发酵液中维生素B_(12)检测方法的比较

为建立准确检测发酵液中微量维生素B12的检测方法,采用对照薄层层析法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)以及色谱-质谱联用(LC-MS)检测发酵液中维生素B12的含量。结果表明,TLC和HPLC在检测发酵液中维生素B12时结果误差较大,LC-MS能够精确检测出发酵液中存在的微量的维生素B12。

大肠杆菌BL21(DE3)中定向进化突变体库构建的方法比较

定向进化的突变体库建立是定向进化是否成功的关键因素,只有建立足够大的库容才有可能筛选到合适的突变体。然而用来做定向进化的宿主菌的转化效率并不总是那么高,难以达到建库要求。而且在以常规分子克隆方法做连接转化时,耗时长,效率低等问题也影响了突变体库的建立,高效的克隆转化方法是定向进化所需求的。本文以大肠杆菌BL21(DE3)为转化宿主菌,挑选了一种新的高效的克隆转化方法,与现在实验室常规克隆转化方法进行了比较,证明了PCR多聚质粒的克隆转化方法在定向进化突变体库构建中的优势。为定向进化突变体库的构建提供了新的高效可靠的技术方法。