二甲双胍通过TGF-β1/Smads通路抑制肝癌细胞的增殖和迁移

为探究二甲双胍对人肝癌细胞的增殖、迁移及TGF-β1/Smads信号通路的调控作用,体外培养人肝癌MHCC97H细胞,分为对照组(不做干预)、1.25、2.50、5.00 mmol/L二甲双胍组和抑制剂组(5.00 mmol/L二甲双胍+10μmol/L LY2109761)。本研究中5.00 mmol/L二甲双胍组细胞活力接近50%,故选其为最佳浓度。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Transwell小室、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹法对人肝癌MHCC97H细胞的增殖活力、增殖率、迁移能力及相关因子的表达水平进行分析。与对照组相比,2.50、5.00 mmol/L二甲双胍组和抑制剂组细胞的增殖活力、增殖率减少(P<0.05)。1.25、2.50、5.00 mmol/L二甲双胍组和抑制剂组细胞的迁移数、TGF-β1和p-Smad3蛋白的表达水平、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及纤维黏连蛋白(FN)的mRNA与蛋白质的表达水平较对照组减少,而p-Smad7蛋白的表达水平、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的mRNA与蛋白质的表达水平显著增加,且浓度越高变化越显著(P<0.05);与5.00 mmol/L二甲双胍组相比,抑制剂组抑制剂的加入使各指标变化更显著(P<0.05)。二甲双胍可抑制人肝癌MHCC97H细胞的增殖、迁移和上皮间质转化(EMT)依赖于对TGF-β1/Smads通路的抑制作用,这为肝癌的研究提供了参考依据。

二甲双胍对人肝癌细胞MHCC97H增殖、凋亡的影响及机制

目的探究二甲双胍对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法将对数生长期的人肝癌MHCC97H细胞分为对照组及实验组1、2、3组和抑制剂组,对照组不予干预,实验1、2、3组分别给予2.5、5、10 mmol/L二甲双胍,抑制剂组给予10 mmol/L二甲双胍+10μmol/L转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smads通路抑制剂LY2109761。用倒置显微镜、活细胞计数(CCK-8)、5-乙炔基-2´脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Hoechst 33258染色及蛋白免疫印迹(WB)法对细胞形态、增殖活力、增殖率、凋亡情况及相关蛋白表达进行分析。结果与对照组比较,实验1、2、3组的细胞活力呈剂量依赖性降低(P均<0.05),其中实验3组细胞活力接近50%。与对照组相比,实验1、2、3组和抑制剂组MHCC97H细胞生长受到抑制,细胞增殖率、细胞周期蛋白D1、TGF-β_(1)及p-Smad3蛋白表达降低,而细胞凋亡数量、半胱氨酸蛋白酶-3、Smad7蛋白表达增加,且浓度越高变化越显著(P均<0.05),与实验3组相比,抑制剂组各指标变化更显著(P均<0.05)。结论二甲双胍可抑制人肝癌MHCC97H细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制可能与抑制TGF-β_(1)/Smads信号通路转导有关。

二甲双胍阻断TGF-β1/STAT3信号通路对肝癌细胞黏附、迁移、侵袭及上皮间质转化的作用研究

目的探究二甲双胍通过调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路对人肝癌细胞黏附、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外培养人肝癌MHCC97H细胞,分为对照组(不做干预)、实验组(1.25、2.5、5 mmol·L^(-1)二甲双胍)和抑制剂组(2.5 mmol·L^(-1)二甲双胍+10μmol·L^(-1)TGF-β1/Smads通路抑制剂LY2109761),干预24 h。用活细胞计数(CCK-8)、倒置显微镜、细胞黏附实验、Transwell小室及蛋白免疫印迹(WB)法对细胞增殖活力、细胞形态、黏附、迁移、侵袭能力及相关因子蛋白表达水平进行分析。结果与对照组相比,2.5、5 mmol·L^(-1)二甲双胍组细胞活力具显著差异(P<0.05),为避免细胞死亡太多干扰实验,所以选取二甲双胍2.5 mmol·L^(-1)作为最适浓度加入10μmol·L^(-1)TGF-β1/Smads通路抑制剂LY2109761。与对照组比较,2.5、5 mmol·L^(-1)二甲双胍组和抑制剂组增殖活力显著减少(P<0.05)。与对照组比较,实验组和抑制剂组MHCC97H细胞生长受到抑制,黏附能力、迁移能力、侵袭能力及TGF-β1、p-Smad3、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)蛋白表达水平显著减少,Smad7和E-钙粘蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平显著升高,且浓度越高变化越显著(P<0.05);与2.5 mmol·L^(-1)二甲双胍组相比,抑制剂组抑制剂的加入使细胞增殖活力、生长、黏附、迁移、侵袭能力及蛋白表达水平等各指标变化更显著(P<0.05)。结论二甲双胍可抑制人肝癌MHCC97H细胞的增殖活力、黏附、迁移、侵袭和EMT进程,TGF-β1/Smads信号通路的抑制是其潜在作用机制之一。

高中体育教学中终身体育意识的培养策略探析

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新课改下高中体育教学的优化策略

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