抗苗勒管激素免疫磁珠的制备及其初步应用

目的制备人的抗苗勒管激素(AMH)免疫磁珠及酶标抗体,初步建立一种基于纳米磁珠的双抗体夹心ELISA快速检测方法。方法构建人AMH重组蛋白表达载体,表达和纯化AMH重组蛋白,将获得的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。通过聚乙二醇将脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,采用ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株,体内腹水诱生法制备抗体,结合Western blot法评价单克隆抗体。利用蛋白A(Protein A)对抗体进行亲和层析纯化,将多克隆抗体作为捕获抗体偶联至纳米级羧基聚合物磁珠,以高碘酸钠法对单克隆抗体进行辣根过氧化物酶标记作为抗体探针,建立并优化基于纳米磁珠的双抗体夹心ELISA。结果获得一株具有良好特异性的抗AMH单克隆抗体,其亚型为IgG2b,纯化的多克隆抗体和单克隆抗体的效价均可达1∶51200。与磁珠偶联后的捕获抗体以及酶标记后的探针抗体仍然具有较好的活性。建立的方法可在1 h左右检测出AMH抗原,检测下限在50 ng/mL左右。结论制备的AMH免疫磁珠能够用于重组AMH的检测,具有快速、可视化的优点。

H9N2亚型禽流感病毒流行特征及疫苗研究进展

H9N2是一种对全球家禽业造成重要影响的低致病性禽流感病毒,1994年至今,其作为一种人畜共患病原体在我国持续流行变异,对家禽产业和人类生命健康构成严重危害。尤其是H9N2病毒与其他流感病毒间发生的基因重排或重组事件,使禽流感病毒可能跨越物种屏障感染人类和其他哺乳动物,给全球公共卫生带来新的威胁。因此,本文对H9N2的流行特征及其疫苗研发进展进行综述,希望对保护禽类产业经济健康和全球公共卫生安全提供参考。

一种可快速、持久且广谱保护新冠病毒感染的鼻喷减毒流感病毒载体新冠病毒疫苗

肌注式新冠病毒疫苗在呼吸道局部诱导的免疫应答较有限,不能高效阻止新冠病毒入侵呼吸道细胞.为此,该研究利用双重减毒的流感病毒载体(CA4-d NS1)开发出一种携带新冠病毒RBD基因的可经鼻腔喷雾方式接种的新冠病毒疫苗CA4-dNS1-nCoV-RBD(简称dNS1-RBD).该疫苗在重症新冠肺炎仓鼠模型中表现出良好的保护效果,鼻喷接种1天后即可快速起效,两剂次鼻喷接种后可提供9个月以上的长效保护,表现为疫苗组仓鼠的体重未见明显下降,肺组织病理无明显损伤.该疫苗对Omicron等各种新冠病毒关切突变株均有广谱作用.另外,小鼠实验显示该疫苗还可广谱保护H1N1和H5N1流感病毒感染.该疫苗的保护机制涉及呼吸道局部的先天免疫应答、特异性T细胞应答、粘膜Ig A抗体应答和体液Ig G抗体应答等.总之,该研究表明快速、持久且广谱的鼻喷流感载体新冠病毒疫苗可与现有肌注式新冠病毒疫苗形成互补,共同抗击新冠疫情.