人TRF2基因有效siRNA序列的筛选

目的设计合成干扰端粒重复序列结合因子2(telomeric repeatbinding factor 2,TRF2)基因表达的不同小型干扰RNA(siRNA),筛选出能高效抑制TRF2基因表达的siRNA。方法根据人TRF2 mRNA的序列,设计合成3对不同的针对TRF2的siRNA、应用脂质体LipofectamineTM2000转染试剂将三对siRNA转染人乳腺癌MCF-7细胞,实时荧光定量RT-PCR技术检测TRF2 mRNA表达水平、Western印迹法检测TRF2蛋白表达以确定干扰效果。结果设计合成的3对TRF2 siRNA中有2对siRNA可有效抑制TRF2基因表达。结论成功设计合成了针对TRF2基因的siRNA,并从中筛选出能特异且高效阻断TRF2表达的siRNA,为进一步应用RNAi技术抗TRF2基因进行肿瘤基因治疗研究奠定实验基础。

Y染色体异常的临床表现与遗传学相关分析

采用外周血淋巴细胞培养技术对 72 0例检查者实施染色体分析 ,其中有 34例存在Y染色体异常 ,主要表现为不良孕产史、性别畸形、无精子症等。

泸州地区480例遗传咨询者细胞遗传学分析

[目的]探讨泸州地区遗传咨询者的染色体异常与疾病的关系。[方法]对480例有智力低下、反复自然流产或死胎、不孕不育、小睾丸、原发或继发闭经的遗传咨询者进行外周血染色体分析。[结果]发现染色体异常核型46例,异常核型检出率为9.58%,包括染色体的数目和结构异常。[结论]对遗传咨询者进行染色体检查,对于预防遗传性疾病,开展优生优育工作以及指导临床诊断与治疗具有十分重要的意义。

85例Turner综合征的细胞遗传学分析

目的:分析Turner综合征患者的临床表现、染色体核型及其关系。方法:采用外周血淋巴细胞培养G显带染色体核型分析技术对85例Turner综合征患者进行染色体核型分析,并对比其临床表现与不同染色体核型之间的关系进行分析。结果:Turner综合征患者临床表型复杂,核型多样。其核型主要有X单体型、嵌合型、X染色体结构异常等。结论:X染色体缺失或部分片段缺失是导致Turner综合征的主要原因。闭经、副性征发育不良、身材矮小等是其典型表现。不同核型个体的临床表型可有差异。及早确诊对该病的防治具有积极意义。

医学细胞生物学实验教学质量监控的设计研究

构建实验教学质量监控体系是高校教学管理的一个重要环节。本文以临床本科医学细胞生物学实验教学过程为研究对象,对构建医学细胞生物学实验教学质量监控体系进行了分析,并围绕提高实验教学质量提出了具体的措施。

微量元素与精子生成的关系分析

目的:探讨微量元素与人类精子生成的关系。方法:对60例已确诊为男性不育症的患者进行常规精液分析,并用wFx-lF2型自吸收原子吸收分光光度计测定血清中微量元素锌、铜、铁、锰的含量,并与40例健康已育男性进行对照。结果:不育症组与对照组男性血清中,微量元素锌、铜、铁、锰含量差异具有统计学意义(P<0.01);不育症组间血清锌、铜、铁、锰含量差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:微量元素锌、铜、铁、锰参与生殖系统的形成和代谢过程,对精子生成起重要作用。

微量元素与男性不育症患者精子质量的关系分析

目的探讨微量元素与男性不育症患者精子质量的关系。方法 80例已确诊为男性不育症患者(不育症组)及60例健康已育男性(对照组)禁欲7 d,用手淫法留取精液送检,另取受试者空腹静脉血运用WFX-1F2型自吸收原子吸收分光光度计检测各标本微量元素含量,并对各参数间的相关性进行分析。结果不育症组与对照组男性血清中,微量元素锌、铜、铁、锰含量差异有统计学意义(P<0.01);不育症组间血清锌、铜、铁、锰含量差异有统计学意义(P<0.01)。结论微量元素锌、铜、铁、锰参与生殖系统的形成和代谢过程,对精子生成起着重要作用。

医学细胞生物学实验教学质量评价体系的设计

实验教学是本科教学的重要组成部分。对培养学生的动手能力、实践技能、科学素质和创新能力有着不可替代的作用。随着高校教育教学改革的进一步深入发展。开展对实验教学质量评价的研究，建立一套与实验教学管理、发展相适应的．行之有效的实验教学质量监控体系，推动实验教学的改革和发展，提高实验教学质量就显得尤为重要。

医学细胞生物学多媒体教学的思考

从教学实践出发，浅谈多媒体教学应用于医学细胞生物学中的优势和目前存在的问题，并对存在的问题进行分析，提出相应的改进措施，以便充分发挥多媒体教学的优势和作用，提高教学质量。

病残儿智力低下的病因学研究

目的:探讨病残儿智力低下的常见病因及预防措施。方法:对患儿进行病史调查、实验室检查、家系分析。结果:产前因素86例,占34.7%;产时因素53例,占21.4%;产后因素67例,占27.0%;原因不明42例,占16.9%。结论:加强孕期保健,提高产科质量,积极防治后天获得性疾病,重视小儿的早期教育是预防智力低下的关键。

Y染色体异常的临床表现与细胞遗传学分析

人类Y染色体是一个小的近端着丝粒染色体,长约50Mb。Y染色体上有与男性性别决定密切相关的基因存在。故若Y染色体发生数目异常或结构改变则会引起男性性发育异常或生殖异常等遗传效应。同时,在人群中Y染色体的长度具有变异性,这种长度变异性是否具有临床效应仍然是一个存在争议的问题,值得进一步的研究。

siRNA-TRF2对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

目的构建表达端粒重复序列结合因子2基因小干扰RNA的腺病毒表达载体(rAd-shR-NA-TRF2),探讨其对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法根据预实验筛选出的针对人TRF2 mRNA的特异性siRNA靶序列,构建表达siRNA-TRF2的重组腺病毒载体rAd-shRNA-TRF2,转染人乳腺癌MCF-7细胞后,用MTT比色法检测MCF-7细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布情况。结果 rAd-shRNA-TRF2转染MCF-7细胞后,MCF-7细胞增殖抑制、细胞周期阻滞于G0/G1期、增殖指数显著下降。结论通过RNAi抑制TRF2基因表达进而抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖的方法有望成为肿瘤基因治疗的一个新策略。

应用实时荧光定量PCR筛选TRF2 siRNA最佳靶序列

有效siRNA的筛选是RNAi研究的关键点之一。[目的]筛选有效的TRF2 siRNA,为应用RNAi技术抗TRF2研究提供实验基础。[方法]采用化学合成法合成3段针对TRF2的siRNA、应用脂质体LipofectamineTM2000转染试剂将3段siRNA转染人乳腺癌MCF-7细胞、实时荧光定量RT-PCR技术检测TRF2 mRNA表达水平以确定干扰效果。[结果]3段TRF2 siRNA中有2段siRNA可有效降低TRF2 mRNA表达。[结论]利用化学合成法合成siRNA,应用实时荧光定量PCR技术检测目的基因干扰效果可用于快速、高效筛选特异性基因表达抑制的siRNA。

PI3K/Akt调控内质网应激对GRP78的诱导

目的:研究内质网应激条件下PI3K/Akt信号通路对HEK293细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平的调控作用。方法:采用PI3K抑制剂LY294002、Akt1失活型突变载体Akt1(K179M)及Akt siRNAs阻断内质网应激介导的Akt活化,采用Akt激活型突变载体Myr-Akt过度激活内质网应激介导的Akt活化,并利用RT-PCR和Western blotting技术分析内质网应激条件下PI3K/Akt信号途径对HEK293细胞中GRP78表达水平的调控作用。结果:LY294002、Akt1(K179M)及Akt1 siRNA均明显抑制了内质网应激对GRP78的诱导。Myr-Akt1明显促进内质网应激对GRP78的诱导。Myr-Akt2/3及Akt2/3 siRNA对GRP78的诱导均无影响。PI3K/Akt信号通路阻断或过度激活对GRP78 mRNA水平的诱导无影响,但是对GRP78的降解有显著影响。结论:HEK293细胞中,PI3K/Akt通过蛋白稳定性调节促进内质网应激对GRP78的诱导。

热效应维度对固体激光器输出性能影响的研究

LD端面泵浦固体激光器具有结构紧凑,效率高,输出光质量好等优点,但LD端面泵浦结构下激光晶体内部的温度梯度较大,热效应显著。本文建立了激光增益介质的热传导模型,计算泊松方程,最终求出块状和板条状增益介质内部温度场分布,并求解了热透镜产生后所形成的光程差和其焦距。结果表明,较块状晶体,板条状晶体呈现一维温度场分布,且泵浦中心的温度远低于块状晶体,从而较好的改善了影像输出光质量的晶体热透镜效应。在相同谐振腔和泵浦光参数下,板条晶体泵浦激光器的光束质量的得到明显改善。

研究型教学与合作学习模式的创建与实践

如何培养学生解决实际问题的能力和创新能力是当前高等教育改革的重要课题之一。创新能力是在创造性解决问题的过程中培养出来的综合能力[1]。启发学生主动实践,是创新能力培养的关键所在。医学是一门不断创新与发展的学科。高等医学院校在培养学生的过程中,不仅要培养学生的专业知识水平,而且要培养学生的自学能力及敏捷的科学思维[2]。

miR-26a mimics转染人肝癌细胞株HepG2的表达蛋白质组分析

目的:通过分析microRNA-26a(miR-26a)mimics转染对人肝癌细胞株HepG2表达蛋白质组的影响,以确定miR-26a与肝癌发生发展的相关性。方法:常规培养人肝癌细胞株HepG2,经miR-26a mimics转染48 h后进行细胞周期分析,并裂解转染72 h的HepG2细胞提取蛋白,双向电泳分离,匹配对比各蛋白斑点的表达量,筛选主要差异表达蛋白进行质谱鉴定。结果:HepG2细胞经miR-26a mimics转染后细胞增殖受到抑制;其蛋白2-DE图谱与对照组比较,差异表达超过2倍的蛋白斑点有11个。其中,有3个蛋白斑点为表达上调,有8个蛋白斑点为表达下调。质谱鉴定为:膜联蛋白A1、过氧化物酶4、增殖细胞核抗原、载脂蛋白A1、细胞色素C氧化酶5a、细胞周期蛋白E2、磷酸核糖焦磷酸激酶3、周期素依赖性蛋白激酶1和磷脂酰乙醇胺结合蛋白。结论:miR-26a可能通过影响上述蛋白分子的表达,直接或间接地调控HepG2肝癌细胞的增殖、分化和死亡,以发挥其抗癌作用。

siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究

目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达,MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况。结果酶切电泳和测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。该质粒转染MCF-7细胞后,hTERT基因mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低,MCF-7细胞生长抑制。结论内源性短发夹状siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖生长,这也为肿瘤的基因治疗提供了实验依据。

肝癌细胞蛋白质组在DTT诱导内质网应激条件下的表达

目的:研究内质网应激条件下肝癌细胞SMMC-7721蛋白质组的表达,为人类肝细胞癌的诊治提供新的靶点.方法:培养肝癌细胞株SMMC-7721,随机分为两组,即实验组和对照组.实验组加入二硫苏糖醇(DTT,2.5mmol/L),对照组加入等量的培养基,裂解细胞,提取全细胞蛋白.双向电泳(2-DE)分离,Image Master2D Platinum软件进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质.结果:实验组肝癌细胞SMMC-7721的2-DE图谱上共检出蛋白质斑点(844±46)个,对照组共检出蛋白质斑点(1015±63)个,对照组与实验组自动匹配配对(593±23)对,匹配率约71%左右,绝大多数蛋白集中于pH5.2-6.5,相对分子质量15000-80000Da;获得组间标准化总灰度值(%Vol)相差2倍及以上的蛋白斑点3个,通过MALDI-TOF-MS分析鉴定了3个差异蛋白质点,分别是:fem-1同源蛋白B、细胞周期素A1、增殖诱导蛋白44.结论:鉴定的3个肝癌细胞株SMMC-7721在内质网应激下表达改变的蛋白质,其功能涉及细胞增殖、细胞凋亡以及细胞周期等,具有潜在的作为肝癌诊断、预后标记物或治疗靶点的意义.