我院门诊药房新型调剂模式的实践与思考

目的:探求提高门诊药房工作效率和工作质量的调剂模式。方法:介绍我院门诊药房“按清单摆药”模式的硬、软件构成和运转情况,并与传统模式比较,分析其优劣。结果与结论:该摆药模式提高了门诊药房调剂工作的效率和质量,值得在大、中型医院推广。

丹参素对麻醉犬血流动力学的影响

目的观察丹参素钠注射液静注给药对正常麻醉犬心率、血压、心脏收缩舒张功能等血流动力学指标的影响。方法采用心脏导管法直接观察丹参素钠注射液(2、4、8 mg/kg)对麻醉犬心率(HR)、收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室平均压(MLVP)、左心室收缩压最大变化速率(±dp/dtm ax)、左心室舒张末期压(LV-EDP)等血流动力学的影响。结果丹参素钠注射液显著增加LVSP、±dp/dtm ax,对SAP、DAP、MDP无显著影响;高剂量组显著降低心率。结论丹参素钠注射液可显著改善心功能,具有减轻心脏负荷,降低心肌耗氧量的作用。

注射用丹红治疗肺原性心脏病的实验研究

目的观察注射用丹红静脉注射给药对家兔和大鼠实验性肺原性心脏病的作用。方法静脉注射1%三氯化铁建立家兔慢性肺原性心脏病模型,电镜观察注射用丹红对其心、肝、脾、肺、肾的影响;注射肾上腺素造成急性肺循环阻力增加,建立大鼠肺水肿模型,测定注射用丹红注射给药前后其肺含水量,病理镜检观察出血性炎症和水肿情况。结果注射用丹红耳缘静脉注射对实验性肺原性心脏病家兔的心、肝、脾、肺、肾均有一定的保护作用,各脏器病变程度较生理盐水组轻,并有一定的量效关系;注射用丹红尾静脉注射对肺水肿大鼠有一定的保护作用,可减轻肺水肿、减少肺出血性炎症。结论注射用丹红对肺原性心脏病有一定的治疗作用。

汉黄芩素与氟尿嘧啶联用抗人肝癌细胞Hep-G2作用的拮抗效应研究

目的探讨汉黄芩素(wogonin)联合氟尿嘧啶(5-FU)对人肝癌细胞Hep-G2生长活性的影响。方法实验分汉黄芩素组、5-FU组、汉黄芩素+5-FU组和空白对照组,采用MTT法观察药物对肿瘤细胞体外生长活性的影响,采用流式细胞仪分析肿瘤细胞凋亡率的变化。结果 MTT实验结果显示汉黄芩素(5、10、20、40μmol/L)作用24、48h后对肿瘤细胞具有一定的增殖抑制作用(P<0.05);5-FU(5、10、20、40 mg/L)作用24、48h后对肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05);与单用组对肿瘤细胞的抑制作用相比,汉黄芩素联合5-FU组的抗肿瘤作用呈相互拮抗作用(P<0.05);汉黄芩素联合5-FU给药48h后,联合指数CI值呈现剂量依赖性,CI值随汉黄芩素浓度的加大而增大,说明随汉黄芩素浓度的加大,其拮抗5-FU抗肿瘤效应的作用也越来越明显(P<0.05)。结论汉黄芩素具有一定的抗肿瘤作用,但可拮抗5-FU的抗肿瘤作用,具体机制有待进一步研究。

柜台型调剂模式及其在医院门诊药房中的应用

本文介绍了柜台型调剂的优势 。

反相高效液相色谱法测定芩蓝滴鼻液中黄芩苷含量

目的建立反相高效液相色谱法分离测定芩蓝滴鼻液中黄芩苷的含量。方法：采用Gemini C18110A（4．60mm×250mm，5μm）色谱柱；流动相为甲醇旬-0．2％磷酸溶液（50：50）；流速为0．8ml／min；检测波长为277nm；进样量10μl。结果黄芩苷浓度在709．4～7094．0μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0．9999；平均回收率为99．6％，RSD为1．33％（n=9）。结论本方法简便、准确、专属性强，可用于测定芩蓝滴鼻液中黄芩苷的含量。

圣愈胶囊质量标准的研究及急性毒性试验

目的：建立圣愈胶囊的质量标准,并进行LD_(50)测定。方法：采用薄层色谱法对黄芪、党参、白芍和紫河车进行色谱鉴别；醇溶性浸出物测定法测定其浸出物含量；改良寇氏法计算小鼠给药的LD_(50)。结果：薄层色谱法鉴别效果良好。检查项目均符合规定；其醇浸出物含量不低于16.3％；LD_(50)为764.8m/kg,其平均可信限为682.5～847.2mg／kg。结论：所建立的质量控制方法准确可行,制剂安全有效。

Canstatin基因表达载体的构建及其生物学效应研究

目的 构建可表达人血管生成抑制素 (canstatin)蛋白的真核表达载体 ,探索canstatin对人脐静脉内皮细胞系(HUVEC)和人肺腺癌A5 49细胞株的生物学效应。方法 RT PCR法从胎儿肝组织中获取canstatincDNA全长 ,并将其克隆到真核蛋白表达载体pCMV Script上。阳离子脂质体介导该重组载体转染HUVE细胞系、A5 49细胞株。RT PCR法检测其对canstatinmRNA的表达。台盼蓝拒染法活细胞记数 ,3 H TdR掺入法检测细胞增殖 ,TUNEL法检测细胞凋亡 ,流式细胞术检测细胞周期。结果 成功构建pCMV Script Cans真核表达重组载体 ,并在转染该表达载体的A5 49及HUV EC C细胞株中均检测到canstatinmRNA的表达。HUV EC C细胞株pCMV Script Cans载体转染组比空载体组 3 H TdR掺入量明显减低(P <0 0 1) ,细胞凋亡率明显增加 (P <0 0 1) ,A5 49细胞株转染组与空载体组 3 H TdR掺入量无显著差异 (P >0 0 5 ) ,细胞凋亡率无显著差别 (P >0 0 5 )。结论 pCMV Script Cans重组载体能在转染的哺乳动物细胞中表达canstatin ,并抑制内皮细胞增殖 ,诱导内皮细胞凋亡 ,但对肿瘤细胞没有直接抑制作用。

人癌细胞线粒体DNA控制区序列特征分析

为了探讨癌细胞 ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 控制区序列的变化特征， 采用 Ｐ Ｃ Ｒ 产物限制性片段长度多态性（ Ｐ Ｃ Ｒ－ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ） 分析与直接测序相结合的方法， 对比分析６ 株人癌细胞系、６ 例癌患者及４ 例健康成人白细胞ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 控制区序列。发现第１６５１９ 位 Ｔ→ Ｃ、１６ ５３４ 位 Ａ→ Ｇ、４６ 位 Ｔ→ Ｇ 和４９ 位 Ａ→ Ｃ 突变，在癌细胞系和癌患者白细胞ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 中分别占５０ ％ （３／６） 和３３３ ％ （２／６） ， 健康成人白细胞ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 中未见此类型突变； 第１６ ２７８ 位 Ｃ→ Ｔ 突变， 在癌细胞系 ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 中占５０ ％ （３／６） ， 显著高于正常人群ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 中此位点的多态性变异。表明癌细胞和癌患者白细胞 ｍｔ Ｄ Ｎ Ａ 重链复制起点及其 相邻 Ｄ 环区的特征性突变可能与细胞癌变／ 或癌的易感性有关。

薏苡仁多糖对2型糖尿病大鼠主动脉内皮素1基因表达的影响

目的观察薏苡仁多糖对实验性糖尿病血管并发症大鼠主动脉内皮素1mRNA表达调控的影响。方法采用链脲佐菌素腹腔注射(75mg/kg)和高热量饲料喂养建立2型糖尿病并发动脉粥样硬化大鼠模型,应用RT-PCR半定量分析大鼠主动脉内皮素1mRNA的表达变化。结果模型组大鼠主动脉内皮素1mRNA表达量为0.72±0.10,明显高于正常组的0.39±0.01(P<0.01),经给药处理6个月后,与模型组的表达量比较,各给药组大鼠主动脉内皮素1mRNA有不同程度的下调(P<0.05),其中薏苡仁多糖注射组的表达量0.49±0.12与模型对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。结论糖尿病血管并发症的发生可能与内皮素1mRNA表达上调有关,薏苡仁多糖保护糖尿病血管内皮损伤可能与其下调内皮素1mRNA表达的作用相关。

脂多糖作用大鼠肺泡巨噬细胞糖皮质激素受体表达及活性变化

目的 探讨脂多糖作用大鼠肺泡巨噬细胞 2 4h内 ,糖皮质激素受体表达及活性变化特点。方法 将原代培养的大鼠肺泡巨噬细胞分为脂多糖致伤组和地塞米松治疗组 ,采用RT PCR和WesternBlot在mRNA水平和蛋白质水平测定肺泡巨噬细胞糖皮质激素受体 ;EMSA测定肺泡巨噬细胞核蛋白中糖皮质激素受体活性。结果 脂多糖作用后 ,糖皮质激素受体mRNA表达下调 ,2 4h恢复正常水平 ;糖皮质激素受体蛋白质表达降低 ,4h降至最低 ,2 4h维持在低水平表达 ;糖皮质激素受体活性在 1h降到最低 ,2 4h未恢复至正常水平。地塞米松治疗组在治疗后期不能有效维持糖皮质激素受体活性。结论 脂多糖 ( 10 0ng ml)作用大鼠肺泡巨噬细胞后 ,糖皮质激素受体蛋白表达降低 ,可能与mRNA表达降低及蛋白降解加速有关 ;糖皮质激素受体活性被显著抑制 ,出现糖皮质激素抵抗。

2种酶消化法培养大鼠血管平滑肌细胞生长特性的比较

目的：应用单纯胶原酶法、复合胶原酶法培养大鼠血管平滑肌细胞，比较其生长特性。方法：采用改良Lowry法测定了蛋白质含量，依照荧光指示剂法测定了细胞内[Ca2+］。结果：2种方法其生长曲线类似，均于7～8d至高峰，其蛋白质含量略有差异，也是在7～8d达最大，钙含量分别为（202．60±15．18）nmol／L和（153．20±11．34）nmol／L。结论：单纯胶原酶法相对经济，复合胶原酶法能更好地保护细胞，可根据具体情况选用。

血管能抑素重组基因表达载体抗肺癌效应研究

目的:通过构建人血管能抑制素(Canstatin)真核表达载体,转染裸鼠肿瘤局部,探索其对肺癌治疗作用。方法: RT-PCR法获取Canstatin cDNA全长,定向克隆法构建Canstatin基因表达载体pCMV-Script-Cans。荧光定量PCR法检测转染 细胞Canstatin mRNA的表达。台盼蓝拒染法、3H-TdR掺入法检测细胞生长增殖,TUNEL法检测细胞凋亡。基因枪转染重组 载体到荷瘤裸鼠肿瘤局部,CD31单克隆抗体微血管记数检测抗血管生成效应。结果:成功构建pCMV-Script-Cans重组载体, 并在转染的细胞株中检测到Canstatin mRNA的表达。人脐静脉内皮HUV-EC-C细胞株pCMV-Script-Cans质粒转染组比空载 体组3H-FdR掺入量明显减低(P<0.01),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),重组载体转染肿瘤生长缓慢,微血管数显著低于对 照组(P<0.01)。结论:pCMV-Script-Cans重组载体能在转染的哺乳动物细胞中表达Canstatin,并抑制内皮细胞增殖,而且有 很好的抗肺癌血管生成作用。

首乌芪灵胶囊的稳定性研究

目的考察首乌芪灵胶囊的稳定性并预测其临床使用有效期。方法进行强光、高温、高湿及空气露置等影响因素实验,并在40℃、RH75%的条件下进行3个月的加速稳定试验。结果首乌芪灵胶囊在试验前后的外观、内容物色泽、崩解时限、色谱检查、含量测定等均符合规定,无显著性差异(P<0.05)。结论本品于室温条件下保存质量稳定,有效期可达2年。

bcl-2、bax在NHE-1核酶基因转染所致缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨 bcl 2、bax表达在 Na+ / H+ 交换器 1(NHE 1)抑制而诱导缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)凋亡中的作用。方法 将转染 NHE 1特异性核酶基因大鼠的 PASMCs置于缺氧条件下(O2 的体积分数 <1% )培养 ,分别在缺氧 0、2、6、12、2 4和 4 8h采用原位细胞凋亡检测法观察细胞凋亡情况 ,荧光指示剂 Fura 2 / AM测定法检测细胞内 Ca2 + 浓度 (〔 Ca2 + 〕i)变化 ,半定量逆转录聚合酶链反应方法检测细胞内 bcl 2 m RNA和 bax m RNA表达变化 ,免疫组化法检测细胞内 Bcl 2蛋白和 Bax蛋白表达的变化。结果 转染 NHE 1特异性核酶基因大鼠的 PASMCs在缺氧培养时 ,其细胞凋亡率随缺氧时间的延长而逐渐升高 ,但是〔 Ca2 + 〕i升高的幅度较小 ,从缺氧 6 h起就显著低于同时间点的对照组和转染逆转录病毒真核表达载体空载体组 (P均 <0 .0 1) ,bcl 2 m RNA及蛋白表达显著降低 ,bax m RNA和蛋白表达显著增加(P均 <0 .0 1)。结论 NHE 1抑制可能通过阻止 PASMCs的〔 Ca2 +〕i增加 ,并引起 bcl 2表达降低及 bax表达增加而诱导和促进缺氧培养的

多西紫杉醇对肺腺癌多药耐药细胞A549/CDDP及其亲代细胞作用机制的初步研究

目的 探讨多西紫杉醇对肺腺癌多药耐药细胞A5 49/CDDP及其亲代细胞的生长抑制作用及其抗肿瘤作用机制。方法 应用MTT比色法和透射电镜等方法,观察A5 49/CDDP及其亲代细胞在多西紫杉醇作用后,细胞生长曲线、生长抑制率及形态学等方面的变化。结果 MTT比色结果表明,多西紫杉醇对A5 49/CDDP细胞及其亲代细胞具有明显的生长抑制作用,并且在0 1～2 μg/ml剂量范围内存在剂量及时间依赖关系。A5 49/CDDP细胞在多西紫杉醇作用12～2 4h较亲代细胞敏感(P <0 0 1) ,在48h开始表现出其药物耐受性(P <0 0 1) ,在72h则与亲代细胞间无显著性差异(P >0 0 5 ) ;透射电镜观察结果发现,A5 49/CDDP细胞及其亲代细胞的胞质内空泡均明显增多,微绒毛减少甚至消失,线粒体出现肿胀甚至空泡化,同时,还存在少数凋亡小体和脱落的不含细胞器成分的细胞质。结论 多西紫杉醇对肺腺癌多药耐药细胞及其亲代细胞均具有明显的生长抑制作用,并可能通过诱导肿瘤细胞坏死、凋亡和胞质自切,从而发挥其细胞毒作用。

脂多糖结合蛋白与CD14结合位点模拟肽的初步筛选

目的应用噬菌体随机12肽库筛选脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)与CD14结合位点的多肽序列。方法以CD14为固相筛选分子,对噬菌体12肽库进行4轮亲合筛选,采用酶联免疫吸附(ELISA)法鉴定筛选后的噬菌体克隆与CD14的结合活性,取结合活性较高的克隆进行DNA测序,推导其多肽序列并与LBP序列比对,再进行竞争抑制实验检测筛选噬菌体与LBP竞争结合CD14的效力。结果挑取的20个噬菌体克隆中,16个结合实验鉴定阳性,取6个亲和力最高的克隆测序,得到3条不同编码的12肽序列(FHRWPTWPLPSP、MHRHPPPITLPL和AAF-HRAHHLTSP),3条多肽与LBP一级结构同源性低,为模拟肽。6个噬菌体克隆有较高的竞争抑制率。结论用噬菌体12肽库成功筛选出LBP与CD14结合位点的模拟肽。

一氧化碳对低氧性肺动脉高压的效应

目的 :探讨外源性低浓度一氧化碳 (CO)在低氧性肺动脉高压中的作用。方法 :6 0只Wistar大鼠随机分为常氧组、低氧组、血晶素组、锡原卟啉组和低浓度CO组 ,每组 12只。处理完毕后 ,右心导管法测定肺动脉平均收缩压和右心室压。杀鼠取肺组织 ,应用分光光度法测定肺组织HO - 1活性 ,并进行常规免疫组织化学染色 ,应用逆转录多聚酶链式反应测定测定肺组织的HOmRNA水平。结果 :①低浓度CO组肺动脉压为(18 5 2± 3 2 4)mmHg ,明显低于低氧组但仍高于常氧组 (均为P <0 0 1) ;②低浓度CO组HO - 1活性为(10 5 2 48± 30 8 49)nmol·g-1(protein) ,显著高于正常组 (P <0 0 1) ;③低浓度CO组HO - 1蛋白表达水平均高于常氧组和低氧组 (P <0 0 1) ;④低浓度CO组HO - 1mRNA水平的光密度值为 2 6 3± 0 18,显著高于正常组 (P<0 0 1)。结论 :CO -HO系统参与了低氧性肺动脉高压的发病机制 ;低浓度CO可以有效促进HO - 1mRNA表达 ,使HO - 1活性和蛋白表达水平升高 ,进而部分降低肺动脉压力。

缺氧条件下大鼠单核细胞NF-κB活性及TNF-α、IL-1β表达变化规律的研究

目的研究缺氧培养的大鼠外周血单核细胞核转录因子-κB(NF-κB)结合活性及肿瘤坏死因子-α(TNFα)、白介素1β(IL1β)表达的变化规律,探讨缺氧与全身炎症反应综合征的关系,为进一步研究老年多器官功能障碍综合征的肺启动机制奠定基础。方法采用明胶法分离大鼠外周血单核细胞,于低氧条件下(3%O2,5%CO2,92%N2)培养0、1、3、6、9、12、24h后,收集细胞及培养液上清,分别采用电泳迁移分析法(EMSA)、逆转录PCR(RTPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其NF-κB活性及TNF-α、IL-1β表达量。结果缺氧1～12h,NFκB结合活性及TNFα、IL1β表达量均显著高于正常(P<0.01),其峰值见于缺氧6h。缺氧24h,上述指标与正常无显著差异(P>0.05)。NFκB结合活性与TNFα、IL1βmRNA和蛋白表达水平显著相关(P<0.01,P<0.05)。结论缺氧可显著增强大鼠外周血单核细胞的NFκB结合活性,并可诱导其产生大量的促炎症因子TNFα、IL1β,这些变化可能与急性呼吸窘迫综合征时血浆中大量促炎症因子持续存在密切相关。