消退素D1对转化生长因子β诱导的大鼠肺成纤维细胞纤维化增殖及胶原蛋白合成的抑制作用

目的探讨消退素D1对转化生长因子β(TGF-β)诱导的大鼠原代肺成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成以及向肌纤维母细胞转化的影响。方法分离和培养大鼠原代肺成纤维细胞,用TGF-β(10μg/L)干预建立成纤维细胞体外纤维化增殖模型,分别应用不同浓度(0、10、25、100μmol/L)消退素D1作用于经TGF-β诱导的肺成纤维细胞。采用BrdU细胞增殖试剂盒测定细胞增殖;采用实时定量聚合酶链反应测定mRNA表达;同时应用蛋白质印迹法检测肺成纤维细胞胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。结果消退素D1能够抑制TGF-β诱导的肺成纤维细胞增殖且呈剂量依赖性,与TGF-β组[(156. 0±13.6)%]相比,TGF-β+消退素D1 10μmol/L组[(130.0±4. 6)%]、TGF-β+消退素D1 25μmol/L组[(118.0±5.2)%]、TGF-β+消退素D1 100μmol/L组[(99.0±12.6)%]细胞增殖均明显受到抑制(均P <0.01)。该抑制作用依赖于磷脂酰肌醇-3-激酶和消退素受体。消退素D1能够明显抑制TGF-β诱导的肺成纤维细胞的胶原蛋白合成及α-SMA表达(均P<0.01)。结论消退素D1抑制TGF-β诱导的大鼠肺成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成以及向肌纤维母细胞转化标记的表达。

麻醉浓度七氟醚对TM3小鼠睾丸间质细胞活力的影响

目的探讨麻醉浓度七氟醚对TM3小鼠睾丸间质细胞活力的影响。方法采用随机数字表法，将TM3小鼠睾丸间质细胞株随机分为3组，每组24皿：对照组（C组）、2％七氟醚组和5％七氟醚组（SEV1、2组）。将细胞放置于37℃的密闭培养箱中，通人七氟醚，维持浓度2％（SEV3组）或5％（SEU组）。c组仅给予95％空气和5％CO2的混合气体。于七氟醚孵育2、4、6h（T1-3）时采用光学双目倒置显微镜观察细胞形态，并采用CCK-8法测定细胞活力。于七氟醚孵育6h后，收集C组和SEV2组细胞，应用基因芯片筛选差异基因。结果与C组和SEV1组比较，SEV2组L时细胞活力明显降低（P〈0．05），T1、3时差异无统计学意义（P〉0．05）；SEV1组和C组各时点细胞活力比较差异无统计学意义（P〉0．05）。C组和SEV1组细胞形态未见异常，SEV2组细胞发生形态学改变。与C组比较，SEV2组差异表达的基因有45个，差异倍数最大的有：前列腺素内过氧化物酶2基因、趋化因子配体2基因和双特异性磷酸酶1基因。结论麻醉浓度七氟醚可抑制TM3小鼠睾丸间质细胞的活力，且与浓度有关，其机制可能与前列腺素内过氧化物酶2基因、趋化因子配体2基因和双特异性磷酸酶1基因表达异常有关。