基于磁分离方法的猪胰岛素受体分离与活性分析

目前,胰岛素受体的分离提取方法为凝集素亲和层析与以胰岛素作为配体的亲和层析。建立磁分离法,采用胰岛素受体亲和磁分离探针提取受体蛋白,对提取条件进行优化,并以免疫印迹法检测胰岛素作用下受体蛋白酪氨酸的自磷酸化反应。结果表明,磁分离探针与粗提取总蛋白孵育16 h是提取受体蛋白的较优条件,所得胰岛素受体保持了其生物活性,能够发生自磷酸化反应。这些结果表明磁分离方法可应用于胰岛素受体的分离纯化,该方法简便、特异性强、稳定、可靠,为胰岛素信号传导、糖尿病病理、药物筛选等研究提供了有效的研究工具。

水稻剑叶形态QTL定位及候选基因分析

叶片是水稻的重要器官,是进行光合作用的主要场所,而叶长、叶宽、叶面积等剑叶形态相关性状能够直接影响叶片的光合效率.研究水稻剑叶形态相关性状的QTL(quantitative trait loci)位点,并通过遗传育种的手段对水稻剑叶形态进行改良,可以为培育理想株型的水稻提供理论依据.本研究以籼稻品种华占(HZ)为父本,粳稻品种热研2号(Nekken2)为母本,杂交获得F1代后,连续自交多代得到120个重组自交系(recombinant inbred lines,RIL)群体,将其作为实验材料.在相同且适宜的条件下培养后,对水稻分蘖期和成熟期剑叶叶长、叶宽、叶面积等性状进行考察分析,同时利用该RIL群体构建遗传图谱,对水稻分蘖期和成熟期剑叶叶长、叶宽、叶面积性状的QTL进行定位分析,共检测到35个剑叶形态相关性状的QTL.其中包含6个与剑叶叶长相关的QTL(分蘖期5个、成熟期1个),其中一个的LOD值高达6.92;8个与剑叶叶宽相关的QTL(只在分蘖期检测到),其中一个的LOD值高达4.51;21个与剑叶叶面积相关的QTL(分蘖期12个、成熟期9个),其中两个的LOD值分别高达6.37和4.06.对这些QTL区间内与剑叶叶长、叶宽、叶面积相关的候选基因进行定量分析,发现LOCOs02g52040,LOCOs03g46610,LOCOs04g52230,LOCOs04g44150,LOCOs04g52479,LOCOs09g37400,LOCOs12g42020这7个基因在双亲间的表达量差异显著,结合亲本剑叶叶长、叶宽、叶面积的数据结果,推测LOCOs04g52230,LOCOs04g44150,LOCOs09g37400,LOCOs12g42020的高表达可能会促进水稻剑叶的增宽增长,叶面积增大,而LOCOs02g52040,LOCOs03g46610,LOCOs04g52479的高表达可能抑制水稻剑叶的生长.本研究通过QTL分析,挖掘了调控水稻剑叶叶长、叶宽及叶面积的QTL位点,为培育株型优良的水稻新品种提供了参考.