Wnt信号通路在口腔医学中的研究进展

Wnt信号通路是参与胚胎及器官发育的主要四大类信号传导途径之一，是公认的在胚胎及器官发育过程中对模式形成和分化起指导作用的一种重要信号系统。Wnt信号系统在颌面部发育、牙胚发育、牙齿的形态发生及颌面部肿瘤等1：3腔医学领域中的作用已为越来越多的证据所证实。

流体剪切力对成骨细胞LEF-1蛋白表达的影响

目的:探讨MC3T3-E1细胞在流体剪切力作用下LEF-1的表达。方法:通过流体剪切加载系统对MC3T3-E1爬片细胞施加12dyn/cm的流体剪切力,分别作用0h,2h,4h,8h,12h,用RT-PCR方法检测细胞受力前后LEF-1 mRNA表达的变化;应用免疫荧光双标记法检测不同时间点流体剪切力作用下MC3T3-E1细胞中的LEF-1 mRNA表达改变。结果:RT-PCR和免疫荧光双标记法的结果表明12dyn/cm 8h流体剪切力作用下的MC3T3-E1细胞LEF-1 mRNA的表达较其它各组明显增强。结论:通过流体剪切力力学刺激,激活了成骨细胞LEF-1/TCF1转录活动,LEF-1 mRNA的表达增强可能是成骨细胞经典Wnt信号通路对剪切应力的应答反应。

流体剪切力对人牙周膜细胞LEF-1 mRNA表达影响研究

目的探讨人牙周膜细胞在流体剪切力作用下淋巴样增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)m RNA的表达。方法对人牙周膜细胞进行原代培养;通过流体剪切力加力系统对人牙周膜细胞施加1.2 Pa的流体剪切力,作用0、0.5、2、4、8 h后,用RT-PCR方法检测细胞受力前后LEF-1 m RNA的表达变化。结果人牙周膜细胞在1.2 Pa的流体剪切力作用8 h后,LEF-1 m RNA的表达升高。结论流体剪切力刺激活化了人牙周膜细胞中LEF-1的转录,LEF-1 m RNA的表达升高,可能是在剪切应力作用下Wnt信号通路的应答反应。

Wnt信号通路对氢氧化钙促进人牙髓干细胞成骨向分化的调控

目的初步探讨Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在人牙髓干细胞(hDPSCs)成骨向分化中的作用。方法采用激光扫描共聚焦技术检测氢氧化钙作用14d 后hDPSCs的细胞骨架变化和经典Wnt信号通路关键启动因子β-catenin 的表达及细胞定位。分别上调和抑制Wnt信号通路信号,通过蛋白质印迹(Western Blot)实验和茜素红染色实验检测氢氧化钙作用14d 后hDPSCs 的成骨向分化和矿化情况。结果氢氧化钙作用效应下hDPSCs的细胞骨架出现结构重排,β-catenin 自细胞核内向核外转移。Dickkopf相关蛋白1(DKK-1)阻断Wnt信号通路后,hDPSCs的钙结节数少于单纯氢氧化钙效应细胞;氢氧化钙作用下的hDPSCs 表达牙本质涎磷蛋白(DSPP)。结论氢氧化钙可下调经典Wnt信号通路的表达,促进hDPSCs的成骨向分化和矿化以及成牙本质向分化。