经典名方沙参麦冬汤特征图谱及含量测定研究

目的按古籍方法制备沙参麦冬汤物质基准,建立特征图谱及指标成分检测方法,完善其质量控制体系。方法采用HPLC建立15批沙参麦冬汤物质基准的特征图谱,使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012A版)计算相似度,按2015年版《中华人民共和国药典》“甘草”项下方法测定15批物质基准中甘草苷的含量和转移率。结果以甘草苷为参照峰,沙参麦冬汤特征图谱共标定20个共有峰,指认出2个共有峰,15批物质基准相似度均大于0.9。15批物质基准甘草苷含量为0.053%~0.478%,转移率为38.92%~60.98%。结论本研究建立的方法所得数据真实可靠,可为沙参麦冬汤物质基准的质量控制奠定基础。

黄芪糖蛋白对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的治疗作用及机制

目的:观察黄芪糖蛋白(Huang Qi Glycoprotein,HQGP)对肺纤维化小鼠的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:选取60只健康ICR小鼠,随机分为对照组、模型组及观察组,每组20只。采用鼻腔滴入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型,造模次日起观察组每天每只小鼠腹腔注射HQGP,连续14 d,模型组及对照组腹腔注射等体积的生理盐水;给药后第7、28天每组分别处死5只动物,取肺组织,评价HQGP对肺组织病理形态、肺系数、肺组织羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达的影响。结果:与模型组比较,第7、28天HQGP观察组小鼠的肺纤维化程度减轻,肺组织的TGF-β_1、Hyp、MDA水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),肺组织SOD水平及肺系数显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HQGP可能通过降低胶原合成,提高机体的抗氧化能力,对肺纤维化的发生发展起到治疗作用。

玉林市新型农业经营主体发展现状及对策建议

新型农业经营主体是现代农业建设的重要力量。文章在深入调查研究的基础上,对广西玉林市新型农业经营主体的发展现状、存在问题进行了分析。调查显示,玉林市新型农业经营主体的发展现状为专业大户健康成长、家庭农场方兴未艾、农民合作社发展迅速、农民合作社发展迅速。分析认为,玉林市新型农业经营主体的发展存在实力不强、链条不长、规模不大、素质不高等问题。针对上述问题,提出了加大政策扶持、引导规范发展、促进转型升级、创新经营方式、强化金融支持、注重示范带动等加快培育发展新型农业经营主体的对策建议,以期为推进当前新型农业经营主体培育提供参考。

蒙古黄芪中核糖核酸酶活性蛋白AmPR-10的纯化和性质研究

目的采用全自动智能蛋白纯化系统AKTA Avant25建立蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)的稳定快速分离纯化方法,并分析其理化性质和生物学活性。方法蒙古黄芪经Tris-HCl缓冲液浸提后阴离子交换色谱捕获目标蛋白,疏水色谱精细分离,凝胶滤过色谱进一步精细分离得到AmPR-10。采用MALDI-TOF/TOF质谱法测定相对分子质量,质谱检测后MS/MS Ion Search检索鉴定蛋白,高碘酸-Schiff法判断是否为糖蛋白,琼脂糖凝胶电泳分析核糖核酸酶活性及不同影响因素对核糖核酸酶活性的影响。结果蒙古黄芪粗提液经Q Sepharose Fast Flow、Butyl Sepharose High Performance和SuperdexTM 75 10/300 GL 3步纯化后可得到电泳纯AmPR-10;质谱测定其相对分子质量为16 801;蛋白鉴定其属于PR-10蛋白家族;糖蛋白染色显示其不含糖链。AmPR-10具有显著的核糖核酸酶活性,且其活性对Na Cl浓度、pH值和金属离子的敏感度低,仅0.5 mol/L NaCl、pH 9.0、Mg^(2+)和Co^(2+)对其有微弱的抑制作用,EDTA对AmPR-10核糖核酸酶活性无影响。结论离子交换色谱-疏水色谱-凝胶过滤色谱3步法纯化AmPR-10快速稳定,可应用于其他中药蛋白质的分离纯化。AmPR-10可能在蒙古黄芪抵御RNA病毒侵染中发挥重要作用。

蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10纯化及生物学功能研究

蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein 10,AmPR-10)在蒙古黄芪遭遇环境压力和病原体侵袭时大量表达,该研究旨在探讨AmPR-10的生物学功能。蒙古黄芪干燥根经机械粉碎后缓冲液浸提得到蒙古黄芪总蛋白粗提液,总蛋白粗提液经阴离子交换色谱和凝胶过滤色谱纯化后得到电泳纯AmPR-10。以不同RNA为底物,通过检测260 nm吸光度分析核酸酶活性,结果显示AmPR-10对Yeast tRNA,Yeast RNA,Poly(A)和Poly(C)均表现核酸酶活性,且其最佳反应温度为50℃,最佳反应pH为78,EDTA对其活性无影响,Mg^2+对其活性具有激活作用,Co^2+,Ca^2+和Zn^2+对其活性具有抑制作。AmPR-10与已知核酸酶无序列同源性,可能是一种新的核酸酶。采用Lineweaver-Burk双倒数作图法分析AmPR-10木瓜蛋白酶抑制活性,结果显示AmPR-10是木瓜蛋白酶的非竞争性抑制剂。AmPR-10可能通过抑制半胱氨酸酶活性在蒙古黄芪对抗环境压力和抵御病原体侵袭的过程中发挥重要作用。