0.91,P<0.01)、64、0.8125、0.5811,两组比较无统计学差异(均P>0.05)。结论孕妇孕中期ABO血型IgG抗-A或抗-B抗体效价预测HDFN发生的效能与孕晚期比较无差异。临床或可将孕期ABO血型IgG抗体效价检测提早至孕中期,为后续HDFN治疗争取更多时机。

糖皮质激素与洗涤红细胞输注联合治疗AIHA的疗效观察

目的探究自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者的输血对策及其疗效和安全性。方法将206例AIHA患者根据治疗方案的不同分为A组和B组,各103例。A组患者予以糖皮质激素治疗,同时筛选ABO、Rh血型系统与患者相同的献血员进行交叉配血,采用反应强度最弱且凝集强度小于自身对照的红细胞悬液,制成洗涤红细胞进行输血治疗。B组患者仅予以糖皮质激素治疗。分析红细胞不相合输注治疗AIHA的疗效和安全性。结果 A组患者输血治疗后Hb水平明显高于输血治疗前(P<0.05)。A组与B组患者治疗前Hb水平比较无统计学差异(P>0.05);而治疗后,A组患者Hb水平高于B组患者(P<0.05)。A组患者均无溶血性输血反应发生。结论对于重度贫血的AIHA患者,采用糖皮质激素与最少不相合洗涤红细胞输注联合治疗能有效缓解贫血,是安全和有效的,值得在临床推广应用。

PCI术后患者血栓弹力图检测氯吡格雷药效与CYP2C19基因型相关性研究

目的通过血栓弹力图(TEG)检测经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后患者ADP抑制率并结合患者CYP2C19基因型检测结果,了解CYP2C19基因多态性对氯吡格雷药效的影响。方法选取73例诊断为冠心病并接受PCI的患者,利用基因芯片试剂盒原理测定CYP2C19基因型,并分为三组:Ⅰ组为正常基因纯合子组(CYP2C19*1/*1),Ⅱ组为正常基因与突变基因杂合子组(CYP2C19*1/*2,CYP2C19*1/*3),Ⅲ组为突变基因纯合子或杂合子组(CYP2C19*2/*2,CYP2C19*2/*3,CYP2C19*3/*3)。所有患者使用血栓弹力图测定血小板ADP抑制率。结果Ⅰ组30例(41.10%),Ⅱ组25例(34.25%),Ⅲ组18例(24.65%)。三组间性别、年龄、血小板计数以及高血压和糖尿病患病率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。三组ADP平均抑制率中位数分别为44.20%、33.10%、21.40%,三者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PCI术后患者血栓弹力图测定的ADP抑制率和CYP2C19基因多态性有明显相关性,带有正常基因CYP2C19*1的患者氯吡格雷药效明显优于突变基因纯合子或杂合子的患者。

杭州地区临床用血现状调查分析与思考

目的了解杭州地区医疗机构临床用血管理现状。方法调研在杭州的14家三甲医院、5家三乙医院、5家二甲医院、4家二乙医院、7家未分类医院的输血科(血库)建设和临床输血管理情况,采用现场填写《医疗机构输血工作相关基本情况调查表》的方式,调查内容包括医院输血管理委员会的建立、输血科软硬件建设、输血信息系统的建立对接和使用等;现场考核输血科(血库)工作人员临床用血知识,并对反馈的《调查表》数据汇总和做统计分析。结果调研组专家现场填写《医疗机构输血工作相关基本情况调查表》100%(35/35)回收;在输血文书管理执行情况方面,各类(级)医疗机构没有明显的差别(P>0.05),患者输血前临床表现评估以三甲医院得分最高,输血后临床疗效评估以二甲医院得分最高,医生输血记录完整性以三乙医院得分最高;医护人员在临床用血知识考核情况得分,三甲医院、三乙医院以及二甲医院明显优于二乙医院和未评级医院(P<0.05);抽查的350份输血病历,考虑分析输血前后的实验室指标,病历有效率70.57%(247/350);各类医疗机构的内科、外科在输血指征(Hb指标)掌握上存在一定的差异。结论浙江省各级医院临床用血管理及输血科(血库)建设和管理尚需加强。尽快出台全省临床用血管理与输血科(血库)建设基本标准及考核细则,通过标准化、信息化建设以及输血专业知识的上岗培训,有助于实现临床用血管理的规范化。

乌骨藤提取物对原代新生大鼠心肌细胞的毒性研究

目的探讨乌骨藤提取物(MTE)对原代新生大鼠新生心肌细胞的毒性影响。方法分离和培养SD大鼠心肌细胞,将MTE组分A溶于二甲基亚砜,分别使用20、40、80、160和320μg/ml的MTE和8 000μg/ml的5-氟尿嘧啶作为阳性对照处理原代大鼠心肌细胞24 h,采用MTS法测定不同浓度MTE对体外培养原代大鼠心肌细胞增殖的影响;采用RTCA Cardio系统建立体外心脏毒性筛选模型,对大鼠心肌细胞增殖、搏动进行检测。结果原代心肌细胞加入不同浓度的MTE后,细胞存活受到显著抑制,半数存活浓度(EC50)为207.3μg/ml,随着MTE浓度的升高组分A抑制率增强(均P<0.05)。原代心肌细胞接种到RTCA Cardio E-Plate96孔板上,24h后出现心肌细胞搏动。MTE处理后,细胞指数(CI)值显著下降,240μg/ml MTE组分A处理后心肌细胞搏动迅速受到抑制,搏动频率由126次/min下降至0次/min,且不可恢复;160μg/ml和80μg/ml处理后分别在12h和6h后抑制作用减弱,搏动频率为40次/min和84次/min;40μg/ml基本无影响。结论 MTE组分A对原代新生大鼠心肌细胞具有细胞毒作用,能够显著影响其搏动功能。

乌骨藤粗提物对大鼠胶质瘤C6细胞的体外实验研究

目的观察乌骨藤粗提取物(MTE)不同组分对大鼠C6胶质瘤细胞增殖情况的影响,探讨其作用机制。方法采用新型四氮唑盐法(MTS)检测MTE的Fr1、Fr2、Fr3组分对C6细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测Fr2对C6细胞凋亡和周期的影响;采用荧光定量PCR(qPCR)技术检测不同浓度Fr2对C6细胞的Bax、Bcl-2表达的影响。结果 MTE的Fr1、Fr2、Fr3均能显著抑制C6细胞的增殖(P<0.05),与阳性对照组5-氟尿嘧啶(5-FU)相比抑制率也较高(P<0.05),其半数抑制浓度分别为:60.32、52.30、83.83μg/ml。经80、160μg/ml的Fr2处理24 h后,可有效促进C6细胞早期和晚期凋亡(P<0 05),其周期被阻滞在G_2期;Fr2相同方式处理后,C6细胞中Bax表达水平分别提高到(124.80±7.68)%和(380.30±6.91)%;Bcl-2表达水平分别降低到(84.20±3.10)%和(34.20±4.80)%(P<0.05)。结论 MTE能够显著抑制C6胶质瘤细胞的增殖,其中主要有效成分Fr2能够诱导C6细胞发生G_2期周期阻滞,并通过影响Bax和Bcl-2的表达,促进其凋亡。

仙人掌浸膏片对非胰岛素依赖型糖尿病患者血脂及过氧化脂质的影响

高甘油三脂血症是糖尿病最常见的脂质代谢紊乱之一,脂质过氧化可严重损坏细胞膜的成分、结构和功能,因此,过氧化损伤是糖尿病肾脏并发症的重要环节。本研究通过观察仙人掌浸膏片对非胰岛素依赖型糖尿病患者(NIDDM)血脂及过氧化脂质的影响,探讨血糖与其的关系。1 一般资料 1998-06～1998-09,46例NIDDM患者按就诊时间先后随机分为治疗组30例,对照组16例。治疗组门诊病人6例,住院病人24例,年龄63.80±8.31岁;男16例,女14例;病程6.05±3.68岁;对照组门诊病人4例,住院病人12例;年龄64.44±4.68岁;

受血者ABO血型正反定型不符的循证分析

目的研究分析受血者ABQ血型正反定型不相符的原因。方法应用ABO血型正反定型试验、意外抗体鉴定、直接抗人球蛋白试验、红细胞吸收一放散试验及唾液血型物质检测等方法，确定受血者ABQ血型正反定型不相符的原因。结果12例受血者ABO血型正反定型不相符的原因包括实验者操作误差1例；血型抗体减弱或缺失4例；血浆蛋白异常3例；亚型和红细胞抗原减少2例；意外抗体干扰1例；血型不合造血干细胞移植后的嵌合状态1例。结论当受血者的ABO血型正反定型不相符时，必须进行复检和一系列确认试验。明确原因。从而保证临床用血安全。

慢性肾衰竭血液输注的护理信息化管理和回顾性研究

目的探讨红细胞和血浆输注在慢性肾衰竭治疗中的作用。方法利用护理输血信息管理系统规范输血流程,对我院2013年1月～2016年7月共378例需要红细胞和血浆输注的患者病例进行回顾性调查统计分析,比较输注前后血红蛋白、白蛋白、肌酐、血氧饱和度以及凝血功能的变化。结果 378例患者中,输注红细胞悬液234例;输注血浆患者144例;红细胞输注后血红蛋白水平升高,血氧饱和度上升,肌酐下降,差异有统计学意义(P均<0.05);血浆输注后白蛋白水平显著上升,肌酐显著下降(P均<0.05)。红细胞输注前81.2%的患者血红蛋白低于60 g/L,属于合理用血范围,在输注后血红蛋白水平则明显升高(P<0.001);对血红蛋白水平高于60 g/L的患者输注红细胞后,血红蛋白水平虽有升高,但幅度较小(P<0.05),两组比较差异显著(P<0.01)。慢性肾衰竭合并肝损伤患者在血浆输注后凝血功能明显改善(P<0.05),但单纯肾衰竭患者在血浆输注后凝血功能却无明显差异。结论红细胞输注能显著改善肾性贫血症状,血浆输注可改善伴肝损伤患者的凝血功能,慢性肾衰竭病情复杂不一,应严格按个人贫血程度和凝血状况实现合理用血。

微柱凝胶法检测孕妇血清IgG抗A（B）抗体的参考效价推算

目的分析比较微柱凝胶法与传统抗人球蛋白法检测孕妇IgG抗A（B）抗体效价的相关性和线性数量关系，推算相应的微柱凝胶法参考值。方法分别采用微柱凝胶法和传统抗人球蛋白法检测199例门诊和住院0型孕妇IgG抗A（B）效价，并结合其中58例新生儿ABO溶血病检测结果进行统计分析。结果微柱凝胶法检测阳性率达79．9％，传统抗人球蛋白法阳性率达64.8％，两者有统计学差异（P〈0．01）。两种方法的结果呈高度正相关（r=0．869，P〈0．01）。推算微柱凝胶法相应的参考理论效价为114，与新生儿溶血病临床资料分析较相符。结论本研究推算的理论参考效价有助于今后微柱凝胶法医学决定值的建立。