基质金属蛋白酶与宫颈癌的相关性研究进展

宫颈癌是宫颈恶性上皮性肿瘤,与人乳头瘤病毒感染、长期口服避孕药、多胎妊娠等有关,前期无特异性表现,易漏诊。基质金属蛋白酶(MMPs)是一类钙离子、锌离子依赖的蛋白水解酶,参与细胞外基质、基底膜降解过程,在多种肿瘤组织中呈高表达。MMPs包含20多种酶,其中某些成员参与了宫颈癌组织血管新生、癌细胞迁移的过程,阻断或抑制MMPs的表达,对控制肿瘤进展、延长患者生存期意义重大。目前,MMPs已被证实在诸多恶性肿瘤中异常表达,且直接影响疾病的诊断与治疗,并被作为主要的肿瘤标志物,考虑其可能也与宫颈癌有一定联系,或可能对宫颈癌的诊治也有一定指导价值。

APEX1基因多态性影响结肠癌细胞的细胞代谢的机制

目的探究APEX1基因多态性影响结肠癌细胞的细胞代谢的机制。方法筛选保定市第一中心医院2019年2月至2021年12月诊断为结肠癌的160例患者的标本作为结肠癌组,招募同时期在本院进行肠镜活检的200例健康志愿者为对照组。标本培养的结肠癌-细胞和SW480细胞用于体外细胞研究。采用单链构象多态性(SSCP)对样本PCR产物进行突变分析。通过CCK8检测培养细胞增值。通过TUNEL染色分析细胞凋亡。通过伤口愈合试验比较细胞迁移能力。使用Seahorse XFp细胞外通量分析仪测量线粒体应激试验。通过蛋白印迹分析培养细胞中pAkt、FOXO3和MMP9蛋白表达。结果CRC和所选基因APEX1突变之间有显著的相互作用。13T<G-GG基因型的患者发生CRC的风险高于GT和TT基因型(P<0.05),ser129argg-GG和GT基因型的患者发生CRC的风险高于TT基因型(P<0.05),Val131Gly-GG和GT基因型患者发生CRC的风险更高(P<0.05)。培养48 h和72 h后,结肠癌-细胞组细胞增殖能力较对照-细胞组升高(P<0.05)。结肠癌-细胞组细胞凋亡率较对照-细胞组降低(P<0.05)。划痕完成的第1 d,两组细胞伤口愈合率比较无差异(P>0.05)。第3 d、5 d,结肠癌-细胞组伤口愈合率较对照-细胞组增大(P<0.05)。结肠癌-细胞组呼吸耗氧率、胞外酸化率和耦合效率较对照-细胞组降低(P<0.05)。结肠癌-细胞组pAkt、FOXO3和MMP9蛋白表达较对照-细胞组升高(P<0.05)。结论APEX1多态性与CRC之间的存在显著相关性和致癌特性。此外,APEX1多态性通过降低结肠癌的偶联效率来影响线粒体呼吸,并通过Akt/FOXO3/MMP9信号通路的正反馈调控来推动癌症的进展。

APEX1介导Jagged1上调驱动结肠癌进展的机制

目的探讨APEX1介导Jagged1上调驱动结肠癌进展的机制。方法APEX1 siRNA转染NCI-H548和DLD1,构建APEX1低表达细胞;SW480和HT29转染APEX1 shRNA,构建APEX1超表达细胞。NCI-H548细胞用于构建APEX1超表达、Jagged1低表达、Jagged1超表达。将构建的NCI-H548-APEX1、NCI-H548-APEX1+Jagged1siRNA,NCI-H548-APEX1+Jagged1细胞注射小鼠体内用于肿瘤生长检测。通过Western blot分析人结肠癌细胞系中APEX1、Jagged1、Notch1和Notch3的蛋白表达。通过MTT试验检测细胞增殖。通过Transwell小室试验检测细胞迁移侵袭。用指定细胞的上清液培养HUVECs成管进行血管生成试验。通过卡尺测量异种移植小鼠肿瘤大小。结果NCI-H548和DLD1中APEX1、Jagged1、Notch1和Notch3蛋白表达较SW480、HT29升高(P<0.05),在APEX1高表达的NCI-H548和DLD1中,Jagged1和Notch蛋白表达较高。相反,在APEX1低表达的SW480、HT29中,Jagged1和Notch蛋白表达较低。在NCI-H548、DLD1等结肠癌细胞中转染APEX1 siRNA敲低APEX1后,Jagged1蛋白和/Notch蛋白水平显著降低(P<0.05),而在SW480-APEX1和HT29-APEX1细胞中,Jagged1蛋白/Notch蛋白平显著升高(P<0.05)。NCI-H548-APEX1+Jagged1 siRNA细胞增殖较NCI-H548-APEX1降低(P<0.05),NCI-H548-APEX1+Jagged1细胞增殖较NCI-H548-APEX1+Jagged1 siRNA升高(P<0.05)。NCI-H548-APEX1+Jagged1 siRNA细胞迁移、侵袭能力较NCI-H548-APEX1降低(P<0.05),NCI-H548-APEX1+Jagged1细胞迁移侵袭能力较NCI-H548-APEX1+Jagged1siRNA升高(P<0.05)。NCI-H548-APEX1+Jagged1 siRNA细胞血管生成量较NCI-H548-APEX1减少(P<0.05),NCI-H548-APEX1+Jagged1细胞血管生成量较NCI-H548-APEX1+Jagged1 siRNA增多(P<0.05)。注射NCI-H548-APEX1+Jagged1 siRNA细胞的小鼠肿瘤体积较注射NCI-H548-APEX1细胞减小(P<0.05),注射NCI-H548-APEX1+Jagged1细胞的小鼠肿瘤体积较注射NCI-H548-APEX1+Jagged1 siRNA细胞增大(P<0.05)。结论APEX1通过上调Jagged1的表达,正向调节Notch信号通路,从而促进结肠癌在体内和体外的肿瘤发生。由于APEX1、Jagged1和cleaved Notch的水平在人类结肠癌细胞中密切相关,因此通过强烈激活Jagged1/Notch信号,药物靶向APEX1过表达可能是治疗或预防结肠癌的一种很有前景的方法。

APEX1和OGG1基因多态性与结肠癌发病风险、肿瘤分期和预后转归的相关性

目的调查APEX1和OGG1基因多态性与结肠癌发病风险、肿瘤分期和预后转归的相关性。方法筛选保定市第一中心医院2019年2月至2021年12月诊断为结肠癌的160例患者的标本作为结肠癌组,同期收集我院160名健康个体的标本作为对照组。流行病学调查表收集个人数据;通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对APEX1基因中的多态性(ASP/Glu)和OGG1基因中的多态性进行基因分型(Ser/Cys);按性别,年龄,饮酒和吸烟情况对APEX1基因多态性SNP分析。结果ASP/Glu基因型与结肠癌正相关(OR=3.45;95%CI=1.32~5.87,P=0.003)。Glu/Glu基因型也与结肠癌相关(OR=3.87;95%CI=1.48~6.43,P=0.004)。结肠癌组患者和对照组中等位基因频率不同,Glu等位基因的携带者增加了结肠癌的风险(OR=1.85;95%CI=1.24~4.22,P=0.014)。Ser/Cys基因型与结肠癌正相关(OR=2.85;95%CI=1.64~4.27,P=0.001)。Cys/Cys基因型也与结肠癌相关(OR=3.22;95%CI=1.87~5.34,P=0.001)。结肠癌组患者和对照组中等位基因频率不同,Cys等位基因的携带者增加了结肠癌的风险(OR=1.97;95%CI=1.15~4.78,P=0.001)。年龄大于50岁的结肠癌组患者存在ASP/Glu+Glu/Glu基因型的风险增加。吸烟和酗酒的结肠癌组患者,与ASP/Glu+Glu/Glu基因型的风险增加相关。ASP/Glu和Ser/Cys基因型与早期TNM阶段(Ⅰ+Ⅱ期)和晚期TNM阶段(Ⅲ+Ⅳ)有关,具有Cys/Cys基因型与晚期TNM阶段(Ⅲ+Ⅳ)有关。APEX1 Glu/Glu基因型和OGG1 Cys/Cys基因型病情恶化升高。结论APE1 Asp148Glu和OGG1 Ser326Cys多态性与结肠癌风险增加、肿瘤分期和预后转归有关。

酶法检测糖化白蛋白的性能验证及其在2型糖尿病患者中的临床应用价值

目的对宁波瑞源公司酶法检测糖化白蛋白（glycated albumin,GA）定量进行性能验证并评价其临床应用价值。方法收集标本检测酶法测定GA的精密度、准确度、线性范围评价、试剂空白吸光度、参考区间验证,验证其在2型糖尿病患者中的临床性能。结果低、中和高3个浓度GA样品的批内精密度分别为1.45%、1.08%、1.06%,批间精密度分别为1.68%、1.13%、1.19%,相对偏倚为1.54%,在参考物质允许的偏倚范围内,准确度符合相关文件的要求。GA线性分析方程式为Y=0.998X＋1.170,r=1.000,表明GA在129～925μmol/L范围内白蛋白与钴结合线性良好。试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一,本实验测得空白吸光度平均值为0.004 2,显示该试剂对检测结果的干扰非常小。20例无感染的健康体检者中19例在正常参考区间范围内。证明说明书推荐的参考区间适合本实验室检测人群。血清GA对于诊断糖尿病的灵敏度、特异度分别为90.4%、95.8%。GA可用于糖尿病的诊断和疗效评估。结论酶法检测GA的性能指标均符合实验室质量的要求,适用于临床样本的检测及糖尿病患者的疗效评估。

利拉鲁肽对2型糖尿病患者糖化血红蛋白、缺铁修饰白蛋白表达及预后的影响分析

目的观察分析利拉鲁肽对2型糖尿病患者糖化血红蛋白、缺铁修饰白蛋白表达及预后的影响。方法随机抽取我院2型糖尿病患者88例,根据随机数表法分组,对照组与观察组各44例,对照组患者采用二甲双胍(晚饭后口服,初始剂量500mg/d,1次/日,根据血糖控制水平以500mg为单位逐周加量),观察组患者在使用二甲双胍治疗的基础上联合利拉鲁肽(皮下注射,初始剂量0.6mg/d,1次/日,根据血糖控制水平以0.6mg为单位逐周加量,最多1.8mg/次)治疗,两组患者均连续治疗12周,观察两组患者的血糖、体质量指数、糖化血红蛋白、缺铁修饰白蛋白表达情况,并统计不良反应及预后情况。结果治疗前,两组患者的HBA1c、缺铁修饰白蛋白(IMA)、FPG、2hPG水平及BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后4周、8周、12周,HBA1c、IMA、FPG、2hPG水平及BMI均呈现出下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后8周、12周,观察组患者的HBA1c水平[(6.98±0.87)%、(6.71±0.85)%]均明显低于对照组患者[(7.64±0.92)%、(7.45±0.90)%],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后4周、8周、12周观察组患者的IMA、FPG、2hPG水平及BMI均明显低于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗过程中观察组患者不良反应总发生率为11.36%,对照组发生率为9.09%,无明显差异(P>0.05),无严重低血糖发生,对症处理后均好转,安全性高。结论拉利鲁肽可控制2型糖尿病患者缺铁修饰白蛋白表达,降低HBA1c水平、FPG水平、2hPG水平、BMI,有利于维持患者血糖平稳,提高治疗效果,安全性高。

血清CysC、hs-CRP、mALB水平在糖尿病肾损害评估中的临床意义

目的探讨血清胱抑素C(CysC)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、尿微量清蛋白(mALB)水平评估糖尿病肾损害的临床价值。方法选取40例糖尿病肾损害患者作为糖尿病肾损害组,体检健康者40例作为健康组,检测2组受检者血清CysC、hs-CRP水平和尿mALB水平,计算各指标阳性率和评估糖尿病肾损害的敏感性。结果糖尿病肾损害组血清CysC、hs-CRP水平和尿mALB水平均显著高于健康组(P均<0.05),上述各指标阳性率均显著高于健康组(P均<0.05);糖尿病肾损害组血清hs-CRP单项检测的敏感性显著高于血清CysC、尿mALB(P<0.05);CysC+hs-CRP、hs-CRP+mALB、CysC+hs-CRP+mALB联合检测的敏感性均显著高于CysC+mALB(P均<0.05);CysC+hs-CRP、hs-CRP+mALB、CysC+hs-CRP+mALB联合检测的敏感性均显著高于血清CysC、尿mALB单项检测(P均<0.05)。结论糖尿病肾损害患者具有较高的血清CysC、hs-CRP水平和尿mALB水平,血清hsCRP单项检测及CysC+hs-CRP、hs-CRP+mALB、CysC+hs-CRP+mALB联合检测均具有较高的诊断价值。

病毒性毛细支气管炎患儿血清白细胞介素-6、酪氨酸激酶/信号传导及转录激活因子信号通路与免疫功能的关系

目的探讨病毒性毛细支气管炎患儿外周血清白细胞介素-6(IL-6)水平、酪氨酸激酶/信号传导及转录激活因子(JAK/STAT)信号通路及免疫功能的变化。方法选择首次确诊为病毒性毛细支气管炎的112例患儿为研究对象,包括轻度50例、中度40例和重度22例,另外选择30例健康儿童作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-6,Western blot法检测外周血单个核细胞(PBMCs)中磷酸化酪氨酸激酶(p-JAK)和磷酸化信号转导激活转录因子(p-STAT)蛋白相对表达量,免疫透射比浊法检测血清免疫球蛋白(Ig)A、IgG和IgM,流式细胞术检测CD4^(+)和CD8^(+)百分比。结果与对照组比较,轻中度患儿IL-6、p-JAK、p-STAT升高,而IgA、IgG和IgM、CD4^(+)和CD8^(+)百分比降低,差异有统计学意义(P<0.05);重度患儿IL-6、p-JAK和p-STAT高于轻中度患儿,IgA、IgG和IgM、CD4^(+)和CD8^(+)百分比低于轻中度患儿,差异有统计学意义(P<0.05);轻中度患儿上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-6高表达和JAK/STAT信号通路激活可能参与了病毒性毛细支气管炎的发生和发展,并与患儿的体液和细胞免疫功能紊乱密切相关,可为疾病治疗的新靶点提供理论依据。

β_2-微球蛋白评估小儿肾功能的价值分析

目的探讨β2-微球蛋白(β2-MG)评价小儿肾功能的临床价值。方法选取我院2012—2013年收治的肾病患儿25例作为观察组,另选取我院同期健康体检的25例健康儿童作为对照组。比较两组的血清β2-MG、尿素氮(BUN)、血清肌酐(Cr)水平及增高率。结果观察组血清β2-MG、BUN、Cr水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患儿血清β2-MG增高19例(76%),BUN增高4例(16%),Cr增高3例(12%),血清β2-MG增高的例数多于BUN、Cr增的例,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清β2-MG在预测小儿肾功能方面具有一定的临床参考价值,对于临床诊断具有辅助作用。