不同倍性虹鳟红细胞规格及血液学指标的比较

为探究二倍体和三倍体虹鳟(Onchorynchus mykiss)在血液生理学方面是否存在一定差异,本文以虹鳟为实验对象,采用流式细胞仪对虹鳟进行倍性鉴定,对三倍体和二倍体虹鳟的红细胞胞体和红细胞核大小进行测量,测定部分血液学指标,并进行比较分析。研究显示,三倍体虹鳟红细胞及核的长轴、短轴、面积、体积均极显著大于二倍体(P<0.01);三倍体虹鳟血液中的红细胞数目(RBC)、红细胞压积(HCT)极显著低于二倍体(P<0.01),而白细胞数目(WBC)显著高于二倍体(P<0.05);三倍体虹鳟血清中碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)浓度显著低于二倍体(P<0.05),谷氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)含量与二倍体差异不显著(P>0.05);三倍体和二倍体虹鳟血清渗透压无显著性差异(P>0.05);研究结果显示,在不同倍性的虹鳟中,其红细胞大小及部分血液生理生化指标受倍性影响显著。

静水压法诱导虹鳟三倍体技术研究

本文共进行三组实验,分别为起始时间为10~30 min、静水压压力为68.9 Mpa、持续时间为5 min的单因素实验一;起始时间为10~40 min、静水压压力为68.9 Mpa、持续时间为5 min的单因素实验二;以及起始时间(20, 30, 40 min)、压力大小(60, 65, 70 Mpa)、持续时间(3, 5, 7 min)的三因素正交实验三。实验一结果显示,当起始时间为30 min时,可以得到100%的三倍体率,并且该组的发眼率和上浮率相对于对照组均无显著性差异。实验二结果显示,综合发眼率、上浮率、三倍体率三个数据,最优的三倍体诱导起始时间为受精后的30~35 min。实验三结果显示,起始时间为20~40 min,静水压压力为60~70 Mpa,持续时间为3~7 min对三倍体率的影响无明显差异,在此时间范围内诱导都能够获得100%的三倍体率。结果说明,在保证子代一定的存活率的基础之上可以有效地获得100%的虹鳟三倍体。

急性高温胁迫对虹鳟二倍体和三倍体幼鱼hsps基因表达的影响

本文以二倍体和三倍体虹鳟(Oncorhynchus mykiss)幼鱼为实验对象,探究急性高温胁迫下,不同倍性虹鳟热休克蛋白家族(hsps)基因表达水平。选取二倍体和三倍体虹鳟幼鱼,分别进行常温处理(14℃)和高温胁迫(22℃),并在高温胁迫48h后,将虹鳟置于常温(14℃)恢复48h。分别在实验开始的0,12,24,48,72和96h进行取样,测定实验虹鳟肝脏和肌肉组织中的hsp70s(hsp70a,hsp70b),hsp90s (hsp90a1a,hsp90a2a,hsp90a1b,hsp90a2a,hsp90b1,hsp90b2)mRNA水平。结果表明:hsp70s和hsp90s的各个亚型均能对热胁迫做出反应,并具有应答幅度的组织特异性和时间特异性。在胁迫6和24h后,上述基因mRNA水平达到最高,随后降低。三倍体幼鱼肝脏和肌肉hsps mRNA表达水平的峰值显著高于二倍体幼鱼。研究结果显示,三倍体虹鳟对高温环境更为敏感,需要消耗更多的能量用于适应高温环境。

热休克法诱导虹鳟三倍体技术研究

本文以虹鳟(Oncorhynchus mykiss)为实验对象,采用热休克法诱导虹鳟三倍体,利用流式细胞仪(CytoFLEX S)以及比较红细胞长径对虹鳟倍性进行鉴定;在热休克法诱导虹鳟三倍体的两个正交重复实验中,主要研究了处理的起始时间、温度、持续时间三个因素对于虹鳟三倍体诱导效果的影响,结果显示,在实验设定的起始时间、温度、以及持续时间内,温度大小对发眼率、诱导率以及综合评分影响程度都是最大(R值最大),在发眼率结果中,25℃时有最高的发眼率;在诱导率结果中,25℃、27℃明显高于29℃组的诱导率;在综合评分结果中25℃、27℃明显高于29℃组的综合评分。在起始时间为10~20 min内,起始时间对诱导率没有显著影响,但起始时间为20 min时诱导效果最优。在起始时间与处理强度双因素实验结果中,综合评分高于70.00%的共两组,分别为第一组、第二组,热休克的起始时间都是25 min,作用参数分别为25℃持续20 min、27℃持续15 min,是较为理想的诱导三倍体处理强度参数。

急性高温胁迫后二倍体和三倍体虹鳟抗氧化能力差异比较研究

本文以二倍体(2n)和三倍体(3n)虹鳟幼鱼为实验材料,选取体长、体重相近,无病无伤,体格健壮的实验鱼,在15℃水温中暂养2周后,直接放到23℃ &#177;0.5℃高温水中,观测急性温度胁迫对虹鳟幼鱼的总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性的影响,以及对总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶基因相对表达量的影响。结果表明:在48 h高温胁迫过程中,实验鱼肌肉、内脏团组织的SOD、CAT活性均呈现先上升后下降趋势,三倍体虹鳟肌肉组织中SOD活性在24h显著高于其他时间点(P 0.05);在肝脏组织中,SOD1、CAT的相对表达量呈现相似结果,但是二倍体虹鳟在6 h出现峰值(P 0.05),在肝脏组织中,SOD1、CAT的相对表达量结果相似,都是二倍体虹鳟变化不显著(P >0.05),三倍体虹鳟在72 h处有显著的升高,96 h降低至与48 h相同的相对表达量。本研究表明不同倍性的虹鳟在相同的温度胁迫下抗氧化能力存在差异。