SFE-CO_2萃取和水蒸气蒸馏提取熏衣草精油的抗菌活性比较与GC-MS分析

目的：考察用SFE—CO2萃取（SFE—CO2）技术和水蒸气蒸馏法（HD）提取的熏衣草精油的体外抗微生物活性，比较两者化学成分的差异。方法：采用滤纸片琼脂平板扩散法和琼脂稀释法检测SFE—CO2和HD熏衣草精油对4种细菌和4种真菌的抗菌活性，采用GC—MS技术对其进行化学成分分析。结果：两种提取法的熏衣草精油对测试的所有微生物均具有不同程度抗菌作用，SFE—CO2萃取物抗细菌与抗真菌作用均较HD精油强，其最低抑菌浓度（MIC）为0．63～3．33g·L^-1，最低杀菌浓度（MBC／MFC）为1．04～5．00g·L^-1。GC—MS法分别鉴定出SFE—CO2和HD精油的34种和29种化合物，其质量分数为出峰物质总量的95．51％和98．39％，两者主要成分中乙酸芳樟酯和乙酸薰衣草酯含量相差较大。结论：SFE—CO2和HD熏衣草精油均对试验菌株有抗菌活性，SFE—CO2法提取的熏衣草精油抗菌活性较强。

固定化谷氨酸脱羧酶转化γ-氨基丁酸的研究

目的用固定化谷氨酸脱羧酶转化制备γ-氨基丁酸(GABA)。方法以海藻酸钠与明胶为协同作用载体包埋固定化酶,考察影响固定化酶活性的因素,获得固定化酶的优化条件,并将酶应用于制备GABA。结果海藻酸钠、明胶、氯化钙和戊二醛浓度分别为2.5%,1.0%,3.0%和0.3%,硬化时间4 h,固定化酶的相对活性最高,酶活回收率达到65.3%。以谷氨酸为底物,固定化谷氨酸脱羧酶为催化剂,采用填充床反应器连续制备GABA,连续反应60 h,酶相对活性仍保持在初始值的76.9%,谷氨酸转化率为98.7%。结论该固定化谷氨酸脱羧酶可应用于生物转化法连续制备GABA。

响应面法优化一株中度嗜盐菌的培养条件

利用响应面法优化一株筛选自腌肉制品表面中度嗜盐菌的培养条件。在单因素实验基础上,采用Plackett-Burman设计对影响嗜盐菌生长的重要培养基成分和工艺条件进行筛选,确定主要影响因子为盐度、初始pH和培养温度;再用最陡爬坡实验逼近最大响应区域;最后用中心组合设计和响应面分析法,确定了主要影响因子的取值。优化后的培养基组成为胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl54.8g/L;培养工艺条件为初始pH7.9、培养温度32.8℃、装液量70mL/250mL摇瓶、摇床转速120r/min。在此培养条件下培养2d后,菌体密度(OD600nm净增值)达3.349±0.021,较优化前提高了13%。

重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ工程菌高密度发酵工艺优化

目的优化表达重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)工程菌的高密度发酵条件。方法考察培养基以及诱导时机、诱导剂量和诱导时间对蛋白表达的影响;用自控发酵罐进行分批补料培养实验,确定优化工艺条件。结果以2×YT+0.5%葡萄糖为发酵培养基,经0.8 mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导5 h,通过pH-stat反馈补料方式实现工程菌高密度发酵与目的蛋白高效表达,每1 L发酵液收获干菌体50.1 g,IGF-Ⅰ含量达5.25 g/L。结论建立了IGF-Ⅰ工程菌优化的高密度发酵工艺,为IGF-Ⅰ的下游纯化和工业化生产奠定了基础。

30M^3标准型通风发酵罐进行液态深层米醋发酵的应用研究

本文报道了以 30M3标准型风发酵罐配合ND三级空气过滤装置为主体发酵设备进行液态深层发酵制醋的研究 ,分析了该罐较之自吸式发酵罐在保持纯种发酵、发酵条件和节能等方面所具有的优势。研究证实 :在此罐中采用半连续分割工艺制醋 ,平均产酸达 6 31% ,酒精转酸率98 1% ,生酸速度 0 12 4 % /h ,主料出醋水平达 12 2 0kg醋 /kg米 (折合含醋酸 3 5 %成品计 ) 。

中草药沐浴剂抗衰老作用研究

研究了以当归、黄芪、白芷和细辛等药物提取液及合剂与沐浴剂基质复配制备的中草药沐浴剂对小鼠皮肤的抗衰老作用。将9月龄小鼠每日浸浴于沐浴剂中,早晚15min各一次,3个月后处死,取背部皮肤,测定小鼠皮肤中超氧化歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)与羟脯氨酸(HYP)含量。结果表明:加入当归、黄芪、白芷和细辛提取液及其合剂的沐浴剂均有明显抗衰老作用,加入合剂效果好于单味药液。经含有质量分数5%和10%药液合剂的沐浴剂浸浴的试验小鼠SOD浓度为18 34U/mL±0 59U/mL和19 78U/mL±0 63U/mL,LPO为20 41nmol/mL±3 17nmol/mL和18 47nmol/mL±2 90nmol/mL,HYP质量分数达35 57mg/g±4 25mg/g和39 59mg/g±4 04mg/g,与对照组相比均P<0 05,证明该中草药沐浴剂具有明显的抗皮肤衰老作用。

IGF-I工程菌的高密度发酵与工艺优化

为研究表达重组IGF-I(人胰岛素样生长因子-I)工程菌的优化发酵工艺条件,考察了3种不同培养基以及诱导时机、诱导剂量和诱导时间对蛋白表达的影响,用5L自控发酵罐进行分批补料培养实验,确定高密度发酵工艺条件。结果表明,以2×YT+0.5%葡萄糖为发酵培养基,经0.8mmol/LIPTG诱导5h,通过控制溶解氧以及pH反馈补料方式,发酵液最终菌体密度达到OD65021.7(菌体50.1g/L),目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的30%。建立了该工程菌优化的高密度发酵工艺,为IGF-I的下游纯化和工业化生产奠定了基础。

黄芪沐浴剂抗皮肤衰老作用研究

报道了以黄芪提取液为原料复配制备沐浴剂样品的抗皮肤衰老作用试验效果。将 9月龄小鼠每日浸浴于含有不同浓度药液的沐浴剂中 ,早晚 15min各一次 ,3个月后处死 ,取背部皮肤 ,测定小鼠皮肤中羟脯氨酸 (HYP)、超氧化物歧化酶 (SOD)与过氧化脂质 (LPO)含量。经含有 5 %和 10 %药液沐浴剂浸浴的试验小鼠HYP含量分别为 32 .6 8± 3.2 1mg/g和 38.6 6± 3.84mg/g ,SOD含量为 17.94± 0 .5 6U/mL和 19.78± 0 .6 3U/mL ,LPO为 2 0 .2 7± 2 .6 5nmol/mL和 18.4 7± 2 .90nmol/mL ,与对照组相比均P <0 .0 5。

实践教学中双语教学问题之探讨——以生物工程专业实验选修课为例

从教学目的、教材和教学内容的选择、教学手段的运用以及评价与反馈体系的建立等几方面对生物工程专业双语教学实验选修课《微生物产物的开发研究》的教学实践进行总结和探讨,为推进双语教学改革、探索适合于应用型生物工程专业双语教学的模式提供参考。

小鼠脾淋巴细胞的玻璃化冷冻保存

试验研究了玻璃化冷冻法超低温保存小鼠脾淋巴细胞。结果表明 ,采用PVS2 玻璃化保存液 ,以二步法操作并以 3 7℃复苏后 ,经MTT法检测 ,细胞存活率可达 90 .8%以上。冻存后细胞能恢复生长并能形成杂交瘤细胞。

安全高效的拟除虫菊酯类化合物在家用气雾杀虫剂中的应用

介绍了应用于家用气雾杀虫剂的各种拟除虫菊酯类化合物,家用杀虫剂的配方实例以及杀虫效果检测数据。

人白细胞介素-4基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达

采用RT-PCR法从经LPS诱导刺激的人外周血淋巴细胞中克隆了人白细胞介素-4（human interleukin-4，hIL-4）基因。为高效表达hIL-4，促进其临床应用，将hIL-4插入家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中，构建重组载体pBacPAK-hIL-4，并与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞，获得重组病毒BacPAK-hIL-4。将重组病毒感染家蚕5龄幼虫和蚕蛹（1×10^5PFU／头），表达产物以ELISA、SDS-PAGE和Western blotting方法检测。用活化的人外周血T淋巴细胞测定表达产物体外生物活性。ELISA法结果表明hIL-4在感染病毒后96h的蚕血淋巴和120h的蚕蛹中表达量最高，分别达到2．3μg/mL蚕血淋巴和10．2μg／mL体液；SDS-PAGE、Western blotting分析表明表达产物分子量约20kD；表达产物对活化的T淋巴细胞增殖具有明显促进作用。

重组人胰岛素样生长因子1工程菌的高密度发酵(英文)

背景:胰岛素样生长因子1是人体内重要的细胞调控因子,已用于治疗糖尿病等多种疾病,工程菌发酵生产工艺研究是胰岛素样生长因子1实现产业化从而扩大临床应用的关键因素。目的:探讨表达重组人胰岛素样生长因子1工程菌的高密度发酵与表达条件。设计、时间及地点:酶基因工程实验,于2007-05/2008-05在浙江树人大学生物技术实验室完成。材料:重组人胰岛素样生长因子1大肠杆菌表达菌株E.coliBL21(DE3)/pET22a-IGF-1由浙江树人大学生物技术实验室保存。高密度发酵补料培养基为:葡萄糖300g/L,蛋白胨40g/L,酵母粉10g/L,Na2HPO4280mmol/L,NaH2PO4·2H2O120mmol/L,MgSO410mmol/L,氨苄青霉素100mg/L。方法:菌株活化后,进行摇瓶发酵试验,分别改变培养基种类、诱导剂异丙基硫代半乳糖苷浓度、诱导时间等参数,优化摇瓶发酵条件。依据摇瓶发酵优化条件,采用自控5L发酵罐进行分批补料发酵试验。培养分分批培养和分批补料2个阶段。采用pH反馈流加的方式补料,在对数生长中后期开始诱导,加入异丙基硫代半乳糖苷至设计终浓度,培养4～6h。主要观察指标:重组人胰岛素样生长因子1工程菌的发酵与产物表达情况。菌体浓度与菌体干重测定,目的蛋白表达量的测定,发酵液葡萄糖浓度的测定。结果:以2×YT+5g/L葡萄糖为发酵培养基,经0.8mmol/L异丙基硫代半乳糖苷诱导5h,通过控制溶解氧以及pH反馈补料方式,实现工程菌高密度发酵与目的蛋白高效表达,每升发酵液收获干菌体50.1g/L,重组人胰岛素样生长因子1含量达5.25g/L。结论:实验成功建立了重组人胰岛素样生长因子1工程菌优化的高密度发酵工艺,为重组人胰岛素样生长因子1的下游纯化和工业化生产奠定了基础。

提高L-谷氨酸脱羧酶产量与稳定活力的研究

通过正交试验，获得了利用大肠杆菌生产Ｌ－谷氨酸脱羧酶的最优培养基配方与工艺条件．通过对精制条件的研究，发现丙酮温度过低是导致酶活力降低的主要因素．用０℃左右的丙酮溶液处理菌悬液可保证酶制剂活力．

噬菌体展示技术研究进展

本文回顾了噬菌体展示技术的研究进展。应用噬菌体展示技术将外源蛋白通过与噬菌体外壳蛋白融合而表达于噬菌体颗粒表面,被展示的外源蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物活性。目前此技术已被广泛应用于生命科学研究的不同领域,尤其在人工抗体和疫苗的研制、多肽药物的开发等方面,具有广阔应用前景。

光合细菌产生5-氨基乙酰丙酸(ALA)的研究

从 36个光合细菌菌株中筛选出的 7株紫色非硫红假单胞菌有产 ALA能力 ,其中菌株 99- 2 8ALA产量最高 .用紫外线对菌株 99- 2 8进行诱变处理 ,筛选出产量比野生菌株高 1倍多的菌株 L- 1.对影响菌株的生长和 AL A产量的因子进行了探索 .抑制剂加入时间和加入次数对 AL A产量有显著影响 .在最佳条件下 (p H7.5 ,培养对数生长期加入 AL A脱水酶抑制剂乙酰丙酸 30 mmol,AL A生物合成前体甘氨酸 30 mmol和琥珀酸 30 mmol,30 0 0 lx光照 ) ,菌株 L - 1的 AL A产量可达 2 2 .15 mg/ L.

生物转化法合成天然香料香精

分析了生物转化法合成天然香料香精的优势与发展前景,概述了生物转化法合成天然香料香精的基本原理,介绍了生物转化法合成天然香兰素和2-苯乙醇的方法,旨在推动对生物转化法合成天然香料香精的研究和开发。

紫外分光光度法测定发酵液中的2-苯乙醇含量

建立了紫外分光光度法测定发酵液中2-苯乙醇含量的方法。用正庚烷萃取待测样品中的2-苯乙醇,然后直接测定正庚烷溶液258nm波长下的吸光度,根据标准曲线可直接计算出发酵样品中2-苯乙醇含量,方法的检出限为0.19g/L,样品加样回收率为100.4%,变异系数为1.66%。该方法具有准确度高、重现性好、操作简单等优点。

柱前衍生化RP-HPLC法测定L-叔亮氨酸含量

以2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（GITC）为手性衍生化试剂，建立一种反相高效液相色谱测定L-叔亮氨酸的方法．以GITC为衍生化试剂对L-叔亮氨酸进行衍生化，优化衍’生化试剂用量和衍’生化时间等反应条件．使用岛津C18色谱柱（25Omm×4．6mm，5μm）分离衍生化产物，流动相为V（甲醇）：V（磷酸盐）-58：42的缓冲溶液（pH=2．8），流速为O．6mL／min，检测波长为254nm，柱温3O℃，进样量1O肛L，结果表明叔亮氨酸两个对映异构体的衍生化产物分离良好，在O．2～1．Ommo1／L范围内呈现良好的线性关系（r=O．9996）．该方法准确可靠，重现性好，适用于L一叔亮氨酸的含量测定．